| 符号简写说明 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一部分 文献综述及选题目的和意义 | 第13-26页 |
| 第一章 牛脑组织利用及潜在危害 | 第13-17页 |
| 1. 牛脑组织的利用 | 第13-17页 |
| ·牛脑组织中的活性多肽 | 第13-14页 |
| ·动物源性饲料的主要潜在风险 | 第14-16页 |
| ·政府对反刍MBM的限令 | 第16-17页 |
| 第二章 朊蛋白结构和功能研究进展 | 第17-26页 |
| 1 朊蛋白的研究进展 | 第17-25页 |
| ·朊蛋白的结构 | 第17-18页 |
| ·朊蛋白的功能 | 第18-19页 |
| ·致病性朊蛋白的形成过程及传播途径 | 第19-21页 |
| ·朊蛋白基因多态性与致病性关系 | 第21-22页 |
| ·致病性朊蛋白的检测方法 | 第22-25页 |
| ·组织病理学 | 第23页 |
| ·免疫组织化学方法 | 第23-24页 |
| ·WESTERN BLOT技术 | 第24-25页 |
| 2 目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二部分 试验研究 | 第26-51页 |
| 第三章 长期摄入牛脑成分对小鼠学习记忆能力影响 | 第26-33页 |
| 1 材料 | 第26-27页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-29页 |
| ·牛脑组织的遴选 | 第27-28页 |
| ·牛脑组织提取物的制备 | 第28页 |
| ·动物实验 | 第28-29页 |
| ·实验小鼠体重的变化 | 第29页 |
| ·小鼠学习与记忆能力的测定 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-32页 |
| ·体重增率变化(增率=增长重量/生长时间) | 第29-30页 |
| ·Morris水迷宫平台获得实验(学习记忆试验) | 第30-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| ·摄入牛脑组织提取物与小鼠体重变化的关系 | 第32页 |
| ·牛脑组织成分对小鼠学习记忆能力的影响 | 第32-33页 |
| 第四章 BALB/C小鼠朊蛋白基因的克隆及表达 | 第33-41页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| ·组织来源 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| 2 方法 | 第34-37页 |
| ·BALB/C小鼠PRNP基因的克隆和序列分析 | 第34-35页 |
| ·引物的设计与PrP成熟片段的测序 | 第34-35页 |
| ·表达载体的构建 | 第35页 |
| ·重组质粒pMD-19/MPrP及pET-32a的提取 | 第35-36页 |
| ·重组质粒链接及鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组菌诱导表达及表达产物纯化 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-40页 |
| ·PRNP的扩增及克隆载体的构建 | 第37-38页 |
| ·pET32a-MPrP基因表达载体的构建 | 第38页 |
| ·PRNP基因外显子2序列的克隆与分析 | 第38-39页 |
| ·pET32a-MPrP重组质粒表达产物SDS-PAGE | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| ·BALB/C小鼠的PRNP基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·朊蛋白原核表达 | 第41页 |
| 第五章 长期摄入牛脑成分对小鼠朊蛋白结构影响 | 第41-51页 |
| 1 材料 | 第42-43页 |
| ·组织来源 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43-45页 |
| ·免疫组化检测小鼠脑组织的致病性朊蛋白 | 第43-44页 |
| ·免疫组化结果分析与判断标准 | 第44页 |
| ·WESTERN BLOT检测小鼠朊蛋白糖基化水平 | 第44-45页 |
| ·小鼠脑组织匀浆及PrP的提取 | 第44页 |
| ·PrP~C的去糖基化 | 第44页 |
| ·常规电泳及电转 | 第44-45页 |
| ·免疫检测 | 第45页 |
| ·WESTERN BLOT结果分析 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-48页 |
| ·免疫组织化学检测结果 | 第45-47页 |
| ·糖基化分析结果 | 第47-48页 |
| ·PRP~C去糖基化分析结果 | 第48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| ·免疫组化结果的分析 | 第48-49页 |
| ·实验小鼠脑组织中朊蛋白糖基化水平的分析 | 第49-51页 |
| 第三部分 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60页 |
