| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-34页 |
| ·橡胶树死皮病研究概况及进展 | 第13-18页 |
| ·TPD发生机理的相关研究 | 第14-16页 |
| ·TPD发生机理的相关假说 | 第16-18页 |
| ·高等植物程序性细胞死亡研究进展 | 第18-25页 |
| ·植物正常发育过程中的PCD | 第19-23页 |
| ·微管(TE)分化过程中发生的PCD | 第19-20页 |
| ·胚发育过程中的PCD | 第20-21页 |
| ·性别分化过程中的PCD | 第21页 |
| ·植物衰老过程中发生的PCD | 第21-22页 |
| ·植物发育性PCD的生物学意义 | 第22-23页 |
| ·环境胁迫诱导的植物程序性细胞死亡 | 第23-25页 |
| ·环境胁迫因子的类型 | 第23-24页 |
| ·环境胁迫诱导的植物PCD重要信号分子 | 第24-25页 |
| ·环境胁迫因子诱发的PCD的生物学意义 | 第25页 |
| ·植物Myb类转录因子研究进展 | 第25-29页 |
| ·Myb蛋白的结构及分类 | 第26页 |
| ·植物Myb蛋白的生物学功能 | 第26-29页 |
| ·植物Myb蛋白的表达调控 | 第29页 |
| ·基因表达调控中的DNA结合蛋白及其研究方法 | 第29-34页 |
| ·DNA结合蛋白 | 第30页 |
| ·DNA结合蛋白的研究方法 | 第30-34页 |
| ·体外研究方法 | 第30-32页 |
| ·酵母单杂交技术 | 第32-34页 |
| 2.本研究的目的意义 | 第34-36页 |
| 3.本研究的技术路线 | 第36-38页 |
| 4.材料与方法 | 第38-57页 |
| ·HbMyb1启动子的克隆 | 第39-42页 |
| ·CTAB法提取橡胶树基因组DNA | 第39页 |
| ·HbMyb1启动子的PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·PCR产物的凝胶回收 | 第40-41页 |
| ·PCR产物双酶切 | 第41页 |
| ·酶切产物的凝胶回收 | 第41-42页 |
| ·酵母单杂交技术筛选与HbMyb1启动子(P)结合的基因 | 第42-52页 |
| ·诱饵载体与P的重组 | 第42-45页 |
| ·空诱饵载体pHIS2的双酶切 | 第42页 |
| ·pHIS2与P的连接 | 第42-43页 |
| ·连接液转化大肠杆菌DH5a感受态细胞 | 第43页 |
| ·重组子的鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的大量提取和纯化 | 第44-45页 |
| ·单杂交诱饵载体的序列鉴定 | 第45页 |
| ·对重组诱饵载体pHIS2/P进行组氨酸本底表达水平的测定 | 第45-46页 |
| ·酵母(Y187)菌株感受态细胞的小量制备 | 第45-46页 |
| ·重组诱饵载体转化酵母感受态细胞 | 第46页 |
| ·胶乳cDNA文库的构建 | 第46-50页 |
| ·胶乳总RNA的提取 | 第46-47页 |
| ·以Oligo(dT)为引物合成cDNA第一链 | 第47-48页 |
| ·LD-PCR扩增双链cDNA片段 | 第48-49页 |
| ·双链cDNA的纯化 | 第49-50页 |
| ·酵母单杂交文库的筛选 | 第50-51页 |
| ·大量制备酵母(Y187)感受态细胞 | 第50页 |
| ·三元共转化筛选 | 第50-51页 |
| ·阳性克隆的分析 | 第51-52页 |
| ·阳性克隆的表型验证 | 第51页 |
| ·阳性克隆的进一步分析 | 第51-52页 |
| ·HbMyb1调节基因(Hb2)的表达分析 | 第52-54页 |
| ·橡胶树胶乳总RNA的提取 | 第52页 |
| ·橡胶树叶片和胶乳总RNA的电泳 | 第52页 |
| ·RNA凝胶印迹转移 | 第52页 |
| ·探针的标记 | 第52-53页 |
| ·预杂交和杂交 | 第53页 |
| ·杂交后洗膜 | 第53页 |
| ·免疫检测 | 第53-54页 |
| ·基因Hb2与HbMyb1启动子相互作用的验证研究 | 第54-57页 |
| ·HbMyb1启动子控制的植物表达载体的构建 | 第54-56页 |
| ·启动子序列的扩增 | 第54-55页 |
| ·目的片段的双酶切 | 第55页 |
| ·启动子区段与载体的连接 | 第55-56页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 | 第56页 |
| ·质粒的小量提取及阳性菌落的PCR鉴定 | 第56页 |
| ·阳性质粒的大量提取 | 第56页 |
| ·胶乳离体表达系统研究Hb2与启动子之间的相互作用 | 第56-57页 |
| ·胶乳离体表达系统的制备 | 第56页 |
| ·Hb2与HbMyb1启动子之间相互作用的验证 | 第56-57页 |
| 5 结果与分析 | 第57-77页 |
| ·HbMyb1启动子的克隆 | 第57-59页 |
| ·HbMyb1调节子编码基因的克隆 | 第59-68页 |
| ·诱饵载体pHIS2/P的构建 | 第59-61页 |
| ·对重组诱饵载体进行组氨酸本底表达水平的测定结果 | 第61-62页 |
| ·胶乳cDNA文库的构建结果与分析 | 第62-64页 |
| ·酵母单杂交文库的筛选结果与分析 | 第64-65页 |
| ·Hb2的序列分析 | 第65-68页 |
| ·Hb2的表达分析 | 第68-71页 |
| ·Hb2与HbMyb1相互作用的体外验证结果与分析 | 第71-77页 |
| ·启动子缺失植物表达载体的构建结果与分析 | 第71-75页 |
| ·Hb2与HbMyb1调节关系的鉴定 | 第75-77页 |
| 6 讨论 | 第77-79页 |
| 7 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-92页 |
| 附录 | 第92-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
