| 中文摘要 | 第1-4页 |
| SUMMARY | 第4-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1 哺乳动物性别决定的机理 | 第10-14页 |
| ·性别决定相关基因及其研究进展 | 第10-13页 |
| ·SRY基因 | 第11-12页 |
| ·与性别决定相关的其他基因 | 第12-13页 |
| ·性别决定的分子模型 | 第13-14页 |
| ·Z-基因模型 | 第13页 |
| ·DSS-基因模型 | 第13页 |
| ·Jimenez模型 | 第13-14页 |
| ·Jennifer的模型 | 第14页 |
| 2 动物性别控制技术与其研究进展 | 第14-20页 |
| ·受精前性别控制技术 | 第14-15页 |
| ·受精后性别控制技术 | 第15-20页 |
| ·细胞遗传学方法-核型分析法 | 第15-16页 |
| ·免疫学方法 | 第16页 |
| ·X染色体相关酶法(X-Linked Enzymes) | 第16页 |
| ·分子生物学方法 | 第16-20页 |
| 3 PCR法进行牛羊性别控制现状及其发展前景 | 第20-22页 |
| 第二章 绵羊性别鉴定多重PCR体系的建立 | 第22-45页 |
| 1 材料与方法 | 第22-25页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·组织样品 | 第22页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第22-25页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·主要药品 | 第23-24页 |
| ·溶液配制 | 第24-25页 |
| 2 试验方法 | 第25-33页 |
| ·羊总基因组DNA的制备 | 第25-26页 |
| ·基因组DNA的检测 | 第26页 |
| ·模板DNA的稀释 | 第26页 |
| ·细胞计数 | 第26-28页 |
| ·白细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·白细胞的计数 | 第27页 |
| ·白细胞的稀释 | 第27页 |
| ·白细胞DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·引物设计 | 第28-29页 |
| ·引物的合成与稀释 | 第28-29页 |
| ·PCR反应体系和反应程序 | 第29页 |
| ·引物的筛选与组合 | 第29页 |
| ·PCR扩增产物检测 | 第29-30页 |
| ·PCR体系的优化 | 第30-33页 |
| ·引物浓度的选择 | 第30页 |
| ·用析因设计进行PCR体系的优化 | 第30-32页 |
| ·酶浓度的影响 | 第32-33页 |
| ·灵敏度的检测 | 第33页 |
| ·不同反应体系的影响 | 第33页 |
| ·循环次数的影响 | 第33页 |
| ·扩增程序的选择 | 第33页 |
| 3 最优PCR体系的应用 | 第33-34页 |
| ·公母羊基因组的扩增 | 第33页 |
| ·淋巴细胞的扩增 | 第33-34页 |
| 4 结果与分析 | 第34-42页 |
| ·羊肝组织基因组DNA的检测 | 第34页 |
| ·引物的筛选 | 第34-35页 |
| ·多重PCR体系优化的结果 | 第35-40页 |
| ·优化后的多重PCR体系 | 第40-42页 |
| 5 讨论 | 第42-44页 |
| ·多重PCR的灵敏度 | 第42-43页 |
| ·多重PCR引物浓度 | 第43-44页 |
| ·MG~(2+)、dNTP及退火温度 | 第44页 |
| 6 结论 | 第44-45页 |
| 第三章 绵羊性别鉴定巢式PCR的建立及优化 | 第45-56页 |
| 1 材料与方法 | 第45页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-46页 |
| ·基因组DNA的提取与检测 | 第45页 |
| ·细胞计数及其DNA的提取 | 第45页 |
| ·引物设计与稀释 | 第45-46页 |
| 3 羊早期胚胎性别鉴定巢式PCR体系的建立 | 第46-48页 |
| ·绵羊早期胚胎性别鉴定巢式PCR体系的优化 | 第47-48页 |
| ·巢式PCR体系扩增温度的确定 | 第47页 |
| ·Mg~(2+)浓度对扩增结果的影响 | 第47页 |
| ·dNTP浓度的选择 | 第47页 |
| ·灵敏度的检测 | 第47页 |
| ·扩增程序的选择 | 第47-48页 |
| ·优化后巢式PCR体系的应用 | 第48页 |
| ·巢式PCR扩增公母羊基因组 | 第48页 |
| ·巢式PCR扩增淋巴细胞 | 第48页 |
| 4 结果与分析 | 第48-53页 |
| ·温度选择 | 第48页 |
| ·镁离子对扩增结果的影响 | 第48-49页 |
| ·不同DNTP浓度对扩增结果的影响 | 第49-50页 |
| ·巢式PCR扩增的灵敏度 | 第50页 |
| ·两步与三步控温法扩增结果 | 第50-52页 |
| ·扩增公母羊基因组 | 第52-53页 |
| ·单细胞扩增 | 第53页 |
| 5 讨论 | 第53-55页 |
| ·MG~(2+)对扩增结果的影响 | 第53-54页 |
| ·两步控温巢式PCR扩增法对扩增结果的影响 | 第54页 |
| ·巢式PCR灵敏度 | 第54-55页 |
| 6 结论 | 第55-56页 |
| 第四章 特异性检验 | 第56-59页 |
| 1 实验材料与方法 | 第56-57页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-57页 |
| ·溶液的配制 | 第56页 |
| ·人头发DNA的提取 | 第56-57页 |
| ·家兔、牛、羊的基因组提取 | 第57页 |
| ·对家兔、男人、牛、羊基因组等进行巢式PCR扩增 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-58页 |
| ·PCR扩增结果 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58页 |
| 4 小结 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 作者简介 | 第70-71页 |
| 导师简介 | 第71-72页 |