| 英文缩写词 | 第1-3页 |
| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 前言 | 第7-14页 |
| 第一部分 大鼠肌肉素基因的克隆与表达 | 第14-31页 |
| 1 材料和方法 | 第14-23页 |
| ·材料 | 第14-18页 |
| ·方法 | 第18-23页 |
| ·目的基因引物的设计与合成 | 第18-19页 |
| ·大鼠肌肉组织总RNA的提取 | 第19页 |
| ·目的蛋白基因的扩增与鉴定 | 第19页 |
| ·目的DNA和pGEX-5x-3的双酶切 | 第19-20页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第20-21页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第21页 |
| ·重组原核表达载体的构建 | 第21页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第21-22页 |
| ·分析表达蛋白的存在形式 | 第22页 |
| ·pGEX-5X-3-musclin在原核细胞中表达条件的最优化 | 第22-23页 |
| 2 结果 | 第23-31页 |
| ·大鼠肌肉总RNA的提取 | 第23页 |
| ·目的蛋白基因的扩增与鉴定 | 第23-24页 |
| ·重组原核表达载体的构建 | 第24页 |
| ·SDS-PAGE分析重组蛋白 | 第24-26页 |
| ·重组蛋白的免疫印迹分析 | 第26页 |
| ·表达产物的存在形式 | 第26-27页 |
| ·pCEX-5X-3-musclin在原核细胞中的表达条件优化结果 | 第27-31页 |
| 3 讨论 | 第31页 |
| 第二部分 肌肉素重组蛋白的多克隆抗体制备 | 第31-40页 |
| 1 材料和方法 | 第31-36页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·方法 | 第33-36页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·第一次免疫 | 第34-35页 |
| ·第一次加强免疫 | 第35页 |
| ·第二次加强免疫 | 第35页 |
| ·第三次加强免疫 | 第35页 |
| ·多克隆抗体的鉴定 | 第35-36页 |
| ·间接ELISA法检测抗体效价 | 第35-36页 |
| ·Western印迹鉴定抗体特异性 | 第36页 |
| 2 结果 | 第36-39页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·包涵体的洗涤与纯化 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的亲和纯化 | 第37页 |
| ·免疫兔制备多克隆抗体 | 第37-38页 |
| ·Western印迹检测抗体特异性 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 致谢 | 第47页 |