| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 宏基因组学技术的研究进展 | 第12-36页 |
| ·微生物的多样性与可培养性 | 第12-15页 |
| ·微生物的多样性及意义 | 第12页 |
| ·可培养微生物 | 第12-14页 |
| ·未培养微生物 | 第14-15页 |
| ·宏基因组学研究进展 | 第15-30页 |
| ·宏基因组学的起源 | 第15-17页 |
| ·宏基因组学的技术策略 | 第17-24页 |
| ·宏基因组学的应用 | 第24-29页 |
| ·宏基因组学的瓶颈及发展 | 第29-30页 |
| ·芳环加氧酶 | 第30-34页 |
| ·芳环加氧酶的分类及催化机理 | 第30-33页 |
| ·芳环加氧酶的应用 | 第33-34页 |
| ·本论文研究内容及意义 | 第34-36页 |
| ·选题依据 | 第34页 |
| ·本论文研究内容及意义 | 第34-36页 |
| 2 宏基因组DNA的提取 | 第36-50页 |
| ·材料与方法 | 第36-43页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-49页 |
| ·溶菌酶-SDS-蛋白酶K法提取宏基因组DNA的条件优化 | 第43-47页 |
| ·试剂盒提取活性污泥宏基因组DNA | 第47-48页 |
| ·CTAB法提取活性污泥宏基因组DNA | 第48页 |
| ·琼脂糖包埋法提取活性污泥宏基因组DNA | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 3 宏基因组Fosmid文库的构建 | 第50-55页 |
| ·材料与方法 | 第50-51页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 4 宏基因组中芳烃加氧酶的筛选策略 | 第55-65页 |
| ·材料与方法 | 第55-60页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-64页 |
| ·Fosmid文库的活性筛选 | 第60-61页 |
| ·Fosmid文库的序列筛选 | 第61-63页 |
| ·宏基因组DNA的直接PCR扩增 | 第63-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 5 芳烃加氧酶基因侧翼序列的获取 | 第65-83页 |
| ·材料与方法 | 第65-73页 |
| ·实验材料 | 第65-66页 |
| ·实验方法 | 第66-73页 |
| ·结果与讨论 | 第73-82页 |
| ·苯酚羟化酶基因侧翼未知序列的扩增 | 第73-81页 |
| ·2,3-二羟基联苯1,2-双加氧酶基因侧翼未知序列的扩增 | 第81-82页 |
| ·本章小结 | 第82-83页 |
| 6 苯酚羟化酶基因的序列分析及表达 | 第83-101页 |
| ·材料与方法 | 第83-89页 |
| ·实验材料 | 第83-84页 |
| ·实验方法 | 第84-89页 |
| ·结果与讨论 | 第89-100页 |
| ·苯酚羟化酶基因的序列分析 | 第89-92页 |
| ·苯酚羟化酶基因的克隆 | 第92-94页 |
| ·苯酚羟化酶基因的突变修复 | 第94-96页 |
| ·苯酚羟化酶基因的异源表达 | 第96-100页 |
| ·本章小结 | 第100-101页 |
| 7 2,3-二羟基联苯1,2-双加氧酶基因的表达及特性 | 第101-119页 |
| ·材料与方法 | 第101-107页 |
| ·实验材料 | 第101-102页 |
| ·实验方法 | 第102-107页 |
| ·结果与讨论 | 第107-118页 |
| ·2,3-二羟基联苯1,2-双加氧酶基因的序列分析 | 第107-108页 |
| ·2,3-二羟基联苯1,2-双加氧酶基因的克隆与构建 | 第108-109页 |
| ·bphC_meta基因的突变修复 | 第109-110页 |
| ·BphC_meta的表达及特性考察 | 第110-118页 |
| ·本章小结 | 第118-119页 |
| 8 芳烃加氧酶获取策略的评价 | 第119-130页 |
| ·材料与方法 | 第119-121页 |
| ·实验材料 | 第119-120页 |
| ·实验方法 | 第120-121页 |
| ·结果与讨论 | 第121-128页 |
| ·Sphingomonas xenophaga QYY中邻苯二酚双加氧酶的获取 | 第121-123页 |
| ·宏基因组学技术与纯培养技术的综合评价 | 第123-126页 |
| ·三种宏基因组学筛选策略的评价 | 第126-127页 |
| ·不同筛选策略的总结 | 第127页 |
| ·宏基因组学技术未来的发展趋势 | 第127-128页 |
| ·本章小结 | 第128-130页 |
| 9 结论与建议 | 第130-132页 |
| ·主要结论 | 第130-131页 |
| ·建议 | 第131-132页 |
| 创新点摘要 | 第132-133页 |
| 参考文献 | 第133-143页 |
| 附录A 活性污泥宏基因组中苯酚羟化酶基因序列登录GenBank | 第143-148页 |
| 附录B 活性污泥宏基因组中bphC基因序列登录GenBank | 第148-150页 |
| 作者简介 | 第150页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第150-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
