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抗猪圆环病毒Ⅱ型ORF2蛋白单克隆抗体的制备鉴定及Ⅰ型ORF2功能基因的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
第一章 文献综述第9-19页
 1.1 病原学第9-12页
  1.1.1 病毒的发现第9页
  1.1.2 病毒的理化性质第9页
  1.1.3 病毒复制方式与培养特性第9-10页
  1.1.4 PCV分子生物学研究进展第10-12页
 1.2 流行病学第12-14页
  1.2.1 宿主范围和传播方式第12-13页
  1.2.2 病毒感染现状第13-14页
 1.3 致病性第14-15页
 1.4 症状第15页
 1.5 病理变化第15-16页
 1.6 组织学研究第16页
 1.7 血清学研究第16页
 1.8 诊断方法第16-19页
  1.8.1 电镜法第17页
  1.8.2 免疫荧光法第17页
  1.8.3 ELISA诊断方法第17页
  1.8.4 PCR方法第17-18页
  1.8.5 核酸探针及原位杂交方法第18-19页
第二章 研究的目的和意义第19-20页
第三章 抗猪圆环病毒Ⅱ型 ORF2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定第20-29页
 3.1 实验材料第20页
  3.1.1 质粒、菌株、试验动物及血清第20页
  3.1.2 主要试剂配制方法第20页
 3.2 实验方法第20-24页
  3.2.1 动物免疫第20-21页
  3.2.2 细胞融合第21-22页
  3.2.3 杂交瘤细胞的筛选和克隆第22-23页
  3.2.4 杂交瘤细胞染色体计数第23页
  3.2.5 特异性检测第23-24页
 3.3 结果第24-25页
  3.3.1 杂交瘤细胞的筛选第24页
  3.3.2 杂交瘤细胞染色体计数结果第24页
  3.3.3 单克隆抗体的效价第24页
  3.3.4 间接免疫荧光第24页
  3.3.5 交叉试验第24-25页
 3.4 结果分析第25-29页
  3.4.1 猪Ⅱ型圆环病毒第25-26页
  3.4.2 免疫程序第26页
  3.4.3 小鼠骨髓瘤细胞的培养第26-28页
  3.4.4 污染和控制第28页
  3.4.5 结论第28-29页
第四章 猪圆环病毒Ⅰ型 ORF2基因的研究第29-39页
 4.1 实验材料第29-30页
  4.1.1 质粒、菌株第29页
  4.1.2 酶及主要试剂第29页
  4.1.3 细菌培养基第29-30页
 4.2 实验方法第30-33页
  4.2.1 PCR扩增 PCV1-ORF2基因和其截短基因第30-31页
  4.2.2 PCR产物的回收与纯化第31页
  4.2.3 基因片段的克隆第31页
  4.2.4 连接产物的转化第31页
  4.2.5 质粒的制备第31-32页
  4.2.7 序列测定第32-33页
  4.2.8 细胞转染第33页
 4.3 结果与分析第33-37页
  4.3.1 PCR扩增 PCV1-ORF2基因和其截短基因第33页
  4.3.2 酶切鉴定第33-34页
  4.3.3 PCV1-ORF2基因序列测定与同源性比较第34-35页
  4.3.4 蛋白结构功能域分析第35-37页
  4.3.5 细胞转染第37页
 4.4 讨论第37-39页
参考文献第39-45页
英文缩略词表第45-47页
致谢第47-48页
附录第48页

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