| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 略缩词(Abbreviation) | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-35页 |
| ·国内外大白菜晚抽薹的研究现状 | 第12-14页 |
| ·春化作用及春化基因 | 第14-27页 |
| ·开花转变及影响开花转变的因子 | 第14-15页 |
| ·植物向生殖生长转变的模式 | 第15页 |
| ·与开花转变有关的基因 | 第15-16页 |
| ·晚开花突变 | 第15-16页 |
| ·早开花突变 | 第16页 |
| ·开花时间的天然变异 | 第16页 |
| ·控制开花转换的遗传途径 | 第16-21页 |
| ·光周期途径(The Photoperiod Pathway) | 第17-18页 |
| ·春化途径(The Vernalization Pathway) | 第18-20页 |
| ·自主途径(The Autonomous Pathway) | 第20-21页 |
| ·赤霉素途径(The Gibberellin Pathway) | 第21页 |
| ·开花途径整合子(Floral Pathway Integrators) | 第21-22页 |
| ·开花时间抑制基因 | 第22-23页 |
| ·植物通过春化作用的条件 | 第23-24页 |
| ·春化作用的机理 | 第24-26页 |
| ·高等植物中春化基因的研究现状 | 第26-27页 |
| ·FRI和FLC的协同增效作用决定植物对春化作用的需求 | 第26页 |
| ·春化作用对FLC的负调控作用 | 第26-27页 |
| ·其他与春化作用有关的基因 | 第27页 |
| ·植物基因分离的方法 | 第27-34页 |
| ·基于基因序列(DNA)的分离方法 | 第28页 |
| ·基于基因转录产物的分离方法 | 第28-32页 |
| ·差示筛选(differential hybridization) | 第29页 |
| ·扣除杂交(subtractive hybridization of cDNA,SHD) | 第29页 |
| ·mRNA差别显示(mRNA differential display,DD) | 第29-30页 |
| ·代表性差示分析(represential display analysis,RDA) | 第30页 |
| ·抑制性扣除杂(suppression subtractive hybridization,SSH) | 第30-31页 |
| ·基因表达连续分析法(serial analysis of gene expression,SAGE) | 第31页 |
| ·交互式扣除RNA差别显示技术(reciprocal subtraction differential RNA display,RSDD) | 第31页 |
| ·cDNA-AFLP技术 | 第31-32页 |
| ·基于基因转译产物的分离方法 | 第32页 |
| ·基于基因功能的分离方法 | 第32-33页 |
| ·功能互补 | 第32-33页 |
| ·酵母双杂交体系 | 第33页 |
| ·基于基因位置的分离方法 | 第33-34页 |
| ·图位克隆 | 第34页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第34-35页 |
| 2 材料和方法 | 第35-46页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-46页 |
| ·RNA的提取 | 第35-37页 |
| ·器皿的准备 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·仪器 | 第35-36页 |
| ·提取RNA的步骤 | 第36页 |
| ·RNA的检测 | 第36-37页 |
| ·cDNA的合成 | 第37-38页 |
| ·1st strand cDNA合成反应 | 第37页 |
| ·2nd strand cDNA合成反应以及末端平滑化 | 第37-38页 |
| ·合成的cDNA精制 | 第38页 |
| ·与晚抽薹相关的cDNA-AFLP差异片段的筛选 | 第38-42页 |
| ·酶切及与接头连接 | 第39-40页 |
| ·预扩增 | 第40页 |
| ·选择性扩增 | 第40-41页 |
| ·聚丙烯酰胺胶的制备 | 第41-42页 |
| ·测序胶电泳 | 第42页 |
| ·银染 | 第42页 |
| ·与晚抽薹相关的cDNA-AFLP目标片段的获得 | 第42-46页 |
| ·AFLP产物的重扩增 | 第42-43页 |
| ·目标片段的回收纯化 | 第43-44页 |
| ·目标片段与载体的连接 | 第44页 |
| ·目标片段的克隆 | 第44-46页 |
| ·重组质粒的转化 | 第44页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第44-45页 |
| ·重组质粒DNA的提取 | 第45页 |
| ·重组质粒的酶切检测 | 第45页 |
| ·目标片段的测序 | 第45页 |
| ·测序结果的Blast结果分析 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-56页 |
| ·基因组RNA的提取质量 | 第46页 |
| ·cDNA的合成 | 第46页 |
| ·预扩增的检测 | 第46-47页 |
| ·双亲和早抽薹池及晚抽薹池之间多态性AFLP引物的筛选分析 | 第47-49页 |
| ·cDNA-AFLP特异片段的筛选 | 第49-51页 |
| ·特异AFLP片段的回收与纯化 | 第51-52页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第52-53页 |
| ·特异片段的测序结果和Blast | 第53-56页 |
| 讨论 | 第56-61页 |
| ·关于运用BSA法筛选cDNA-AFLP差异基因片段 | 第56页 |
| ·关于RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·关于cDNA-AFLP的技术及其优点 | 第57-58页 |
| ·关于银染的一点心得体会 | 第58-59页 |
| ·显影液的提前预冷 | 第58页 |
| ·染色后漂洗时间的控制 | 第58页 |
| ·关于甲醛的挥发问题 | 第58-59页 |
| ·差异片段的连接和转化问题 | 第59页 |
| ·关于测序后Blast结果的思考 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 附录 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |