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猪致病性链球菌快速检测方法的建立及应用

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 猪链球菌病国内外研究进展第10-27页
   ·历史第10页
   ·病原第10页
   ·流行病学第10-11页
   ·临床症状第11-12页
   ·病理变化第12页
   ·致病机理第12-14页
   ·遗传特征第14页
   ·致病因子第14-23页
     ·荚膜多糖(cps)第16-17页
     ·溶菌酶释放蛋白(mrp)和胞外蛋白因子(ef)第17-18页
     ·溶血素(sly)第18-20页
     ·黏附素第20页
     ·纤维蛋白原结合蛋白(fbps)第20-21页
     ·IgG 结合蛋白和44ku 蛋白第21页
     ·谷氨酸脱氢酶蛋白(gdh)第21-22页
     ·致病性基因-orf2第22页
     ·其他因子第22-23页
   ·猪链球菌的鉴定第23-25页
     ·生化鉴定第23-24页
     ·血清学鉴定第24页
     ·限制性内切酶图谱分析法第24-25页
     ·随机扩增核酸片段多肽性分析(RAPD)第25页
   ·免疫预防与治疗第25-27页
第二章 PCR 及荧光定量PCR 在病原研究上的应用第27-43页
   ·PCR第27-32页
     ·PCR 技术的基本原理第27页
     ·PCR 反应动力学第27-29页
     ·PCR 扩增产物第29页
     ·PCR 反应体系与反应条件第29-31页
     ·PCR 反应特点第31-32页
     ·PCR 扩增产物的分析第32页
   ·多重PCR 技术对猪链球菌血清型的鉴定第32-33页
   ·实时荧光定量PCR第33-41页
     ·FQ-PCR 原理第33-34页
     ·FQ-PCR 的化学原理第34-41页
   ·FQ-PCR 在动物传染病定量检测中的应用第41-43页
第三章 猪致病性链球菌的分离鉴定第43-48页
   ·材料与方法第43-44页
     ·病料第43页
     ·实验动物第43页
     ·主要试剂第43页
     ·主要仪器第43-44页
     ·链球菌分离培养鉴定第44页
     ·生化试验第44页
     ·致病力试验第44页
   ·结果分析第44-47页
     ·链球菌分离培养鉴定第44-46页
     ·生化试验结果第46页
     ·致病力试验结果第46-47页
   ·讨论第47-48页
第四章 猪致病性链球菌PCR 和多重PCR 检测方法的建立及应用第48-57页
   ·材料与方法第48-51页
     ·菌株与培养第48页
     ·仪器和试剂第48页
     ·引物设计和合成第48-50页
     ·PCR 反应体系及反应程序的建立第50-51页
     ·用以上建立的4 种PCR 方法对临床疑似猪链球菌感染样品的检测第51页
   ·结果与分析第51-55页
     ·利用gdh 基因建立gdhPCR 检测方法及应用第51页
     ·致病性SS2 型多重PCR 检测方法的建立及应用第51-53页
     ·SS9 型多重PCR 检测方法的建立及应用第53-54页
     ·SS1、SS7、SS9 型多重PCR 检测方法的建立及应用第54-55页
   ·讨论第55-57页
第五章 猪链球菌9 型荧光定量PCR 检测方法的建立及应用第57-66页
   ·材料与方法第57-59页
     ·材料第57-58页
     ·引物与Taqman 探针的设计与合成第58页
     ·SS9 重组质粒的提取第58页
     ·SS9 FQ-PCR 检测方法的建立第58页
     ·SS9 FQ-PCR 检测方法的敏感性试验与标准曲线的建立第58页
     ·SS9 FQ-PCR 检测方法的特异性试验第58-59页
     ·SS9 FQ-PCR 检测方法的稳定性和重复性试验第59页
     ·SS9 FQ-PCR 检测方法与常规PCR 检测比较第59页
     ·SS9 FQ-PCR 检测方法临床应用性试验第59页
   ·结果与分析第59-64页
     ·pGEM-T-cps9H 重组质粒DNA 浓度的测定第59页
     ·SS9 FQ-PCR 的反应条件第59页
     ·标准曲线及FQ-PCR 灵敏度第59-61页
     ·FQ-PCR 的特异性第61页
     ·FQ-PCR 的稳定性和重复性第61-62页
     ·FQ-PCR 与常规PCR 检测比较第62-63页
     ·SS9 FQ-PCR 与常规PCR 对临床样品检测应用比较第63-64页
   ·讨论第64-66页
结论第66-67页
参考文献第67-80页
缩略词第80-81页
致谢第81-82页
作者简介第82页

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