| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| ·甘油生产现状 | 第9-10页 |
| ·甘油的用途 | 第9-10页 |
| ·甘油的生产 | 第10页 |
| ·甘油代谢研究 | 第10-19页 |
| ·甘油代谢途径 | 第10-13页 |
| ·甘油和乙醇代谢通路的转换 | 第13-14页 |
| ·FPS1 研究进展 | 第14-16页 |
| ·NDE1/NDE2 和GUT2 研究进展 | 第16-18页 |
| ·甘油的异化 | 第18-19页 |
| ·本课题研究思路 | 第19-20页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第20-40页 |
| ·实验材料 | 第20-25页 |
| ·菌株与质粒 | 第20-22页 |
| ·主要实验仪器 | 第22页 |
| ·药品与试剂 | 第22-24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·酵母产孢及四分体孢子的拆分 | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第26页 |
| ·质粒的提取（CTAB 法） | 第26-27页 |
| ·酵母染色体的快速分离 | 第27页 |
| ·酵母细胞的转化 | 第27-28页 |
| ·PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·DNA 的限制酶消化 | 第29页 |
| ·凝胶电泳法检测DNA | 第29页 |
| ·DNA 片段的回收纯化 | 第29-30页 |
| ·DNA 连接反应 | 第30页 |
| ·Dilution 实验方法 | 第30-31页 |
| ·一步基因置换法缺失目的基因 | 第31-32页 |
| ·两步基因置换法缺失目的基因 | 第32-34页 |
| ·酵母等位基因的分离及遗传分析 | 第34-35页 |
| ·验证酵母的接合型 | 第35-36页 |
| ·不同接合型酵母细胞之间的交配（cross） | 第36页 |
| ·URA3 标记基因的重复利用 | 第36-37页 |
| ·发酵样品的测定方法 | 第37-40页 |
| ·发酵条件 | 第37页 |
| ·OD 值的测定 | 第37页 |
| ·葡萄糖的测定 | 第37-38页 |
| ·甘油的测定 | 第38-40页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第40-59页 |
| ·构建 gut2Δ重组菌株 | 第40-42页 |
| ·利用pUC18-RYUR 缺失GUT2 基因 | 第40-42页 |
| ·通过同源重组弹出（pop-out）URA3 | 第42页 |
| ·构建 nde1Δ重组菌株和 nde2Δ重组菌株 | 第42-45页 |
| ·利用pUC18-RYUR 缺失NDE1 和NDE2 基因 | 第42-44页 |
| ·通过同源重组弹出（pop-out）URA3 | 第44-45页 |
| ·构建 FPS1 基因部分缺失重组菌株 | 第45-49页 |
| ·构建 YIplac211-FPS1-C 质粒 | 第45-47页 |
| ·构建 YIplac211-FPS1-NC 质粒 | 第47-48页 |
| ·质粒 YIplac211-FPS1-NC 整合到染色体上 | 第48-49页 |
| ·通过同源重组弹出（pop-out）URA3 | 第49页 |
| ·α型单倍体菌株的获得 | 第49-50页 |
| ·HO 质粒转化酵母获得二倍体 | 第49-50页 |
| ·生孢拆孢获得α型菌株 | 第50页 |
| ·酵母等位基因的分离及遗传分析 | 第50-51页 |
| ·各菌株生长表型的考查 | 第51-54页 |
| ·FPS1 基因部分缺失重组菌株对高渗的敏感性 | 第51-52页 |
| ·FPS1 基因部分缺失重组菌株甘油利用情况 | 第52-53页 |
| ·12-1-fgn12 基因缺失重组菌株碳源利用情况 | 第53-54页 |
| ·发酵数据 | 第54-59页 |
| ·发酵条件 | 第54-55页 |
| ·发酵数据 | 第55-59页 |
| 第四章 结论与展望 | 第59-61页 |
| ·结论 | 第59页 |
| ·展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
