| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 引言 | 第9-12页 |
| 第一部分 DR5 胞外段基因的表达及功能初步鉴定 | 第12-45页 |
| 1 前言 | 第12页 |
| 2 材料 | 第12-22页 |
| ·主要试剂 | 第12-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| 3 方法 | 第22-34页 |
| ·细胞培养 | 第22页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·甲醛变性电泳检测 | 第23页 |
| ·RT-PCR | 第23-25页 |
| ·pGEM-DR5 构建及鉴定 | 第25-27页 |
| ·DR5 胞外段基因序列测定 | 第27页 |
| ·DR5 的原核表达质粒构建及鉴定 | 第27-29页 |
| ·重组 DR5 的表达及制备 | 第29-30页 |
| ·重组 DR5 的鉴定 | 第30-34页 |
| 4 结果 | 第34-41页 |
| ·Jurkat 细胞总 RNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·DR5 胞外段基因的 RT-PCR | 第35页 |
| ·pGEM-DR5 构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·中介重组体的测序结果 | 第36-37页 |
| ·pET-DR5 的构建及鉴定 | 第37-38页 |
| ·DR5 胞外段蛋白的诱导表达、纯化及Western Blot 分析 | 第38-39页 |
| ·重组DR5 的免疫印迹 | 第39-40页 |
| ·DR5 胞外段蛋白和抗 DR5 抗体的结合活性 | 第40页 |
| ·重组 DR5 抑制 TRAIL 诱导 Jurkat 细胞凋亡的活性 | 第40-41页 |
| 5. 讨论 | 第41-42页 |
| 6. 参考文献 | 第42-45页 |
| 第二部分 抗人DR5 单克隆抗体的筛选和功能初步鉴定 | 第45-55页 |
| 1 序言 | 第45页 |
| 2 材料和方法 | 第45-48页 |
| ·细胞系 | 第45-46页 |
| ·DR5 胞外段蛋白的制备 | 第46页 |
| ·sDR5 免疫小鼠 | 第46页 |
| ·细胞融合和杂交瘤的筛选 | 第46页 |
| ·ELISA 法筛选单克隆抗体 | 第46-47页 |
| ·抗体亚类的鉴定 | 第47页 |
| ·Lowry 法蛋白定量 | 第47页 |
| ·MTT法测定抗体对Jurkat细胞的生长抑制功能 | 第47页 |
| ·吉姆萨-瑞氏染色 | 第47-48页 |
| ·PI/AnnexinⅤ染色流式细胞仪分析Jurkat 细胞凋亡 | 第48页 |
| ·单克隆抗体和 TRAIL 的竞争 ELISA | 第48页 |
| 3 实验结果 | 第48-52页 |
| ·抗DR5 单克隆抗体的产生 | 第48页 |
| ·抗 DR5 单克隆抗体 A6 的纯化 | 第48页 |
| ·A6 的Lowry 法蛋白定量 | 第48-49页 |
| ·A6 对Jurkat 细胞的生长抑制作用曲线 | 第49-50页 |
| ·吉姆萨-瑞氏染色结果 | 第50页 |
| ·PI/AnnexinⅤ染色流式细胞仪分析Jurkat 细胞凋亡 | 第50-51页 |
| ·A6 和TRAIL 的竞争ELISA 作用 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 5 参考文献 | 第53-55页 |
| 第三部分 总结 | 第55-56页 |
| 第四部分 文献综述 | 第56-65页 |
| 主要缩略语 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 附录 | 第68页 |
