| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 本文主要缩写词 | 第11-12页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第12-25页 |
| ·农杆菌介导的植物遗传转化技术 | 第12页 |
| ·植物遗传转化中的标记基因 | 第12-21页 |
| ·标记基因 | 第12-13页 |
| ·去除选择标记基因的必要性 | 第13-15页 |
| ·去除选择标记基因的策略 | 第15-21页 |
| ·共转化系统(co-transformation system) | 第15-17页 |
| ·位点特异性重组系统(Site-specific recombination system) | 第17-18页 |
| ·转座子介导的再定位(Transposable element system) | 第18-20页 |
| ·多元自主转化载体系统(MAT-vector,multi-autotransformation) | 第20-21页 |
| ·植酸酶的分子生物学及其植物基因工程 | 第21-24页 |
| ·研究的思路 | 第24-25页 |
| Ⅱ 材料与方法 | 第25-36页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-36页 |
| ·菌种的活化及质粒的提取、纯化 | 第26-28页 |
| ·菌种的活化 | 第26页 |
| ·质粒的大量提取与纯化 | 第26-27页 |
| ·质粒的小量提取 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·质粒DNA转化大肠杆菌感受态细胞 | 第29页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳胶回收目的片段 | 第29页 |
| ·无选择标记植酸酶基因植物表达载的构建 | 第29-33页 |
| ·p1300-hyg的获取 | 第30页 |
| ·p1300P-Ubi的获取 | 第30-31页 |
| ·无选择标记植酸酶基因植物表达载体p1300UbiPHYTASE的构建 | 第31-33页 |
| ·植物表达载体p1300UbiPHYTASE导入农杆菌及其鉴定 | 第33-36页 |
| ·冻融法将p1300UbiPHYTASE导入根癌农杆菌EHA105 | 第33-34页 |
| ·农杆菌转化子的鉴定 | 第34-36页 |
| Ⅲ 结果与分析 | 第36-42页 |
| ·无选择标记植酸酶基因植物表达载体的构建 | 第36-41页 |
| ·p1300-hyg的获取 | 第36页 |
| ·p1300P-Ubi的获取 | 第36-37页 |
| ·无选择标记植酸酶基因植物表达载体p1300UbiPHYTASE的构建 | 第37-41页 |
| ·植物表达载体p1300UbiPHYTASE导入农杆菌EHA105 | 第41-42页 |
| Ⅳ 讨论 | 第42-47页 |
| ·关于无选择标记基因植物表达载体的构建 | 第42-44页 |
| ·根癌农杆菌的侵染能力及其特异性 | 第44页 |
| ·共转化系统在植物遗传转化中去除标记基因的限制性因素与展望 | 第44-45页 |
| ·剔除标记基因系统的探索 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 附件 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
