| 图片目录 | 第1-10页 |
| 表格目录 | 第10-11页 |
| 中文摘要 | 第11-14页 |
| 英文摘要 | 第14-17页 |
| 第一章 豆豉溶栓酶基因在大肠杆菌中的表达及其产物的纯化 | 第17-54页 |
| 摘要 | 第18-19页 |
| 1 引言 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·试剂 | 第20-21页 |
| ·菌株及载体 | 第21-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-32页 |
| 3 结果 | 第32-47页 |
| ·豆豉溶栓酶基因表达质粒的构建和鉴定 | 第32-39页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第39-43页 |
| ·重组豆豉溶栓酶的纯化 | 第43-46页 |
| ·重组豆豉溶栓酶的性质研究 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| ·大肠杆菌表达系统对豆豉溶栓酶基因表达的影响 | 第47-48页 |
| ·豆豉溶栓酶基因的结构对其表达产物活性的影响 | 第48-49页 |
| ·重组豆豉溶栓酶的纯化 | 第49-50页 |
| 小结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 第二章 重组豆豉溶栓酶的复性及其纯化 | 第54-84页 |
| 摘要 | 第55-56页 |
| 1 引言 | 第56-57页 |
| 2 材料与方法 | 第57-61页 |
| ·试剂及菌株 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-61页 |
| 3 结果 | 第61-75页 |
| ·豆豉溶栓酶融合蛋白的诱导表达及其包涵体的制备 | 第61页 |
| ·稀释和透析复性 | 第61-64页 |
| ·金属螯和亲和层析复性 | 第64-68页 |
| ·rDFE的层析复性及纯化 | 第68-72页 |
| ·rDFE的鉴定及其性质研究 | 第72-75页 |
| 4 讨论 | 第75-80页 |
| ·rDFE的透析和稀释复性 | 第75-76页 |
| ·rDFE的Ni~(2+)螯和亲和层析复性 | 第76-77页 |
| ·rDFE的变性复性工艺 | 第77-78页 |
| ·rDFE的纯化效果 | 第78页 |
| ·rDFE的鉴定及其性质研究 | 第78-80页 |
| 小结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-84页 |
| 第三章 豆豉溶栓酶基因在毕赤酵母中的表达及其产物的纯化 | 第84-109页 |
| 摘要 | 第85-86页 |
| 1 引言 | 第86-87页 |
| 2 材料与方法 | 第87-94页 |
| ·菌株与载体 | 第87-89页 |
| ·工具酶及试剂 | 第89页 |
| ·培养基 | 第89页 |
| ·实验方法 | 第89-94页 |
| 3 结果 | 第94-104页 |
| ·豆豉溶栓酶基因的扩增与克隆 | 第94-96页 |
| ·毕赤酵母转化及转化子的鉴定 | 第96页 |
| ·豆豉溶栓酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第96-97页 |
| ·重组豆豉溶栓酶的纯化 | 第97-102页 |
| ·重组豆豉溶栓酶性质研究 | 第102-104页 |
| 4 讨论 | 第104-106页 |
| ·豆豉溶栓酶在毕赤酵母中的表达 | 第104页 |
| ·毕赤酵母表达的重组豆豉溶栓酶的纯化 | 第104-105页 |
| ·豆豉溶栓酶的不同表达与纯化方法比较 | 第105-106页 |
| 小结 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-109页 |
| 第四章 豆豉溶栓酶的初步药理学研究 | 第109-123页 |
| 摘要 | 第110-111页 |
| 1 引言 | 第111-112页 |
| 2 材料与方法 | 第112-115页 |
| ·药品 | 第112页 |
| ·动物 | 第112-113页 |
| ·豆豉溶栓酶制剂的制备 | 第113页 |
| ·豆豉溶栓酶溶栓活性测定 | 第113页 |
| ·豆豉溶栓酶急性毒性试验方法 | 第113-114页 |
| ·豆豉溶栓酶药效学初步实验 | 第114-115页 |
| ·药理学实验指标的检测 | 第115页 |
| 3 结果 | 第115-118页 |
| ·豆豉溶栓酶样品制备及其溶栓酶活性检测 | 第115页 |
| ·豆豉溶栓酶急性毒性试验 | 第115-116页 |
| ·豆豉溶栓酶药效学初步实验 | 第116-118页 |
| 4 讨论 | 第118-120页 |
| 小结 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-123页 |
| 文献综述 以包涵体形式表达的重组蛋白的复性 | 第123-156页 |
| 摘要 | 第124-125页 |
| 1 包涵体的形成和基本特性 | 第125-127页 |
| ·包涵体的定义、组成与特性 | 第125页 |
| ·包涵体的形成 | 第125-127页 |
| ·包涵体表达的有利因素 | 第127页 |
| 2 变性蛋白复性的研究 | 第127-148页 |
| ·包涵体分离、洗涤及溶解 | 第128-130页 |
| ·蛋白质复性机制研究 | 第130-132页 |
| ·包涵体蛋白复性方法 | 第132-142页 |
| ·包涵体蛋白复性效率 | 第142-147页 |
| ·复性效果的检测 | 第147-148页 |
| 3 复性后样品处理 | 第148-149页 |
| 参考文献 | 第149-156页 |
| 致谢 | 第156-157页 |
| 在读期间发表或被接受的论文 | 第157-158页 |
| 声明 | 第158页 |