| 1 引言 | 第1-21页 |
| 1．1 乳糖酶简介 | 第10-11页 |
| 1．2 研究乳糖酶的意义 | 第11-14页 |
| 1．2．1 乳糖酶用于解决乳糖不耐症 | 第11-12页 |
| 1．2．2 改良乳制品 | 第12页 |
| 1．2．3 乳清糖浆的制造及应用 | 第12页 |
| 1．2．4 生产低聚半乳糖 | 第12-13页 |
| 1．2．5 制药工业中的应用 | 第13-14页 |
| 1．2．6 乳糖酶在免疫、检测、及环境监测方面的应用 | 第14页 |
| 1．2．7 分析食品中乳糖含量 | 第14页 |
| 1．3 乳糖酶的国内外研究现状及进展 | 第14-19页 |
| 1．3．1 乳糖酶的来源 | 第14-15页 |
| 1．3．2 微生物源乳糖酶的提取纯化 | 第15-16页 |
| 1．3．3 不同微生物来源乳糖酶酶学性质的比较 | 第16-17页 |
| 1．3．4 关于选育、诱变及产酶优化的研究 | 第17-18页 |
| 1．3．5 乳糖酶的固定化及应用 | 第18页 |
| 1．3．6 基因工程技术在乳糖酶生产中的应用 | 第18-19页 |
| 1．4 本研究主要内容和总体目标 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-29页 |
| 2．1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2．1．1 试验菌株 | 第21页 |
| 2．1．2 主要培养基 | 第21页 |
| 2．1．3 主要试剂 | 第21页 |
| 2．1．4 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2．2 乳糖酶的发酵生产 | 第22页 |
| 2．2．1 菌种活化 | 第22页 |
| 2．2．2 制备抱子悬液 | 第22页 |
| 2．2．3 乳糖酶的10L发酵罐发酵生产 | 第22页 |
| 2．3 乳糖酶的纯化 | 第22-23页 |
| 2．3．1 粗酶液的制备 | 第22-23页 |
| 2．3．2 超滤浓缩除杂 | 第23页 |
| 2．3．3 硫酸铵分级盐析 | 第23页 |
| 2．3．4 Sephadex G-25脱盐 | 第23页 |
| 2．3．5 离子交换层析 | 第23页 |
| 2．3．6 分子筛层析 | 第23页 |
| 2．3．7 第二次离子交换层析 | 第23页 |
| 2．4 分析测定方法 | 第23-25页 |
| 2．4．1 ONP标准曲线的制备 | 第23-24页 |
| 2．4．2 酶活测定方法 | 第24页 |
| 2．4．3 可溶性蛋白测定 | 第24-25页 |
| 2．4．4 PAGE电泳鉴定乳糖酶纯度 | 第25页 |
| 2．5 乳糖酶酶学性质的测定 | 第25-29页 |
| 2．5．1 温度对酶活性的影响 | 第25-26页 |
| 2．5．2 酶的热稳定性 | 第26页 |
| 2．5．3 酶的低温保存稳定性 | 第26页 |
| 2．5．4 pH对酶活性的影响及酶的pH稳定性 | 第26页 |
| 2．5．5 酶的pH耐受性 | 第26页 |
| 2．5．6 金属离子对酶活力的影响 | 第26页 |
| 2．5．7 其他试剂对酶蛋白的影响 | 第26页 |
| 2．5．8 乳糖酶动力学常数测定 | 第26-27页 |
| 2．5．9 乳糖酶分子量及亚基数的测定 | 第27页 |
| 2．5．10 乳糖酶蛋白糖基化程度的测定 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-40页 |
| 3．1 乳糖酶的10L发酵罐发酵生产 | 第29页 |
| 3．2 乳糖酶的分离纯化 | 第29-34页 |
| 3．2．1 粗酶液的制备 | 第29-30页 |
| 3．2．2 超滤 | 第30页 |
| 3．2．3 硫酸铵分级盐析 | 第30页 |
| 3．2．4 脱盐 | 第30页 |
| 3．2．5 离子交换层析 | 第30-31页 |
| 3．2．6 分子筛层析 | 第31-32页 |
| 3．2．7 pH梯度层析 | 第32-33页 |
| 3．2．8 酶的分离纯化结果 | 第33-34页 |
| 3．3 酶学性质 | 第34-40页 |
| 3．3．1 温度对酶活性的影响 | 第34页 |
| 3．3．2 酶的温度稳定性 | 第34-35页 |
| 3．3．3 酶的低温保存稳定性 | 第35-36页 |
| 3．3．4 pH对酶活力的影响 | 第36页 |
| 3．3．5 乳糖酶蛋白的pH耐受性 | 第36-37页 |
| 3．3．6 金属离子对酶活性的影响 | 第37页 |
| 3．3．7 其他试剂对酶蛋白的影响 | 第37-38页 |
| 3．3．8 乳糖酶动力学常数测定 | 第38-39页 |
| 3．3．9 乳糖酶分子量及亚基数的测定 | 第39页 |
| 3．3．10 乳糖酶蛋白糖基化程度的测定结果 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-44页 |
| 4．1 黑曲霉D2-26乳糖酶的分离纯化 | 第40-41页 |
| 4．2 黑曲霉D2-26及其乳糖酶的酶学性质分析 | 第41-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 6 参考文献 | 第45-52页 |
| 7．在读期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
| 8 作者简历 | 第53-54页 |
| 9 致谢 | 第54页 |