| 摘要 | 第1页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 英文缩写表 | 第9-11页 |
| 详细摘要 | 第11-16页 |
| 前言 | 第16-20页 |
| 参考文献 | 第18-20页 |
| 第一部分 平滑肌细胞的体外培养及鉴定 | 第20-30页 |
| 前言 | 第20-21页 |
| 1. 材料 | 第21-22页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·设备 | 第21-22页 |
| ·主要试剂配制 | 第22页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| 2. 方法 | 第22-24页 |
| 2. 1 VSMC原代培养及鉴定 | 第22-24页 |
| ·VSMC原代培养 | 第22-23页 |
| ·传代细胞培养 | 第23页 |
| ·VSMC的鉴定 | 第23-24页 |
| ·冻存和复苏 | 第24页 |
| 3. 结果 | 第24-27页 |
| ·VSMC原代培养 | 第24-25页 |
| ·SHR VSMC 传代培养 | 第25-26页 |
| ·SHR VSMC 鉴定 | 第26页 |
| ·VSMC 复苏后的结果 | 第26-27页 |
| 4. 讨论 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-30页 |
| 第二部分 PCDNA3.1-Irf1 表达载体的构建 | 第30-48页 |
| 前言 | 第30页 |
| 1 主要材料及仪器 | 第30-33页 |
| ·主要试剂和材料 | 第30-31页 |
| ·主要用液 | 第31-32页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| 2. 方法和步骤 | 第33-39页 |
| ·PCDNA3.1-Irf1 重组质粒构建总体设计 | 第33页 |
| ·设计、合成PCR 产物 | 第33页 |
| ·抽取大鼠肝脏总RNA | 第33-34页 |
| ·RT-PCR 扩增目的片断 | 第34-35页 |
| ·回收纯化目的片断 | 第35页 |
| ·双酶切载体质粒和目的片断 | 第35-36页 |
| ·回收纯化酶切片断 | 第36页 |
| ·重组连接 | 第36-37页 |
| ·制备感受态细菌 | 第37页 |
| ·转化 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的扩增带、提取 | 第38页 |
| ·重组质粒的扩增带鉴定及保存 | 第38-39页 |
| 3. 实验结果 | 第39-44页 |
| ·引物合成 | 第39-40页 |
| ·总 RNA 抽提 | 第40-41页 |
| ·质粒信息、质粒和 PCR 产物酶切电泳图谱 | 第41页 |
| ·PCR 鉴定所构建 pcDNA3.1-Irf1 质粒 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆测序结果及分析 | 第42-44页 |
| 4. 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 第三部分 Irf1 基因高表达对VSMC 增殖的影响 | 第48-64页 |
| 前言 | 第48-49页 |
| 1. 材料 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·设备 | 第49页 |
| 2. 方法 | 第49-54页 |
| ·细胞转染 | 第49-50页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第50页 |
| ·阳性克隆的验证（PCR） | 第50-52页 |
| ·增殖的检测 | 第52-54页 |
| 3. 结果 | 第54-60页 |
| ·阳性克隆的验证 | 第54页 |
| ·增殖的检测 | 第54-60页 |
| 4. 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 全文总结 | 第64-65页 |
| 本课题的创新点 | 第65页 |
| 本课题进一步研究工作计划 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 文献综述 | 第67-69页 |
