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PEASC表达载体构建及其农杆菌介导的水稻遗传转化研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
1 前言第8-19页
   ·植保素研究概述第8-11页
     ·萜类植保素生物合成途径研究第9-10页
     ·倍半萜类植保素生物合成与倍半萜环化酶第10页
     ·倍半萜环化酶基因工程第10-11页
   ·水稻遗传转化方法评述第11-15页
     ·直接转化法第11-13页
     ·农杆菌介导法转化水稻第13-15页
   ·影响农杆菌介导转化水稻的重要因素第15-16页
     ·农杆菌菌株和载体类第15页
     ·Vir基因的诱导第15-16页
     ·水稻基因性及外植体培养培养条件第16页
   ·水稻基因工程研究进展第16-19页
2 材料与方法第19-34页
   ·实验材料第19-21页
     ·植物材料第19页
     ·菌株第19页
     ·质粒第19-20页
     ·主要试剂及酶类第20页
     ·主要仪器设备第20-21页
     ·培养基的配制第21页
   ·水稻高频遗传转化再生体系的建立第21-22页
     ·培养基筛选第21-22页
     ·分化培养基的优化第22页
     ·水稻继代时间与分化关系第22页
   ·植物表达载体构建第22-27页
     ·构建策略第22页
     ·载体构建第22-27页
   ·农杆菌介导的水稻遗传转化第27-28页
     ·农杆菌EHA105对羧苄青霉素的敏感性实验第27页
     ·水稻愈伤组织对潮酶素敏感性实验第27-28页
     ·农杆菌转化水稻第28页
   ·转基因植株的分子检测第28-34页
     ·抗性植株DNA分子的抽提第28-29页
     ·抗性植株基因组PCR鉴定第29-30页
     ·Southern印迹分析第30-34页
3 结果与分析第34-42页
   ·水稻高频遗传转化系统的建立第34-36页
     ·三种诱导培养基对水稻愈伤组织的影响第34页
     ·NAA与6-BA不同浓度组合对水稻愈伤分化的影响第34-35页
     ·水稻愈伤继代时间与分化的关系第35-36页
   ·植物表达载体构建第36-37页
     ·pGA1621/pBSK-PEAS质粒片段大小的鉴定第36页
     ·重组质粒片段大小鉴定第36-37页
     ·农杆菌阳性克隆PCR鉴定第37页
   ·农杆菌介导水稻遗传转化第37-39页
     ·农杆菌菌株EHA105对羧苄青霉素耐性实验第37-38页
     ·水稻愈伤组织对潮酶素的敏感性第38-39页
     ·四个水稻品种的转化频率比较第39页
   ·转基因植株分子检测第39-42页
     ·抗性植株的PCR检测第40页
     ·Southern blotting检测阳性植株第40-42页
4 讨论第42-44页
   ·关于籼稻和粳稻高效遗传转化体系的建立第42页
   ·植物表达载体的构建第42-43页
   ·农杆菌介导的遗传转化第43页
   ·影响Southern blotting的因素第43-44页
5 小结第44-45页
参考文献第45-54页
致谢第54-55页
附录1 本研究技术路线第55-56页
附录2 转基因植株生成过程图版第56-57页
附录3 英文缩略词和英汉对照第57-58页
附录4 所用试剂和缓冲液的配制第58-59页
附录5 所用培养基配方第59-60页

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