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白菜低温要求型晚抽薹性的相关序列克隆与分析

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
略缩词(Abbreviation)第8-9页
目录第9-12页
1 文献综述第12-35页
   ·国内外大白菜晚抽薹的研究现状第12-14页
   ·春化作用及春化基因第14-27页
     ·开花转变及影响开花转变的因子第14-15页
     ·植物向生殖生长转变的模式第15页
     ·与开花转变有关的基因第15-16页
       ·晚开花突变第15-16页
       ·早开花突变第16页
       ·开花时间的天然变异第16页
     ·控制开花转换的遗传途径第16-21页
       ·光周期途径(The Photoperiod Pathway)第17-18页
       ·春化途径(The Vernalization Pathway)第18-20页
       ·自主途径(The Autonomous Pathway)第20-21页
       ·赤霉素途径(The Gibberellin Pathway)第21页
     ·开花途径整合子(Floral Pathway Integrators)第21-22页
     ·开花时间抑制基因第22-23页
     ·植物通过春化作用的条件第23-24页
     ·春化作用的机理第24-26页
     ·高等植物中春化基因的研究现状第26-27页
       ·FRI和FLC的协同增效作用决定植物对春化作用的需求第26页
       ·春化作用对FLC的负调控作用第26-27页
       ·其他与春化作用有关的基因第27页
   ·植物基因分离的方法第27-34页
     ·基于基因序列(DNA)的分离方法第28页
     ·基于基因转录产物的分离方法第28-32页
       ·差示筛选(differential hybridization)第29页
       ·扣除杂交(subtractive hybridization of cDNA,SHD)第29页
       ·mRNA差别显示(mRNA differential display,DD)第29-30页
       ·代表性差示分析(represential display analysis,RDA)第30页
       ·抑制性扣除杂(suppression subtractive hybridization,SSH)第30-31页
       ·基因表达连续分析法(serial analysis of gene expression,SAGE)第31页
       ·交互式扣除RNA差别显示技术(reciprocal subtraction differential RNA display,RSDD)第31页
       ·cDNA-AFLP技术第31-32页
     ·基于基因转译产物的分离方法第32页
     ·基于基因功能的分离方法第32-33页
       ·功能互补第32-33页
       ·酵母双杂交体系第33页
     ·基于基因位置的分离方法第33-34页
     ·图位克隆第34页
   ·本研究的目的和意义第34-35页
2 材料和方法第35-46页
   ·实验材料第35页
   ·实验方法第35-46页
     ·RNA的提取第35-37页
       ·器皿的准备第35页
       ·试剂第35页
       ·仪器第35-36页
       ·提取RNA的步骤第36页
       ·RNA的检测第36-37页
     ·cDNA的合成第37-38页
       ·1st strand cDNA合成反应第37页
       ·2nd strand cDNA合成反应以及末端平滑化第37-38页
       ·合成的cDNA精制第38页
     ·与晚抽薹相关的cDNA-AFLP差异片段的筛选第38-42页
       ·酶切及与接头连接第39-40页
       ·预扩增第40页
       ·选择性扩增第40-41页
       ·聚丙烯酰胺胶的制备第41-42页
       ·测序胶电泳第42页
       ·银染第42页
     ·与晚抽薹相关的cDNA-AFLP目标片段的获得第42-46页
       ·AFLP产物的重扩增第42-43页
       ·目标片段的回收纯化第43-44页
       ·目标片段与载体的连接第44页
         ·目标片段的克隆第44-46页
         ·重组质粒的转化第44页
         ·重组质粒的筛选第44-45页
         ·重组质粒DNA的提取第45页
         ·重组质粒的酶切检测第45页
         ·目标片段的测序第45页
         ·测序结果的Blast结果分析第45-46页
3 结果与分析第46-56页
   ·基因组RNA的提取质量第46页
   ·cDNA的合成第46页
   ·预扩增的检测第46-47页
   ·双亲和早抽薹池及晚抽薹池之间多态性AFLP引物的筛选分析第47-49页
   ·cDNA-AFLP特异片段的筛选第49-51页
   ·特异AFLP片段的回收与纯化第51-52页
   ·重组质粒的筛选第52-53页
   ·特异片段的测序结果和Blast第53-56页
讨论第56-61页
   ·关于运用BSA法筛选cDNA-AFLP差异基因片段第56页
   ·关于RNA的提取第56-57页
   ·关于cDNA-AFLP的技术及其优点第57-58页
   ·关于银染的一点心得体会第58-59页
     ·显影液的提前预冷第58页
     ·染色后漂洗时间的控制第58页
     ·关于甲醛的挥发问题第58-59页
   ·差异片段的连接和转化问题第59页
   ·关于测序后Blast结果的思考第59-61页
5 结论第61-62页
参考文献第62-70页
附录第70-76页
致谢第76-77页
作者简介第77页

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