中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
第一章 植物果实成熟分子生物学与基因工程研究进展 | 第13-37页 |
1.1 果实成熟的分子生物学 | 第13-20页 |
1.1.1 ACC合成酶及其基因 | 第13-16页 |
1.1.2 ACC氧化酶及其基因 | 第16页 |
1.1.3 多聚半乳糖醛酸酶(PG)及其基因 | 第16-18页 |
1.1.4 乙烯受体及其基因 | 第18-20页 |
1.2 控制果实成熟的基因工程研究 | 第20-25页 |
1.2.1 ACC合成酶基因及其反义基因的应用 | 第21-22页 |
1.2.2 ACC氧化酶基因及其反义基因的应用 | 第22-23页 |
1.2.3 多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因及其反义基因的应用 | 第23-24页 |
1.2.4 果胶(甲)酯酶(PE)基因及其反义基因的应用 | 第24-25页 |
1.2.5 乙烯受体基因的应用 | 第25页 |
1.3 转基因甜瓜的研究进展 | 第25-28页 |
1.3.1 甜瓜转基因技术的建立 | 第26-27页 |
1.3.2 甜瓜抗病毒基因工程 | 第27-28页 |
1.3.3 甜瓜耐贮藏基因工程 | 第28页 |
1.3.4 甜瓜耐盐基因工程 | 第28页 |
参考文献 | 第28-37页 |
第二章 甜瓜果实成熟相关基因cDNA的克隆和序列分析 | 第37-49页 |
2.1 材料与方法 | 第38-39页 |
2.1.1 植物材料 | 第38页 |
2.1.2 试剂和菌种 | 第38页 |
2.1.3 果实总RNA提取 | 第38页 |
2.1.4 cDNA第一条链的合成 | 第38页 |
2.1.5 PCR扩增 | 第38-39页 |
2.1.6 cDNA克隆 | 第39页 |
2.1.7 重组质粒的酶切分析及序列测定 | 第39页 |
2.2 结果 | 第39-46页 |
2.2.1 cDNA的合成和PCR扩增 | 第39-41页 |
2.2.2 重组cDNA克隆的鉴定 | 第41-42页 |
2.2.3 序列分析 | 第42-46页 |
2.3 讨论 | 第46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
第三章 甜瓜果实特异性表达cucumisin基因启动子区的克隆和序列分析 | 第49-54页 |
3.1 材料和方法 | 第50-51页 |
3.1.1 植物材料 | 第50页 |
3.1.2 试剂 | 第50页 |
3.1.3 甜瓜总DNA提取 | 第50页 |
3.1.4 甜瓜cucumisin基因启动子区的扩增 | 第50页 |
3.1.5 PCR产物的克隆与序列分析 | 第50-51页 |
3.2 结果与分析 | 第51-52页 |
3.2.1 甜瓜cucumisin基因启动子区的PCR扩增结果 | 第51页 |
3.2.2 甜瓜cucumisin基因启动子区的重组质粒筛选与鉴定 | 第51页 |
3.2.3 序列分析 | 第51-52页 |
3.3 讨论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-54页 |
第四章 甜瓜花粉管通道法转基因技术的建立 | 第54-62页 |
4.1 材料与方法 | 第55-56页 |
4.1.1 主要试剂 | 第55页 |
4.1.2 质粒和植物材料 | 第55页 |
4.1.3 质粒DNA的制备 | 第55页 |
4.1.4 植物材料的种植与转化 | 第55-56页 |
4.1.5 植物DNA的提取 | 第56页 |
4.1.6 PCR检测 | 第56页 |
4.1.7 基因组DNA Southern杂交 | 第56页 |
4.2 结果与分析 | 第56-59页 |
4.2.1 转化时间对结果率的影响 | 第56页 |
4.2.2 转化时间对转化效率的影响 | 第56-58页 |
4.2.3 基因组DNA Southern杂交 | 第58页 |
4.2.4 不同切割处理对转化频率的影响 | 第58-59页 |
4.3 讨论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-62页 |
第五章 转基因耐贮藏河套蜜瓜的培育 | 第62-85页 |
5.1 材料与方法 | 第63-69页 |
5.1.1 主要试剂 | 第63-64页 |
5.1.2 植物表达载体的构建 | 第64页 |
5.1.3 花粉管通道法转化 | 第64页 |
5.1.4 转化种子和植株的检测 | 第64-65页 |
5.1.5 耐贮藏品系的选育 | 第65-68页 |
5.1.6 耐贮性鉴定 | 第68页 |
5.1.7 生理生化分析 | 第68页 |
5.1.8 Southern杂交 | 第68页 |
5.1.9 Northern杂交 | 第68-69页 |
5.1.10 杂交组合的配制 | 第69页 |
5.2 结果与分析 | 第69-82页 |
5.2.1 表达载体的构建 | 第69-70页 |
5.2.2 转化材料的获得 | 第70-71页 |
5.2.3 耐贮藏品系的选育 | 第71页 |
5.2.4 外源基因遗传稳定性检测 | 第71页 |
5.2.5 生理生化分析 | 第71-75页 |
5.2.6 转基因品系果实的贮藏结果 | 第75-77页 |
5.2.7 Southern杂交 | 第77-78页 |
5.2.8 Northern杂交 | 第78页 |
5.2.9 杂交组合的比较试验 | 第78-81页 |
5.2.10 区域试验和大量贮藏试验 | 第81-82页 |
5.2.11 转基因耐贮藏河套蜜瓜安全性评价 | 第82页 |
5.3 讨论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-85页 |
结论 | 第85-86页 |
存在的问题及今后的研究方向 | 第86-87页 |
作者简介 | 第87-91页 |
致谢 | 第91页 |