| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| 1 植酸酶的研究进展 | 第9-13页 |
| ·植酸与植酸酶的概述 | 第9-10页 |
| ·植酸酶的来源 | 第10-11页 |
| ·植酸酶的理化性质 | 第11-12页 |
| ·植酸酶的催化作用及其机理 | 第12页 |
| ·植酸酶的应用现状及前景展望 | 第12-13页 |
| 2 植酸酶热稳定性研究进展 | 第13页 |
| 3 植酸酶蛋白质工程的研究进展 | 第13-16页 |
| ·合理设计(rational design) | 第14-15页 |
| ·半合理设计(semi-rational design) | 第15页 |
| ·非合理设计(irrational design) | 第15-16页 |
| 4 巴斯德毕赤酵母表达系统的研究进展 | 第16-18页 |
| ·毕赤酵母表达系统的优点 | 第16-17页 |
| ·毕赤酵母的基因工程操作 | 第17页 |
| ·影响外源基因在毕赤酵母中表达的因素 | 第17-18页 |
| 5 本研究的前期工作基础及目的意义 | 第18-20页 |
| ·本研究的前期工作基础 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 第二章 定点突变技术提高黑曲霉N25植酸酶热稳定性的研究 | 第20-58页 |
| 1 材料 | 第20-24页 |
| ·菌株与载体 | 第20-21页 |
| ·试剂与溶液 | 第21-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-38页 |
| ·植酸酶基因的序列结构分析 | 第24页 |
| ·植酸酶基因的定点突变 | 第24-30页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·重组表达载体的电击转化及转化子筛选 | 第31-33页 |
| ·重组毕赤酵母的诱导表达 | 第33-34页 |
| ·重组毕赤酵母转化子的Southern blotting | 第34-35页 |
| ·植酸酶活力及蛋白质含量测定 | 第35-36页 |
| ·植酸酶的分离纯化 | 第36-37页 |
| ·植酸酶的酶学性质研究 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-52页 |
| ·植酸酶基因的序列结构分析 | 第38-41页 |
| ·植酸酶phyA基因的定点突变 | 第41-43页 |
| ·重组质粒pPIC9k-phyA的构建 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的电击转化及毕赤酵母阳性菌落筛选 | 第44-45页 |
| ·植酸酶重组毕赤酵母诱导表达 | 第45页 |
| ·重组酵母转化子的Southern blotting | 第45-46页 |
| ·植酸酶的分离纯化 | 第46-48页 |
| ·植酸酶的酶学性质研究 | 第48-52页 |
| 4 讨论 | 第52-57页 |
| ·植酸酶phyA基因的定点突变 | 第52-54页 |
| ·植酸酶的分离纯化 | 第54-55页 |
| ·突变植酸酶酶学性质研究 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第65页 |
