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藏鸡生产性能研究及鸡三个基因的分离、SNPs检测及其与经济性状的关联分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
1 文献综述第12-24页
   ·藏鸡遗传资源现状及研究现状第12-14页
     ·藏鸡遗传资源现状第12-13页
       ·藏鸡的体型外貌第12页
       ·藏鸡的生产性能第12-13页
     ·藏鸡研究现状第13-14页
   ·鸡基因组研究现状第14-16页
   ·新基因的克隆方法第16-17页
   ·SNP的研究进展及应用第17-21页
     ·SNP的特点第17-18页
     ·SNP的检测方法第18-21页
       ·基于生物信息学SNPs侯选法第18-19页
       ·直接测序法第19页
       ·分子杂交法第19页
       ·基于PCR法第19-21页
   ·三个拟分离基因的研究进展第21-24页
     ·MyoT基因第21-22页
     ·Cacngl基因第22-23页
     ·Camk2d基因第23-24页
2 本研究的目的和意义第24-25页
3 材料与方法第25-39页
   ·材料第25-30页
     ·样品第25-28页
       ·生长性状资料第25页
       ·产蛋性状资料第25页
       ·DNA样品第25-28页
       ·组织样品第28页
     ·主要仪器设备第28页
     ·培养基、酶及试剂盒第28页
     ·主要试剂及配制第28-29页
       ·主要试剂第28-29页
       ·主要试剂配制第29页
     ·菌株第29页
     ·主要分子生物学软件和数据库及统计软件第29-30页
       ·主要分子生物学软件第29-30页
       ·常用分子生物学数据库第30页
       ·主要数据分析及统计软件第30页
   ·方法第30-39页
     ·藏鸡生长发育规律主要研究方法第30-31页
       ·藏鸡生长发育规律(0-16周龄)研究方法第30页
       ·数据分析方法第30-31页
     ·鸡MyoT、Cacngl和Camk2d基因片段的分离方法第31-33页
       ·PCR扩增引物设计第31-32页
       ·PCR扩增条件第32页
       ·PCR产物的纯化、克隆和测序第32-33页
       ·DNA序列同源性检索鉴定第33页
       ·cDNA序列分析第33页
     ·鸡中几个侯选基因的SNP检测第33-36页
       ·MyoT基因第34页
       ·Cacngl基因第34-36页
       ·Camk2d基因第36页
     ·侯选基因与鸡经济性状的关联分析第36-37页
     ·半定量RT-PCR进行MyoT和Cacngl基因组织表达谱研究的方法第37-39页
       ·总RNA的提取、检测、DNase-Ⅰ处理及纯化第37-38页
       ·RNA的反转录(Reversetranscription,RT)第38页
       ·PCR反应第38-39页
4 结果第39-65页
   ·各群体性能测定结果第39-43页
     ·藏鸡、隐性白羽鸡和藏隐F1代产蛋性能分析第39-40页
     ·藏鸡、隐性白羽鸡、藏隐F1代及75%藏鸡血液的杂种生长性能分析第40-43页
       ·藏鸡早期生长曲线(0-16周龄)的拟合与分析第40-42页
       ·藏鸡、隐性白羽鸡、藏隐F1代及75%藏鸡血液的杂种早期生长发育的比较第42-43页
   ·鸡MyoT、Cacngl和Camk2d基因片段的分离、序列分析及鉴定结果第43-46页
     ·引物特异扩增结果第43-45页
     ·分离片段的序列分析与鉴定第45-46页
       ·鸡MyoT基因氨基酸序列分析结果第45页
       ·鸡Cacngl基因氨基酸序列分析结果第45-46页
       ·鸡Camk2d基因氨基酸序列分析结果第46页
   ·鸡MyoT基因、Cacngl基因和Camk2d基因遗传变异的检测第46-58页
     ·鸡MyoT基因遗传变异的检测第46-52页
       ·鸡MyoT基因第10外显子和3’-UTR突变位点的发现第46-47页
       ·鸡MyoT基因第10外显子Hin6Ⅰ酶切位点多态性的检测结果第47-48页
       ·鸡MyoT基因3′-UTR区RsaⅠ酶切位点多态性的检测结果第48-50页
       ·鸡MyoT基因3’-UTR区BsuRⅠ酶切位点多态性的检测结果第50-52页
     ·鸡Cacngl基因遗传变异的检测第52-56页
       ·鸡Cacngl基因第2内含子,第3、4、5外显子及3′-UTR区突变位点的发现第52页
       ·鸡Cacngl基因第2内含子长片段缺失/插入的检测结果第52-53页
       ·鸡Cacngl基因第4外显子MspⅠ酶切位点多态性的检测结果第53页
       ·鸡Cacngl基因第5外显子多态位点的检测结果第53-54页
       ·鸡Cacngl基因3’-UIRMspI酶切位点多态性的检测结果第54-56页
     ·鸡Camk2d基因遗传变异的检测第56-58页
       ·鸡Camk2d基因第15外显子突变位点的发现第56页
       ·鸡Camk2d基因第15外显子VspⅠ酶切位点多态性的检测结果第56-58页
   ·部分多态位点与鸡部分经济性状间的关联分析第58-63页
     ·鸡MyoT基因第58-60页
       ·Hin6Ⅰ酶切多态位点与部分经济性状间的关联分析第58-59页
       ·RsaⅠ酶切位点多态与部分经济性状间的关联分析第59页
       ·BsuRⅠ多态位点多态与部分经济性状间的关联分析第59-60页
     ·鸡Cacng1基因第60-62页
       ·第2内含子长片段插入/缺失与部分经济性状间的关联分析第60页
       ·第4外显子MspⅠ酶切位点与部分经济性状间的关联分析第60-61页
       ·第5外显子M-ASP位点与部分经济性状间的关联分析第61-62页
       ·3′-UTR区MspⅠ酶切位点与部分经济性状间的关联分析第62页
     ·鸡Camk2d基因第15外显子VspⅠ多态位点与部分经济性状间的关联分析第62-63页
   ·利用半定量RT-PCR研究鸡MyoT及Cacngl基因组织表达结果第63-65页
     ·总RNA的提取和检测结果第63页
     ·鸡MyoT和Cacmgl基因表达谱分析第63-65页
5 讨论第65-70页
   ·关于藏鸡生长发育规律的研究第65-66页
     ·关于生长模型的选择第65页
     ·关于藏鸡生长曲线的拟合第65-66页
   ·关于SNPs的检测第66-67页
   ·关于Cacngl基因第2内含子长片段的插入/缺失第67-68页
   ·关于基因与部分经济性状的关联分析第68-69页
   ·关于表达谱研究的分析第69-70页
6 小结第70-72页
   ·本研究的主要成果第70-71页
   ·本研究的创新点与特色第71页
   ·本研究的不足之处及引出的问题第71-72页
参考文献第72-79页
附录1 鸡MyoT基因cDNA序列和推导出的氨基酸序列第79-81页
附录2 鸡、人、小鼠和大鼠的MyoT氨基酸序列比对图第81-82页
附录3 鸡、人、小鼠和大鼠的Cacngl氨基酸序列比对图第82-83页
附录4 鸡、人、小鼠和大鼠的Camk2d氨基酸序列比对图第83-84页
附录5 缩略词表第84-85页
在读其间撰写论文题录第85-86页
致谢第86页

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