摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-19页 |
1.1 病原学 | 第9-12页 |
1.1.1 病毒的发现 | 第9页 |
1.1.2 病毒的理化性质 | 第9页 |
1.1.3 病毒复制方式与培养特性 | 第9-10页 |
1.1.4 PCV分子生物学研究进展 | 第10-12页 |
1.2 流行病学 | 第12-14页 |
1.2.1 宿主范围和传播方式 | 第12-13页 |
1.2.2 病毒感染现状 | 第13-14页 |
1.3 致病性 | 第14-15页 |
1.4 症状 | 第15页 |
1.5 病理变化 | 第15-16页 |
1.6 组织学研究 | 第16页 |
1.7 血清学研究 | 第16页 |
1.8 诊断方法 | 第16-19页 |
1.8.1 电镜法 | 第17页 |
1.8.2 免疫荧光法 | 第17页 |
1.8.3 ELISA诊断方法 | 第17页 |
1.8.4 PCR方法 | 第17-18页 |
1.8.5 核酸探针及原位杂交方法 | 第18-19页 |
第二章 研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第三章 抗猪圆环病毒Ⅱ型 ORF2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第20-29页 |
3.1 实验材料 | 第20页 |
3.1.1 质粒、菌株、试验动物及血清 | 第20页 |
3.1.2 主要试剂配制方法 | 第20页 |
3.2 实验方法 | 第20-24页 |
3.2.1 动物免疫 | 第20-21页 |
3.2.2 细胞融合 | 第21-22页 |
3.2.3 杂交瘤细胞的筛选和克隆 | 第22-23页 |
3.2.4 杂交瘤细胞染色体计数 | 第23页 |
3.2.5 特异性检测 | 第23-24页 |
3.3 结果 | 第24-25页 |
3.3.1 杂交瘤细胞的筛选 | 第24页 |
3.3.2 杂交瘤细胞染色体计数结果 | 第24页 |
3.3.3 单克隆抗体的效价 | 第24页 |
3.3.4 间接免疫荧光 | 第24页 |
3.3.5 交叉试验 | 第24-25页 |
3.4 结果分析 | 第25-29页 |
3.4.1 猪Ⅱ型圆环病毒 | 第25-26页 |
3.4.2 免疫程序 | 第26页 |
3.4.3 小鼠骨髓瘤细胞的培养 | 第26-28页 |
3.4.4 污染和控制 | 第28页 |
3.4.5 结论 | 第28-29页 |
第四章 猪圆环病毒Ⅰ型 ORF2基因的研究 | 第29-39页 |
4.1 实验材料 | 第29-30页 |
4.1.1 质粒、菌株 | 第29页 |
4.1.2 酶及主要试剂 | 第29页 |
4.1.3 细菌培养基 | 第29-30页 |
4.2 实验方法 | 第30-33页 |
4.2.1 PCR扩增 PCV1-ORF2基因和其截短基因 | 第30-31页 |
4.2.2 PCR产物的回收与纯化 | 第31页 |
4.2.3 基因片段的克隆 | 第31页 |
4.2.4 连接产物的转化 | 第31页 |
4.2.5 质粒的制备 | 第31-32页 |
4.2.7 序列测定 | 第32-33页 |
4.2.8 细胞转染 | 第33页 |
4.3 结果与分析 | 第33-37页 |
4.3.1 PCR扩增 PCV1-ORF2基因和其截短基因 | 第33页 |
4.3.2 酶切鉴定 | 第33-34页 |
4.3.3 PCV1-ORF2基因序列测定与同源性比较 | 第34-35页 |
4.3.4 蛋白结构功能域分析 | 第35-37页 |
4.3.5 细胞转染 | 第37页 |
4.4 讨论 | 第37-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
英文缩略词表 | 第45-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
附录 | 第48页 |