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甜瓜耐贮藏基因工程研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
第一章 植物果实成熟分子生物学与基因工程研究进展第13-37页
 1.1 果实成熟的分子生物学第13-20页
  1.1.1 ACC合成酶及其基因第13-16页
  1.1.2 ACC氧化酶及其基因第16页
  1.1.3 多聚半乳糖醛酸酶(PG)及其基因第16-18页
  1.1.4 乙烯受体及其基因第18-20页
 1.2 控制果实成熟的基因工程研究第20-25页
  1.2.1 ACC合成酶基因及其反义基因的应用第21-22页
  1.2.2 ACC氧化酶基因及其反义基因的应用第22-23页
  1.2.3 多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因及其反义基因的应用第23-24页
  1.2.4 果胶(甲)酯酶(PE)基因及其反义基因的应用第24-25页
  1.2.5 乙烯受体基因的应用第25页
 1.3 转基因甜瓜的研究进展第25-28页
  1.3.1 甜瓜转基因技术的建立第26-27页
  1.3.2 甜瓜抗病毒基因工程第27-28页
  1.3.3 甜瓜耐贮藏基因工程第28页
  1.3.4 甜瓜耐盐基因工程第28页
 参考文献第28-37页
第二章 甜瓜果实成熟相关基因cDNA的克隆和序列分析第37-49页
 2.1 材料与方法第38-39页
  2.1.1 植物材料第38页
  2.1.2 试剂和菌种第38页
  2.1.3 果实总RNA提取第38页
  2.1.4 cDNA第一条链的合成第38页
  2.1.5 PCR扩增第38-39页
  2.1.6 cDNA克隆第39页
  2.1.7 重组质粒的酶切分析及序列测定第39页
 2.2 结果第39-46页
  2.2.1 cDNA的合成和PCR扩增第39-41页
  2.2.2 重组cDNA克隆的鉴定第41-42页
  2.2.3 序列分析第42-46页
 2.3 讨论第46页
 参考文献第46-49页
第三章 甜瓜果实特异性表达cucumisin基因启动子区的克隆和序列分析第49-54页
 3.1 材料和方法第50-51页
  3.1.1 植物材料第50页
  3.1.2 试剂第50页
  3.1.3 甜瓜总DNA提取第50页
  3.1.4 甜瓜cucumisin基因启动子区的扩增第50页
  3.1.5 PCR产物的克隆与序列分析第50-51页
 3.2 结果与分析第51-52页
  3.2.1 甜瓜cucumisin基因启动子区的PCR扩增结果第51页
  3.2.2 甜瓜cucumisin基因启动子区的重组质粒筛选与鉴定第51页
  3.2.3 序列分析第51-52页
 3.3 讨论第52-53页
 参考文献第53-54页
第四章 甜瓜花粉管通道法转基因技术的建立第54-62页
 4.1 材料与方法第55-56页
  4.1.1 主要试剂第55页
  4.1.2 质粒和植物材料第55页
  4.1.3 质粒DNA的制备第55页
  4.1.4 植物材料的种植与转化第55-56页
  4.1.5 植物DNA的提取第56页
  4.1.6 PCR检测第56页
  4.1.7 基因组DNA Southern杂交第56页
 4.2 结果与分析第56-59页
  4.2.1 转化时间对结果率的影响第56页
  4.2.2 转化时间对转化效率的影响第56-58页
  4.2.3 基因组DNA Southern杂交第58页
  4.2.4 不同切割处理对转化频率的影响第58-59页
 4.3 讨论第59-60页
 参考文献第60-62页
第五章 转基因耐贮藏河套蜜瓜的培育第62-85页
 5.1 材料与方法第63-69页
  5.1.1 主要试剂第63-64页
  5.1.2 植物表达载体的构建第64页
  5.1.3 花粉管通道法转化第64页
  5.1.4 转化种子和植株的检测第64-65页
  5.1.5 耐贮藏品系的选育第65-68页
  5.1.6 耐贮性鉴定第68页
  5.1.7 生理生化分析第68页
  5.1.8 Southern杂交第68页
  5.1.9 Northern杂交第68-69页
  5.1.10 杂交组合的配制第69页
 5.2 结果与分析第69-82页
  5.2.1 表达载体的构建第69-70页
  5.2.2 转化材料的获得第70-71页
  5.2.3 耐贮藏品系的选育第71页
  5.2.4 外源基因遗传稳定性检测第71页
  5.2.5 生理生化分析第71-75页
  5.2.6 转基因品系果实的贮藏结果第75-77页
  5.2.7 Southern杂交第77-78页
  5.2.8 Northern杂交第78页
  5.2.9 杂交组合的比较试验第78-81页
  5.2.10 区域试验和大量贮藏试验第81-82页
  5.2.11 转基因耐贮藏河套蜜瓜安全性评价第82页
 5.3 讨论第82-83页
 参考文献第83-85页
结论第85-86页
存在的问题及今后的研究方向第86-87页
作者简介第87-91页
致谢第91页

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