| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 1 前言 | 第10-28页 |
| ·稻瘟菌基因组学研究进展 | 第10-16页 |
| ·基因组测序 | 第11-12页 |
| ·稻瘟菌遗传与物理图谱的构建 | 第12-13页 |
| ·EST测序 | 第13-14页 |
| ·基因功能分析 | 第14-16页 |
| ·插入突变法克隆稻瘟病菌基因 | 第16-19页 |
| ·限制性内切酶介导的整合技术 | 第16-17页 |
| ·农杆菌介导的转化技术 | 第17-19页 |
| ·稻瘟菌致病相关基因的研究进展 | 第19-25页 |
| ·参与稻瘟菌发育调节的基因 | 第19-22页 |
| ·稻瘟菌编码致病生化因子的基因 | 第22-23页 |
| ·稻瘟菌的无毒基因 | 第23-25页 |
| ·T-DNA侧翼序列的扩增及分析 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的意义和研究内容 | 第26-28页 |
| ·目的意义 | 第26-27页 |
| ·研究内容 | 第27-28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-40页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·稻瘟菌 | 第28页 |
| ·菌种和质粒 | 第28页 |
| ·供试水稻 | 第28页 |
| ·生化试剂 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-40页 |
| ·T-DNA插入突变体库的构建 | 第29-30页 |
| ·稻瘟菌大量分生孢子的获得 | 第29页 |
| ·农杆菌和质粒的准备 | 第29页 |
| ·共培养过程 | 第29-30页 |
| ·转化子的筛选及纯化 | 第30页 |
| ·菌种保存 | 第30页 |
| ·致病性测定 | 第30-31页 |
| ·水稻苗的获得 | 第30页 |
| ·稻瘟菌分生孢子的获得 | 第30页 |
| ·接种方法 | 第30-31页 |
| ·发病分级标准及数据处理 | 第31页 |
| ·稻瘟菌突变体生物学研究 | 第31-32页 |
| ·分生孢子产量的测定 | 第31页 |
| ·分生孢子萌发和附着胞产生量的测定 | 第31-32页 |
| ·稻瘟菌突变体的培养及大量菌丝体的获得 | 第32页 |
| ·稻瘟菌基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·T-DNA插入的分子检测 | 第33-36页 |
| ·PCR检测 | 第33页 |
| ·热不对称嵌套PCR检测 | 第33-35页 |
| ·PCR产物的凝胶电泳观察 | 第35-36页 |
| ·TAIL-PCR扩增产物的回收 | 第36页 |
| ·目的片段的克隆 | 第36-39页 |
| ·连接反应 | 第36-37页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·电击转化 | 第37-38页 |
| ·质粒DNA的微量提取及纯化 | 第38页 |
| ·质粒的PCR鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组阳性克隆菌保存 | 第39页 |
| ·DNA片段的测序与分析 | 第39-40页 |
| 3.结果与分析 | 第40-53页 |
| ·稻瘟病菌T-DNA插入突变体库的构建 | 第40页 |
| ·转化子致病力测定 | 第40-41页 |
| ·致病相关突变体菌落形态的观察 | 第41-42页 |
| ·致病相关突变体的产孢量测定 | 第42-43页 |
| ·致病相关突变体分生孢子萌发和附着胞形成能力 | 第43-45页 |
| ·致病相关突变体基因组DNA的提取 | 第45页 |
| ·致病相关突变体插入位点侧翼序列的扩增 | 第45-48页 |
| ·PCR检测 | 第45-46页 |
| ·TAIL-PCR扩增T-DNA插入位点的侧翼序列 | 第46-47页 |
| ·TAIL-PCR产物的回收及克隆 | 第47-48页 |
| ·TAIL-PCR产物的分析 | 第48-52页 |
| ·T-DNA右边界剪切位点(NICK POSITION)的分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-57页 |
| ·关于稻瘟菌T-DNA插入突变体库的构建 | 第53-54页 |
| ·关于致病相关突变体的筛选 | 第54-55页 |
| ·关于T-DNA插入位点的侧翼序列分析 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 附录图版 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76页 |