肺炎克雷伯氏菌荚膜糖蛋白的制备和免疫调节作用的研究
| 1 前言 | 第1-17页 |
| ·概述 | 第9-11页 |
| ·肺炎克雷伯氏菌(Kp)的生物学特性 | 第11页 |
| ·细菌的荚膜 | 第11-13页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白 | 第13-14页 |
| ·国内外研究现状和发展趋势 | 第14-15页 |
| ·国内外专利情况 | 第15-16页 |
| ·本文的研究目的和主要内容 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-32页 |
| ·实验材料 | 第17-22页 |
| ·菌株 | 第17页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·主要溶液 | 第17-19页 |
| ·主要试剂 | 第19-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-32页 |
| ·检测方法的建立 | 第22-29页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白抗体的制备 | 第22-23页 |
| ·ELISA操作程序 | 第23-24页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白ELISA定量法 | 第24-25页 |
| ·Kp全菌ELISA定量法 | 第25页 |
| ·免疫斑点检测方法 | 第25页 |
| ·活菌计数与A_(600)nm相关曲线的绘制 | 第25页 |
| ·细菌形态学的检测方法 | 第25-26页 |
| ·蛋白含量测定 | 第26-28页 |
| ·己糖含量的测定 | 第28页 |
| ·发酵液中糖浓度的测定 | 第28-29页 |
| ·Kp的培养方法 | 第29-30页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白的提取 | 第30-31页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白的纯化 | 第31页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白的HPLC分析 | 第31页 |
| ·提取物免疫调节作用的测定 | 第31-32页 |
| 3 结果与讨论 | 第32-73页 |
| ·检测方法的确定 | 第32-43页 |
| ·抗体的制备与纯化 | 第33-37页 |
| ·ELISA检测标准曲线的绘制 | 第37-40页 |
| ·全菌ELISA检测方法的建立 | 第40-42页 |
| ·A_(600)值与活菌数的相关曲线 | 第42-43页 |
| ·Kp发酵工艺的研究 | 第43-58页 |
| ·种子培养基及培养条件的确定 | 第43-45页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第45-53页 |
| ·摇瓶发酵条件的确定 | 第53-56页 |
| ·摇瓶发酵过程曲线的绘制 | 第56-57页 |
| ·Kp摇瓶发酵工艺小结 | 第57页 |
| ·7L罐放大实验 | 第57-58页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白提取工艺的研究 | 第58-65页 |
| ·Kp菌体裂解 | 第59-61页 |
| ·裂解液的浓缩 | 第61-63页 |
| ·荚膜糖蛋白沉淀方法 | 第63-64页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白提取工艺小结 | 第64-65页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白纯化工艺的确定 | 第65-70页 |
| ·离子交换层析 | 第65-68页 |
| ·凝胶排阻层析 | 第68-69页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白的纯化结果小结 | 第69-70页 |
| ·Kp荚膜糖蛋白的HPLC分析 | 第70-71页 |
| ·免疫调节作用的研究 | 第71-73页 |
| 4 结论 | 第73-76页 |
| 5 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 研究生阶段发表论文情况 | 第82页 |
