胆固醇配基色谱在蛋白质复性中的应用
| 中文摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第6-25页 |
| ·蛋白质折叠与复性基础研究 | 第6-13页 |
| ·折叠的动力学和热力学控制 | 第6-7页 |
| ·微观机理模型 | 第7-10页 |
| ·宏观动力学模型 | 第10-11页 |
| ·实验检测技术 | 第11-13页 |
| ·蛋白质的复性方法 | 第13-23页 |
| ·包含体的性质 | 第13页 |
| ·包含体的分离纯化溶解 | 第13-14页 |
| ·复性方法 | 第14-19页 |
| ·色谱辅助复性方法 | 第19-23页 |
| ·本论文的研究意义及内容 | 第23-25页 |
| 第二章 胆固醇配基介质的制备 | 第25-35页 |
| ·实验体系 | 第25-27页 |
| ·三聚氯氰 | 第25-26页 |
| ·胆固醇 | 第26页 |
| ·琼脂糖凝胶介质 | 第26-27页 |
| ·两步合成体系的反应机理 | 第27-28页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·胆固醇配基介质的制备 | 第29-30页 |
| ·修饰密度的测定 | 第30页 |
| ·介质外观形态及粒径的测定 | 第30页 |
| ·有效孔隙率的测定 | 第30-31页 |
| ·背压与流速关系测定 | 第31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-34页 |
| ·色谱介质上胆固醇配基的修饰 | 第31-32页 |
| ·修饰配基后介质的性能 | 第32-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 胆固醇配基色谱辅助溶菌酶复性 | 第35-52页 |
| ·目标蛋白-溶菌酶 | 第35-36页 |
| ·实验材料和仪器 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-40页 |
| ·缓冲液的配制 | 第37-38页 |
| ·溶菌酶的还原变性 | 第38页 |
| ·溶菌酶的稀释复性 | 第38页 |
| ·溶菌酶的穿过复性 | 第38页 |
| ·溶菌酶的吸附-洗脱复性 | 第38页 |
| ·溶菌酶活性测定 | 第38-39页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第39页 |
| ·浊度测定 | 第39页 |
| ·圆二色光谱分析 | 第39-40页 |
| ·荧光光谱分析 | 第40页 |
| ·HPLC检测 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-51页 |
| ·复性方法的确定 | 第40-41页 |
| ·复性溶菌酶的结构分析 | 第41-45页 |
| ·操作条件的影响 | 第45-50页 |
| ·胆固醇配基介质的反复利用 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第四章 结论与展望 | 第52-54页 |
| ·结论 | 第52页 |
| ·展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 符号表 | 第59-60页 |
| 附录一 溶菌酶活性标准曲线 | 第60-61页 |
| 附录二 溶菌酶浓度标准曲线 | 第61-62页 |
| 附录三 cho-C_3N_3Cl_3浓度标准曲线 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |