| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-26页 |
| ·丹参研究概况 | 第12-17页 |
| ·丹参简介 | 第12页 |
| ·丹参的化学成分及药理作用 | 第12-17页 |
| ·药用植物次生代谢研究现状 | 第17-20页 |
| ·植物次生代谢的种类及药理活性 | 第18页 |
| ·药用植物次生代谢工程的主要策略 | 第18-20页 |
| ·植物MYB类转录因子家族 | 第20-24页 |
| ·转录因子的概念及调控机理 | 第20-21页 |
| ·高等植物转录因子的功能 | 第21-23页 |
| ·丹参酚酸转录调控基因的研究现状 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
| 第2章 丹参PAP2过表达载体的构建及抗性植株的获得 | 第26-38页 |
| ·实验材料与试剂 | 第26-29页 |
| ·实验的植物材料 | 第26页 |
| ·实验菌株与质粒 | 第26页 |
| ·药品与试剂 | 第26-27页 |
| ·主要溶液的配制 | 第27-28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-33页 |
| ·拟南芥PAP2(Production of anthocyanin pigment 2)基因的克隆 | 第29页 |
| ·构建PAP2基因过表达载体 | 第29-31页 |
| ·PAP2过表达载体转化农杆菌EHA105 | 第31-32页 |
| ·采用农杆菌EHA105介导的丹参遗传转化 | 第32-33页 |
| ·实验结果与分析 | 第33-38页 |
| ·拟南芥PAP2基因序列的获得 | 第33页 |
| ·PAP2过表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·叶盘法介导的丹参遗传转化结果 | 第35-38页 |
| 第3章 PAP2基因的分子水平检测 | 第38-46页 |
| ·实验的材料与试剂 | 第38-39页 |
| ·实验的植物材料 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38-39页 |
| ·实验过程及方法 | 第39-43页 |
| ·丹参PAP2转基因植株的DNA水平检测 | 第39-40页 |
| ·丹参PAP2转基因植株的RNA水平检测 | 第40-43页 |
| ·实验结果与分析 | 第43-46页 |
| ·丹参PAP2转基因植株的DNA水平检测结果 | 第43-44页 |
| ·过表达丹参转化体PAP2基因表达水平的Real-time检测 | 第44-46页 |
| 第4章 转录因子PAP2对丹参酚酸类生物合成途径上相关酶基因表达的影响 | 第46-56页 |
| ·实验的材料与试剂 | 第46页 |
| ·实验的植物材料 | 第46页 |
| ·实验仪器 | 第46页 |
| ·实验试剂 | 第46页 |
| ·实验过程及方法 | 第46-49页 |
| ·丹参PAP2基因的器官特异性表达分析 | 第46-47页 |
| ·丹参次生代谢物合成相关酶基因的表达分析 | 第47-49页 |
| ·转化体PAP2-8株系中次生代谢物合成相关酶基因在不同部位的表达分析 | 第49页 |
| ·数据分析 | 第49页 |
| ·实验结果与分析 | 第49-56页 |
| ·丹参PAP2基因的器官特异性表达结果 | 第49-50页 |
| ·丹参次生代谢物合成相关酶基因的表达分析 | 第50-53页 |
| ·转化体PAP2-8株系中与次生代谢物合成相关酶基因在不同部位的表达图 | 第53-56页 |
| 第5章 HPLC检测PAP2植株中水溶性酚酸类物质 | 第56-62页 |
| ·实验材料与试剂 | 第56-57页 |
| ·植物材料 | 第56页 |
| ·实验仪器 | 第56页 |
| ·试剂及药品 | 第56-57页 |
| ·实验过程及方法 | 第57-58页 |
| ·色谱条件 | 第57页 |
| ·对照品溶液的配制 | 第57页 |
| ·线性关系考察 | 第57页 |
| ·精密度考察 | 第57页 |
| ·重复性试验 | 第57-58页 |
| ·加样回收率试验 | 第58页 |
| ·供试品溶液的制备 | 第58页 |
| ·实验结果与分析 | 第58-62页 |
| ·PAP2丹参转化体叶中酚酸成分含量 | 第59-60页 |
| ·丹参根中酚酸成分的液相图 | 第60-62页 |
| 第6章 转化体PAP2植株中木质素、总酚、总黄酮及总花青素含量的检测 | 第62-70页 |
| ·实验材料与试剂 | 第62-63页 |
| ·植物材料 | 第62页 |
| ·实验仪器 | 第62页 |
| ·试剂及药品 | 第62-63页 |
| ·实验过程及方法 | 第63-65页 |
| ·总木质素含量的测定 | 第63页 |
| ·总木质素的计算 | 第63页 |
| ·总酚酸含量的测定 | 第63-64页 |
| ·总黄酮含量的测定 | 第64-65页 |
| ·花青素含量的测定 | 第65页 |
| ·实验结果及分析 | 第65-70页 |
| ·总木质素含量 | 第65-66页 |
| ·总酚酸含量 | 第66-67页 |
| ·总黄酮含量 | 第67页 |
| ·花青素含量 | 第67-70页 |
| 第7章 讨论 | 第70-74页 |
| ·过表达拟南芥即JZ转录因子对丹参酚酸性成分合成调控的研究 | 第70-71页 |
| ·拟南芥转录因子APPZ与苯丙烷代谢途径各支路途径的关系 | 第71-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第84页 |
