摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-17页 |
符号说明 | 第17-19页 |
第一章 前言 | 第19-45页 |
·血管与血管内皮细胞 | 第19-21页 |
·肿瘤热疗 | 第21-22页 |
·热靶向药物输送与肿瘤治疗 | 第22-28页 |
·细胞与细胞骨架 | 第24-26页 |
·热刺激对细胞骨架的影响 | 第26-28页 |
·热疗对血管内皮细胞的直接杀伤作用 | 第28-31页 |
·细胞凋亡与细胞坏死 | 第29页 |
·热刺激导致细胞凋亡 | 第29-31页 |
·热刺激对细胞的整体效应 | 第31-35页 |
·基因芯片技术简介. | 第33-34页 |
·热刺激对细胞基因表达的影响 | 第34-35页 |
·本课题研究的目的、目标与意义 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-45页 |
第二章 热刺激条件下血管内皮细胞形态及骨架变化的研究 | 第45-86页 |
·引言 | 第45-46页 |
·实验材料及仪器 | 第46-50页 |
·实验试剂及其配置 | 第46-48页 |
·激光共聚焦显微镜 | 第48-50页 |
·三维图像处理软件 | 第50页 |
·实验步骤与方法 | 第50-69页 |
·细胞培养 | 第50-52页 |
·水浴加热 | 第52-58页 |
·工作台加热 | 第58-61页 |
·细胞加热后骨架固定观察 | 第61-63页 |
·细胞加热 | 第61页 |
·细胞固定 | 第61-62页 |
·细胞微丝骨架染色方法 | 第62-63页 |
·细胞骨架实时观察 | 第63-68页 |
·绿色荧光蛋白(GFP)的原理及应用 | 第63-64页 |
·融合质粒及其扩增 | 第64-66页 |
·阳离子脂质体转染方法 | 第66页 |
·单克隆细胞株筛选 | 第66-68页 |
·细胞加热以及实时观察成像 | 第68页 |
·细胞断层扫描及三维重构 | 第68-69页 |
·实验结果 | 第69-80页 |
·固定染色法观察血管内皮细胞加热前后微丝骨架变化 | 第69-70页 |
·连续观察血管内皮细胞在热刺激过程形态变化 | 第70-72页 |
·实时观察血管内皮细胞在热刺激过程中细胞微丝骨架变化 | 第72-75页 |
·加热前后细胞内微丝骨架切片扫描以及三维重构结果 | 第75-80页 |
·讨论 | 第80-83页 |
·本章小结 | 第83页 |
参考文献 | 第83-86页 |
第三章 热刺激条件下血管内皮细胞发生凋亡、坏死的研究 | 第86-110页 |
·引言 | 第86-87页 |
·实验材料及仪器 | 第87-88页 |
·细胞培养及热处理 | 第87页 |
·荧光染料 | 第87页 |
·倒置荧光显微镜 | 第87-88页 |
·实验步骤与方法 | 第88-92页 |
·正常血管内皮细胞培养 | 第88页 |
·与肿瘤细胞共培养模拟肿瘤环境下的血管内皮细胞 | 第88-90页 |
·细胞加热 | 第90页 |
·加热后血管内皮细胞凋亡、坏死检测 | 第90页 |
·细胞成像 | 第90-91页 |
·细胞凋亡、坏死的鉴定及其统计分析 | 第91-92页 |
·实验结果 | 第92-104页 |
·正常血管内皮细胞不同温度加热后凋亡、坏死率随时间变化. | 第92-97页 |
·血管内皮细胞加热后形态变化 | 第97-100页 |
·肿瘤环境下血管内皮细胞加热后凋亡、坏死率随时间变化 | 第100-104页 |
·讨论 | 第104-107页 |
·本章小结 | 第107页 |
参考文献 | 第107-110页 |
第四章 加热条件下血管内皮细胞基因表达变化及其机制的研究 | 第110-135页 |
·引言 | 第110-111页 |
·实验材料及仪器 | 第111-113页 |
·细胞培养及热处理 | 第111页 |
·总RNA 提取 | 第111页 |
·基因芯片 | 第111-112页 |
·荧光定量PCR (Real-time PCR) | 第112-113页 |
·实验步骤与方法 | 第113-118页 |
·细胞加热 | 第113页 |
·细胞内总RNA 提取步骤 | 第113页 |
·基因芯片杂交以及数据读取 | 第113-116页 |
·荧光定量PCR (Real-time PCR)步骤 | 第116页 |
·基因语义(Gene Ontology)及其分析方法 | 第116-118页 |
·实验结果 | 第118-127页 |
·基因芯片结果 | 第118-121页 |
·荧光定量PCR 验证结果 | 第121-123页 |
·基因芯片结果分析 | 第123-127页 |
·讨论 | 第127-130页 |
·本章小结 | 第130-131页 |
参考文献 | 第131-135页 |
第五章 总结和展望 | 第135-138页 |
·研究的结果和意义 | 第135-136页 |
·本研究的创新点 | 第136-137页 |
·研究展望 | 第137-138页 |
致谢 | 第138-139页 |
攻读博士期间发表和投稿的论文 | 第139页 |