| 文献综述 | 第1-26页 |
| 第一章 日本血吸虫期特异表达功能基因研究进展 | 第11-26页 |
| ·血吸虫基本生物学特征 | 第11-12页 |
| ·血吸虫生活史及致病机理 | 第11页 |
| ·血吸虫的危害与防制措施 | 第11-12页 |
| ·血吸虫基因组研究概况 | 第12页 |
| ·期别差异表达功能基因研究进展 | 第12-19页 |
| ·血吸虫基因期别差异表达的生物学现象及研究意义 | 第12-13页 |
| ·血吸虫期别差异表达功能基因的研究进展 | 第13-15页 |
| ·血吸虫期别差异性表达功能基冈的克隆方法 | 第15-19页 |
| ·血吸虫全长基因序列获取的方法 | 第19-22页 |
| ·已知序列基冈的扩增 | 第19-20页 |
| ·已知部分序列扩增cDNA 全长基冈的方法 | 第20-22页 |
| ·血吸虫疫苗的研究进展 | 第22-26页 |
| ·血吸虫疫苗候选抗原 | 第22-24页 |
| ·展望 | 第24-26页 |
| 试验研究 | 第26-71页 |
| 第二章 日本血吸虫成虫期新基因全长cDNA 的克隆和鉴定 | 第26-42页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·实验动物、尾蚴、钉螺 | 第26页 |
| ·实验的菌株、载体 | 第26页 |
| ·实验工具酶、生化试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·主要溶液和培养基的配制 | 第27页 |
| ·源序列 | 第27-28页 |
| ·引物 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-35页 |
| ·日本血吸虫(中国人陆株)成虫的收集 | 第28页 |
| ·日本血吸虫成虫总 RNA 提取 | 第28-29页 |
| ·5′RACE 反应原理 | 第29页 |
| ·单链cDNA的环化 | 第29-30页 |
| ·第一次 RACE 向进行 PCR 扩增 | 第30-33页 |
| ·6 第二次 RACE 扩增 DNA 序列 | 第33-34页 |
| ·Sj314C10 原核表达载体的构建与转化 | 第34-35页 |
| ·结果 | 第35-41页 |
| ·日本血吸虫总 RNA 完整性分析 | 第35-36页 |
| ·第一次RACE扩增的序列 | 第36-37页 |
| ·第二次RACE扩增的序列 | 第37-39页 |
| ·Sj314C10+-ORF 扩增结果 | 第39页 |
| ·重组菌鉴定 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第三章 SJ314C10 基冈的生物信息学分析 | 第42-50页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·方法 | 第42页 |
| ·Sj314C10 全长基因核苷酸序列同源性分析 | 第42页 |
| ·SJ314C10 基因 ORF 及其编码蛋白质性质分析 | 第42页 |
| ·Sj314C10 基因编码蛋白质同源性分析 | 第42页 |
| ·Sj314ClO 基因冈编码蛋白质结构利功能位点分析 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-48页 |
| ·对Sj314C10 基冈核苷酸的同源性分析 | 第42-44页 |
| ·Sj314C10 基因编码蛋白序列的氨基酸组成和核酸对应情况 | 第44页 |
| ·Sj314C10 基因编码蛋白的性质 | 第44-45页 |
| ·Sj314C10 基因编码蛋白疏水性分析 | 第45页 |
| ·TMHMM 对日本血吸虫 Sj314C10 基因编码蛋白跨膜区分析 | 第45-46页 |
| ·Sj314C10 基因编码蛋白氨基酸序列同源性分析 | 第46页 |
| ·Sj314C10 编码蛋白质结构功能域分析 | 第46-47页 |
| ·结构和功能位点分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第四章 SJ314C10 基冈蛋白表达、纯化及复性 | 第50-63页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·菌株 | 第50页 |
| ·实验化学试剂 | 第50页 |
| ·实验生化仪器 | 第50页 |
| ·主要配制的溶液 | 第50-51页 |
| ·方法 | 第51-55页 |
| ·Sj314C10 蛋白的表达 | 第51页 |
| ·SDS—PAGE | 第51-52页 |
| ·SDS—PAGE 电泳胶干胶的制备 | 第52-53页 |
| ·Sj314C10 基因编码蛋白表达条件的观察 | 第53页 |
| ·目标蛋白纯化 | 第53-54页 |
| ·His Bind Resin 的再生和纯化目的蛋白 | 第54页 |
| ·纯化蛋白的复性 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-61页 |
| ·重组菌和空载菌经 IPTG 诱导表达,SDS—PAGE 电泳分析 | 第55-56页 |
| ·温度对融合蛋白表达 | 第56-57页 |
| ·诱导浓度对重组蛋白表达的影响 | 第57-58页 |
| ·诱导表达时间对重组蛋白表达的影响 | 第58-61页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第61页 |
| ·纯化蛋白浓度 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第五章 重组蛋白功能的研究 | 第63-71页 |
| ·材料 | 第63-64页 |
| ·实验动物 | 第63页 |
| ·血吸虫 | 第63页 |
| ·其他生化原料 | 第63页 |
| ·主要的溶液 | 第63-64页 |
| ·方法 | 第64-67页 |
| ·制备日本血吸虫粗抗原 | 第64页 |
| ·日本血吸虫纯化抗原的制备 | 第64页 |
| ·兔抗日本血吸虫(中国人陆株)成虫血消的制备 | 第64-65页 |
| ·Western Blotting 目标蛋白抗原性检测 | 第65页 |
| ·重组蛋白免疫小白鼠抗体变化分析 | 第65-67页 |
| ·小白鼠尾蚴感染后的减虫率减卵率统计 | 第67页 |
| ·结果 | 第67-69页 |
| ·粗抗原免疫兔血清监测 | 第67页 |
| ·表达产物 Western blotting 分析 | 第67-68页 |
| ·ELISA 分析重组蛋白免疫鼠抗体变化分析 | 第68-69页 |
| ·重组抗原动物保护实验 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69页 |
| ·小结 | 第69-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 附录(缩略语) | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 个人简历 | 第81页 |
