| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-38页 |
| 第一章 常用的植物转基因方法 | 第17-23页 |
| 1 农杆菌介导转化法 | 第17-21页 |
| ·T-DNA的转化机制以及VIR区基因群的作用 | 第17-19页 |
| ·转化的过程及载体策略 | 第19-20页 |
| ·转化方法的延伸和受体的扩展 | 第20-21页 |
| 2 基因枪介导转化法 | 第21页 |
| 3 花粉管通道法 | 第21-23页 |
| 第二章 植物组织培养和植株再生的影响因素 | 第23-27页 |
| 1 外植体的选择 | 第23页 |
| 2 基因型的选择 | 第23-24页 |
| 3 组织培养的种类 | 第24页 |
| 4 培养条件 | 第24-25页 |
| ·培养基的组成成分 | 第24-25页 |
| ·光、暗处理 | 第25页 |
| ·温、湿度 | 第25页 |
| ·细胞培养容器 | 第25页 |
| 5.器官发生、胚胎发生和植株的再生 | 第25-27页 |
| 第三章 棉花植株再生和农杆菌介导的转化体系研究进展 | 第27-38页 |
| 1.标准的再生和转化体系的优化 | 第27-33页 |
| ·影响棉花转化效率的因素 | 第28页 |
| ·通过营养和微环境调节进行代谢胁迫,缩短培养时间提高再生效率 | 第28-32页 |
| ·胚性愈伤的诱导 | 第28-31页 |
| ·胚状体的形成 | 第31页 |
| ·体细胞胚的成熟 | 第31-32页 |
| ·胚的萌发 | 第32页 |
| ·利用胚性愈伤为受体缩短转化周期,提高转化效率 | 第32-33页 |
| 2.选择不同的组织或器官作为受体来打破基因型的限制 | 第33-35页 |
| ·子叶节为外植体诱导丛生芽和以茎尖为受体的转化体系 | 第33-35页 |
| ·农杆菌介导的转化花粉授粉后进而获得转化植株 | 第35页 |
| 3.选择高频再生潜力的基因型和基因型的拓展 | 第35-38页 |
| 第二部分 研究报告 | 第38-99页 |
| 第四章 陆地棉传统的农杆菌介导遗传转化体系的优化 | 第38-63页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·农杆菌培养基 | 第40页 |
| ·棉花组培培养基 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-58页 |
| ·外植体的转化 | 第41-45页 |
| ·影响侵染效率的因素 | 第41-43页 |
| 菌种的培养和处理 | 第41-42页 |
| 外植体处理 | 第42-43页 |
| ·初生愈伤的诱导和增殖及其对胚胎发生的作用 | 第43-45页 |
| ·胚性愈伤的诱导、获得和gus速测 | 第45-46页 |
| ·由胚性愈伤到再生植株的影响因素和优化 | 第46-53页 |
| ·几种氮素状态在再生体系中的作用 | 第53-55页 |
| ·插皮接在再生植株嫁接中的应用 | 第55-58页 |
| ·插皮接应用效果分析 | 第55-57页 |
| ·管理要点 | 第57页 |
| ·较大砧木的嫁接 | 第57-58页 |
| ·体系的优化 | 第58页 |
| 3 结论 | 第58-61页 |
| 4.讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 泗棉3号下胚轴为外植体转化体系的建立和利用 | 第63-76页 |
| 1 材料和方法 | 第63-64页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-64页 |
| ·转化的方法 | 第63页 |
| ·gus基因的组织化学检测 | 第63页 |
| ·PCR检测 | 第63-64页 |
| ·SOUTHERN BLOTTING检测 | 第64页 |
| ·卡那霉素抗性检测 | 第64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-74页 |
| ·泗棉3号转化体系的建立 | 第64-74页 |
| ·感染后出愈率和分化率的比较 | 第64-65页 |
| ·泗棉3号胚性愈伤组织诱导的特殊性 | 第65-67页 |
| ·PCR检测 | 第67页 |
| ·SOUTHERN检测 | 第67-74页 |
| ·泗棉3号转化体系的利用 | 第74页 |
| 3 结论 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-76页 |
| 第六章 农杆菌介导棉花胚性愈伤转化体系的优化 | 第76-85页 |
| 1 材料与方法 | 第76-78页 |
| ·农杆菌和质粒 | 第76页 |
| ·胚性愈伤的制备和保存 | 第76-77页 |
| ·转化和植株再生 | 第77页 |
| ·gus基因组织化学检测 | 第77页 |
| ·PCR检测 | 第77-78页 |
| ·SOUTHERN BLOTTING检测 | 第78页 |
| 2 结果 | 第78-83页 |
| ·胚性愈伤的繁殖和受体愈伤的选择 | 第78页 |
| ·gus组织化学检测分析AS、温度和时间对瞬间转化的影响 | 第78-79页 |
| ·抗性愈伤的获得和植株再生 | 第79-81页 |
| ·再生植株的gus组织化学检测 | 第81页 |
| ·PCR检测 | 第81-82页 |
| ·npt II基因的SOUTHERN检测 | 第82-83页 |
| 3 结论与讨论 | 第83-85页 |
| 第七章 高频再生品系的选择 | 第85-91页 |
| 1.材料和方法 | 第85-86页 |
| ·材料 | 第85-86页 |
| ·供试品种 | 第85页 |
| ·培养基 | 第85-86页 |
| ·组织培养的方法 | 第86页 |
| ·选择的方法 | 第86页 |
| 2.结果与分析 | 第86-89页 |
| ·从WO品系中筛选到高频再生的纯系 | 第86-88页 |
| ·选择 | 第86-88页 |
| ·获得的纯系作为受体在转化时的表现 | 第88页 |
| ·从泗棉3号中筛选高频再生的品系 | 第88-89页 |
| 3 讨论 | 第89-91页 |
| 第八章 bar基因转化COKER 312的研究 | 第91-99页 |
| 1.材料和方法 | 第92-93页 |
| ·棉花品种 | 第92页 |
| ·载体和质粒 | 第92-93页 |
| ·遗传转化方法 | 第93页 |
| ·培养基 | 第93页 |
| ·农杆菌培养基 | 第93页 |
| ·棉花组培培养基 | 第93页 |
| 2 结果与讨论 | 第93-97页 |
| ·转基因植株的分子验证 | 第93-95页 |
| ·PCR验证 | 第93-94页 |
| ·SOUTHERN BLOTTING | 第94-95页 |
| ·基因表达的检测 | 第95-96页 |
| ·T_0代植株的RT-PCR | 第95页 |
| ·T_0代植株抗PPT鉴定 | 第95-96页 |
| ·T_1代转bar基因植株的遗传分析和性状考察 | 第96-97页 |
| 3 结论与讨论 | 第97-99页 |
| 全文的结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 博士期间发表论文 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
