| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-28页 |
| 1. 斑马鱼是脊椎动物早期胚胎发育研究中的模式动物 | 第10-14页 |
| ·斑马鱼作为模式生物的优点 | 第10-12页 |
| ·斑马鱼早期胚胎发育阶段 | 第12-14页 |
| 2 Angiomotin 的研究综述 | 第14-22页 |
| ·肿瘤血管生成与内源性血管抑制因子angiostatin | 第14-17页 |
| ·Angiomotin 研究综述 | 第17-20页 |
| ·zAmotL2 研究前景 | 第20-22页 |
| 3 酵母双杂交系统综述 | 第22-28页 |
| ·酵母双杂交系统的发展简史和应用现状 | 第22-23页 |
| ·酵母双杂交系统的应用原理 | 第23-24页 |
| ·酵母双杂交系统的基本程序和关键因素 | 第24-25页 |
| ·酵母双杂交系统的应用优势 | 第25-26页 |
| ·酵母双杂交系统的局限性 | 第26-27页 |
| ·酵母双杂交系统的前景展望 | 第27-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-41页 |
| 1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2 试剂及耗材 | 第29-30页 |
| 3 主要实验仪器及设备 | 第30页 |
| 4 分析工具软件和网址 | 第30-31页 |
| 5 实验方法 | 第31-41页 |
| 第三章 通过酵母双杂交系统筛选斑马鱼胚胎cDNA文库中与zAmotL2相互作用的蛋白因子 | 第41-56页 |
| 1 zAmotL2-BD bait 表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 2 检测zAmot12 BD-bait 的转录活性和细胞毒性 | 第43-45页 |
| 3 斑马鱼早期胚胎cDNA 文库的构建 | 第45-46页 |
| 4 利用诱饵蛋白对cDNA 文库进行筛选 | 第46-49页 |
| 5 通过β-Galactosidase 分析法寻找阳性克隆 | 第49-51页 |
| 6 提取阳性酵母质粒电转入大肠杆菌细胞 | 第51页 |
| 7 对阳性克隆进行菌落 PCR 鉴定 | 第51-52页 |
| 8 对阳性克隆进行测序鉴定 | 第52-54页 |
| 9 对选取的后续研究蛋白基因进行回转鉴定 | 第54-56页 |
| 第四章 讨论与分析 | 第56-63页 |
| 1 关于长片段高保真 PCR 反应 | 第56-57页 |
| ·引物设计 | 第56页 |
| ·延伸时间 | 第56页 |
| ·各物质的量的控制 | 第56页 |
| ·关于酶的选用问题 | 第56-57页 |
| ·问题解决对策 | 第57页 |
| 2 关于酵母双杂交系统 | 第57-61页 |
| ·关于克服酵母双杂交系统中出现假阳性的问题 | 第57-58页 |
| ·关于表达载体的特征 | 第58页 |
| ·本杂交系统的局限性 | 第58-60页 |
| ·总结 | 第60-61页 |
| 3 在实验中遇到问题的解决方法 | 第61-63页 |
| ·酵母菌的破壁及酵母质粒的提取 | 第61页 |
| ·将酵母质粒转化入大肠杆菌的方法 | 第61-62页 |
| ·用 PCR 进行鉴定 | 第62-63页 |
| 第五章 筛库结果分析 | 第63-73页 |
| 1 胚胎发育过程中重要的信号转导通路 | 第63-67页 |
| ·Wnt 信号及其在胚胎发育过程中的作用 | 第63-65页 |
| ·TGFβ超家族的信号通路 | 第65-67页 |
| 2 斑马鱼 Dp12 蛋白研究进展 | 第67-69页 |
| 3 斑马鱼Gsk3a 蛋白研究进展 | 第69-72页 |
| 4 结语和展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 硕士期间发表文章 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
