| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略词 | 第11-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-38页 |
| ·关于赤霉素国内外研究进展 | 第13-26页 |
| ·赤霉素的生物合成及关键酶研究进展 | 第13-17页 |
| ·GA与外界环境的关系 | 第17-18页 |
| ·GA促进植物生长的机理 | 第18-19页 |
| ·与GA相关的矮化突变体研究进展 | 第19-24页 |
| ·GA20氧化酶研究进展 | 第24-25页 |
| ·赤霉素在草坪草育种中的应用前景 | 第25-26页 |
| ·分子生物学技术在草坪草中的应用 | 第26-35页 |
| ·基因克隆技术在草坪草育种中的应用 | 第26-27页 |
| ·植物基因分离的的策略 | 第27-30页 |
| ·转基因技术在草坪草育种上的应用 | 第30-35页 |
| ·本研究的意义、内容与技术路线 | 第35-38页 |
| ·研究背景、目的、意义 | 第35-36页 |
| ·研究的内容 | 第36-37页 |
| ·技术路线 | 第37-38页 |
| 第二章 GA20氧化酶基因的克隆 | 第38-58页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·菌株及质粒 | 第38页 |
| ·酶及生化试剂 | 第38页 |
| ·试验方法 | 第38-47页 |
| ·总RNA的提取 | 第38-39页 |
| ·反转录 | 第39-40页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第41-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-54页 |
| ·RNA的提取与反转录 | 第47-48页 |
| ·中间片段的克隆 | 第48-49页 |
| ·GA20氧化酶基因3’端片段的分离 | 第49-50页 |
| ·GA20氧化酶基因5’端片段的分离 | 第50-52页 |
| ·全长基因的克隆 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| ·RACE方法的使用 | 第54-55页 |
| ·RNA提取 | 第55页 |
| ·反转录的完整性 | 第55页 |
| ·引物设计 | 第55-57页 |
| ·PCR | 第57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第三章 GA20氧化酶基因在原核细胞中的表达 | 第58-66页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·常用生化试剂 | 第58页 |
| ·菌种和质粒 | 第58页 |
| ·SDS-PAGE所需试剂 | 第58-59页 |
| ·方法 | 第59-61页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·融合蛋白pET-30a-GA20的诱导表达 | 第60页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-64页 |
| ·原核表达载体构建 | 第61页 |
| ·GA20氧化酶基因原核表达载体的鉴定 | 第61-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 第四章 GA20氧化酶基因在烟草中表达 | 第66-85页 |
| ·材料 | 第66页 |
| ·载体和菌种 | 第66页 |
| ·试剂 | 第66页 |
| ·方法 | 第66-74页 |
| ·适合于双子叶植物的GA20氧化酶基因的正、反义表达载体 | 第66-67页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备、转化 | 第67-68页 |
| ·农杆菌介导法转化烟草 | 第68-69页 |
| ·转基因烟草的分子鉴定 | 第69-74页 |
| ·结果与分析 | 第74-83页 |
| ·植物表达载体pC35S1303GA20正义和反义表达载体的构建 | 第74-78页 |
| ·GA20氧化酶基因的正义和反义基因在烟草中的表达 | 第78-83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| ·农杆菌介导法转化烟草 | 第83页 |
| ·植物DNA提取的方法 | 第83页 |
| ·Southern杂交需要注意的问题 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| 第五章 GA20氧化酶基因在高羊茅和结缕草中表达 | 第85-101页 |
| ·植物材料 | 第85页 |
| ·方法 | 第85-90页 |
| ·适合于单子叶植物的正义和反义表达载体构建 | 第85-86页 |
| ·外植体的获得 | 第86-87页 |
| ·遗传转化 | 第87-88页 |
| ·GUS基因表达 | 第88-89页 |
| ·转化植株的筛选再生 | 第89页 |
| ·抗性植株的分子检测 | 第89-90页 |
| ·对转化植株进行田间管理 | 第90页 |
| ·结果与分析 | 第90-98页 |
| ·植物正义和反义表达载体pC1303GA20的构建 | 第90-93页 |
| ·Gus基因的表达检测 | 第93页 |
| ·抗性植株的获得 | 第93页 |
| ·抗性植株的分子检测 | 第93-98页 |
| ·讨论 | 第98-100页 |
| ·两个草种的再生体系 | 第98页 |
| ·结缕草植物总DNA的提取 | 第98-99页 |
| ·PCR中出现的问题 | 第99-100页 |
| ·小结 | 第100-101页 |
| 第六章 讨论与结论 | 第101-105页 |
| ·讨论 | 第101-103页 |
| ·克隆GA20氧化酶基因的方法 | 第101页 |
| ·结缕草GA20氧化酶基因 | 第101-102页 |
| ·转基因植株的表型 | 第102-103页 |
| ·拟进一步开展的工作 | 第103页 |
| ·结论 | 第103-105页 |
| ·结缕草中克隆GA20氧化酶基因 | 第103页 |
| ·GA20氧化酶基因在大肠杆菌中表达 | 第103-104页 |
| ·GA20氧化酶基因在烟草中表达 | 第104页 |
| ·GA20氧化酶基因在结缕草和高羊茅中表达 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-119页 |
| 附图Ⅰ | 第119-120页 |
| 附图Ⅱ | 第120-121页 |
| 附图Ⅱ | 第121-123页 |
| 附图Ⅲ | 第123-124页 |
| 附图Ⅳ | 第124-125页 |
| 附图Ⅴ | 第125-126页 |
| 个人简介 | 第126-127页 |
| 导师简介 | 第127-128页 |
| 获得成果目录清单 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129页 |
