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山羊精原干细胞体外培养体系的建立与移植研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
第一章 精原干细胞的来源及其生存环境第14-21页
   ·哺乳动物原始生殖细胞第14-15页
   ·雄性生殖细胞的体内发育环境第15-19页
     ·睾丸第15页
     ·曲细精管第15-17页
     ·睾丸间质第17-18页
     ·血睾屏障憩室第18-19页
   ·精子发生第19-21页
     ·精原细胞有丝分裂第19-20页
     ·精原细胞减数分裂第20页
     ·精子形态发生第20-21页
第二章 精原干细胞的生物学特征第21-27页
   ·体内SSCS生物学特性第21-25页
     ·SSCs 发育调控第21页
     ·SSCs 细胞周期第21-22页
     ·SSCs 数量第22页
     ·SSCs 的增殖方式第22-24页
     ·SSCs 的分化第24页
     ·SSCs 的富集第24-25页
   ·体外培养SSCS形态学和免疫学特性第25-27页
     ·SSCs 的形态学第25页
     ·SSCs 的分子标志第25-27页
第三章 SSCS 的分离纯化及体外培养影响因素第27-39页
   ·睾丸组织细胞处理第27-28页
   ·SSCS 的分离纯化第28-30页
     ·密度梯度离心法(Percoll 法)第28页
     ·重力沉降法第28-29页
     ·流式细胞分选第29页
     ·免疫磁珠分离技术第29-30页
     ·贴壁速度差法第30页
   ·SSCS 体外培养第30-33页
     ·基础培养液第31页
     ·血清第31-32页
     ·共培养体系第32-33页
   ·细胞因子及添加物质第33-38页
     ·干细胞因子(stem cell factor, SCF)第33-34页
     ·白血病抑制因子(LIF)第34-35页
     ·胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor ,GDNF)第35-36页
     ·表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)第36页
     ·添加剂第36-37页
     ·激素及维生素第37-38页
   ·培养温度的影响第38-39页
第四章 精原干细胞的移植、基因转染及冷冻保存研究进展第39-47页
   ·精原干细胞移植第39-40页
     ·受体动物的选择第39-40页
     ·供体细胞的获得与体外操作第40页
     ·移植方法第40页
   ·精原干细胞介导转基因第40-43页
     ·精原干细胞转基因的优势第41页
     ·体内转染精原干细胞法第41-42页
     ·精原干细胞体外转染移植法第42-43页
   ·精原细胞冷冻保存第43-47页
     ·冷冻对细胞的影响第44页
     ·抗冻剂及其保护作用第44页
     ·玻璃化冷冻第44-45页
     ·最佳低温保存温度第45页
     ·精原细胞冻存研究进展第45-47页
第五章 山羊精原干细胞的鉴定及分离纯化研究第47-60页
   ·材料与方法第48-52页
     ·材料第48页
     ·方法第48-51页
     ·主要溶液配制第51-52页
   ·结果与分析第52-58页
     ·山羊 SSCs 的形态学及免疫细胞化学特性第52-53页
     ·精原干细胞的分离第53页
     ·精原干细胞纯化第53-58页
   ·讨论第58-59页
     ·睾丸组织的细胞类型和酶消化法的最佳方案第58页
     ·山羊精原细胞纯化效果第58-59页
   ·小结第59-60页
第六章 山羊精原干细胞体外培养体系的建立第60-77页
   ·材料与方法第60-63页
     ·材料第60页
     ·主要试剂第60页
     ·方法第60-62页
     ·主要溶液配制第62页
     ·山羊 SSCs 的鉴定和培养体系的评价及统计计数第62-63页
   ·结果第63-72页
     ·培养基、血清和培养温度对 SSCs 增殖的影响第63-64页
     ·山羊精原干细胞在无生长因子培养体系中的生长行为第64-66页
     ·精原细胞继代培养第66-67页
     ·GDNF、LIF 和bFGF 对山羊精原细胞增殖的影响第67-72页
   ·讨论第72-76页
     ·培养液、温度和血清对山羊SSCs 生长增殖分化的影响第72-73页
     ·饲养层对山羊 SSCs 体外增殖分化的必要性第73-74页
     ·细胞因子对 SSCs 增殖的影响第74-76页
   ·小结第76-77页
第七章 山羊精原干细胞的异种移植及山羊睾丸注射实验第77-90页
   ·材料与方法第77-81页
     ·材料第77页
     ·方法第77-81页
   ·结果第81-86页
     ·异种移植实验第81-85页
     ·山羊睾丸注射方法研究第85-86页
   ·讨论第86-89页
     ·腹腔注射白消安对小鼠的影响第86-87页
     ·精原细胞异种移植的效果第87-88页
     ·山羊睾丸注射方法的效果第88-89页
   ·小结第89-90页
结论第90-91页
本文创新点第91-92页
进一步实验设想第92-93页
参考文献第93-106页
致谢第106-107页
作者简介第107页

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