中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
1 前言 | 第8-19页 |
·植保素研究概述 | 第8-11页 |
·萜类植保素生物合成途径研究 | 第9-10页 |
·倍半萜类植保素生物合成与倍半萜环化酶 | 第10页 |
·倍半萜环化酶基因工程 | 第10-11页 |
·水稻遗传转化方法评述 | 第11-15页 |
·直接转化法 | 第11-13页 |
·农杆菌介导法转化水稻 | 第13-15页 |
·影响农杆菌介导转化水稻的重要因素 | 第15-16页 |
·农杆菌菌株和载体类 | 第15页 |
·Vir基因的诱导 | 第15-16页 |
·水稻基因性及外植体培养培养条件 | 第16页 |
·水稻基因工程研究进展 | 第16-19页 |
2 材料与方法 | 第19-34页 |
·实验材料 | 第19-21页 |
·植物材料 | 第19页 |
·菌株 | 第19页 |
·质粒 | 第19-20页 |
·主要试剂及酶类 | 第20页 |
·主要仪器设备 | 第20-21页 |
·培养基的配制 | 第21页 |
·水稻高频遗传转化再生体系的建立 | 第21-22页 |
·培养基筛选 | 第21-22页 |
·分化培养基的优化 | 第22页 |
·水稻继代时间与分化关系 | 第22页 |
·植物表达载体构建 | 第22-27页 |
·构建策略 | 第22页 |
·载体构建 | 第22-27页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第27-28页 |
·农杆菌EHA105对羧苄青霉素的敏感性实验 | 第27页 |
·水稻愈伤组织对潮酶素敏感性实验 | 第27-28页 |
·农杆菌转化水稻 | 第28页 |
·转基因植株的分子检测 | 第28-34页 |
·抗性植株DNA分子的抽提 | 第28-29页 |
·抗性植株基因组PCR鉴定 | 第29-30页 |
·Southern印迹分析 | 第30-34页 |
3 结果与分析 | 第34-42页 |
·水稻高频遗传转化系统的建立 | 第34-36页 |
·三种诱导培养基对水稻愈伤组织的影响 | 第34页 |
·NAA与6-BA不同浓度组合对水稻愈伤分化的影响 | 第34-35页 |
·水稻愈伤继代时间与分化的关系 | 第35-36页 |
·植物表达载体构建 | 第36-37页 |
·pGA1621/pBSK-PEAS质粒片段大小的鉴定 | 第36页 |
·重组质粒片段大小鉴定 | 第36-37页 |
·农杆菌阳性克隆PCR鉴定 | 第37页 |
·农杆菌介导水稻遗传转化 | 第37-39页 |
·农杆菌菌株EHA105对羧苄青霉素耐性实验 | 第37-38页 |
·水稻愈伤组织对潮酶素的敏感性 | 第38-39页 |
·四个水稻品种的转化频率比较 | 第39页 |
·转基因植株分子检测 | 第39-42页 |
·抗性植株的PCR检测 | 第40页 |
·Southern blotting检测阳性植株 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
·关于籼稻和粳稻高效遗传转化体系的建立 | 第42页 |
·植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
·农杆菌介导的遗传转化 | 第43页 |
·影响Southern blotting的因素 | 第43-44页 |
5 小结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
附录1 本研究技术路线 | 第55-56页 |
附录2 转基因植株生成过程图版 | 第56-57页 |
附录3 英文缩略词和英汉对照 | 第57-58页 |
附录4 所用试剂和缓冲液的配制 | 第58-59页 |
附录5 所用培养基配方 | 第59-60页 |