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天蓝色链霉菌A3(2)中bldA依赖性突变的遗传定位及克隆初探

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
缩略语第7-9页
1 文献综述第9-24页
   ·链霉菌及其模式菌株天蓝色链霉菌A3(2)的概述第9-11页
   ·天蓝色链霉菌 A3(2))中遗传图谱的研究第11-14页
     ·天蓝色链霉菌 A3(2)中的致育因子与性别体制第11-12页
     ·天蓝色链霉菌 A3(2)的遗传分析方法和遗传图谱的研究第12-14页
   ·天蓝色链霉菌 A3(2)基因组基本信息及其特点第14-15页
     ·染色体的“一区两臂”结构第14页
     ·染色体末端的不稳定性第14-15页
     ·染色体富含次生代谢基因簇和调控基因第15页
   ·天蓝色链霉菌 A3(2)次级代谢调控网络第15-17页
     ·抗生素生物合成基因簇和途径专一调控基因第15-16页
     ·双组分信号传导系统第16页
     ·形态分化基因第16-17页
     ·A因子第17页
     ·ppGpp第17页
   ·bldA在天蓝色链霉菌 A3(2)中的调控地位第17-22页
     ·bldA调节抗生素的合成第18-20页
     ·bldA调节形态分化的产生第20-22页
   ·本课题研究的立论依据、目的、意义第22-24页
2 材料与方法第24-37页
   ·菌株第24-25页
   ·质粒第25页
   ·培养基与生化试剂第25-28页
   ·链霉菌的基本遗传操作第28-29页
     ·菌种培养及保藏第28页
     ·链霉菌孢子悬液的制备第28-29页
     ·链霉菌中致育因子的证明第29页
     ·链霉菌孢子杂交第29页
     ·链霉菌重组子基因型的鉴定第29页
   ·DNA基本操作第29-32页
     ·大肠杆菌质粒的抽提第29-30页
     ·链霉菌总 DNA的提取第30页
     ·链霉菌质粒 DNA的提取第30-31页
     ·氯化锉纯化 DNA第31页
     ·酶连反应第31页
     ·DNA片段凝胶回收第31-32页
   ·PCR技术第32-33页
   ·基因片段转移技术第33-37页
     ·大肠杆菌 CaCl_2法制备感受态细胞及 DNA转化第33页
     ·大肠杆菌电转化感受态的制备及电转化第33-34页
     ·大肠杆菌和链霉菌的两亲本属间接合转移第34-35页
     ·链霉菌原生质体的制备及 DNA转化第35-37页
3 结果与分析第37-54页
   ·天蓝色链霉菌 A3(2) M145中bad~-突变的遗传定位第37-45页
     ·遗传定位bad~-突变的方案第37-38页
     ·遗传定位亲本 LY3的构建第38-39页
     ·孢子杂交与重组子的筛选、鉴定第39-43页
     ·遗传作图定位bad~-突变第43-44页
     ·小结与讨论第44-45页
   ·鸟枪克隆bad~+基因的尝试第45-54页
     ·鸟枪法克隆bad~+基因的方案第45-47页
     ·载体的制备第47-48页
     ·M600 DNA片段的制备第48-49页
     ·原生质体转化与转化子的筛选第49-50页
     ·可疑目的转化子的筛选与验证第50-52页
     ·外源片段的测序第52页
     ·小结与讨论第52-54页
4 总结与展望第54-56页
   ·总结第54-55页
   ·展望第55-56页
参考文献第56-63页
致谢第63页

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