| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-37页 |
| ·昆虫滞育的研究进展 | 第9-28页 |
| ·滞育的概念 | 第9-10页 |
| ·滞育的类型 | 第10页 |
| ·滞育生态学 | 第10-12页 |
| ·环境的影响 | 第10-11页 |
| ·昆虫对外界环境的感受机理 | 第11-12页 |
| ·滞育的准备期 | 第12-13页 |
| ·滞育的调控机制 | 第13-21页 |
| ·卵滞育的调控 | 第13-16页 |
| ·主要酶的代谢 | 第13-14页 |
| ·滞育激素结构和功能的研究 | 第14-16页 |
| ·幼虫和蛹滞育的调控 | 第16-19页 |
| ·PTTH对幼虫滞育和蛹滞育的影响 | 第16-17页 |
| ·其它调控方式 | 第17-19页 |
| ·成虫滞育的调控 | 第19-20页 |
| ·母体对昆虫滞育的影响 | 第20-21页 |
| ·滞育期间昆虫基因的表达 | 第21-25页 |
| ·不受滞育影响的基因的表达 | 第21-22页 |
| ·滞育减弱型调控基因 | 第22页 |
| ·滞育增强型调控基因 | 第22-23页 |
| ·滞育期前期表达的基因 | 第23-24页 |
| ·滞育期后期表达的基因 | 第24页 |
| ·滞育期内间歇性表达的基因 | 第24-25页 |
| ·胁迫反应基因 | 第25页 |
| ·滞育的终止 | 第25-26页 |
| ·其它生物的休眠 | 第26-28页 |
| ·大肠杆菌中外源基因表达的研究进展 | 第28-37页 |
| ·外源基因中密码子的使用 | 第28-29页 |
| ·mRNA的一级与二级结构的影响 | 第29-31页 |
| ·mRNA 5’-UTR的一级结构 | 第29页 |
| ·mRNA 5’-UTR的二级结构 | 第29-30页 |
| ·mRNA 3’-UTR | 第30-31页 |
| ·表达载体的选择 | 第31-34页 |
| ·非融合表达载体 | 第31-32页 |
| ·融合表达载体 | 第32-33页 |
| ·分泌型表达载体 | 第33-34页 |
| ·带纯化标签的表达载体 | 第34页 |
| ·宿主菌的培养控制 | 第34-37页 |
| ·质粒稳定性与拷贝数的控制 | 第35页 |
| ·重组大肠杆菌培养方式 | 第35-37页 |
| ·补料分批培养 | 第35页 |
| ·连续培养 | 第35页 |
| ·透析培养 | 第35-37页 |
| 2 引言 | 第37-39页 |
| 3 材料与方法 | 第39-50页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·供试昆虫 | 第39页 |
| ·引物 | 第39页 |
| ·菌种与质粒 | 第39页 |
| ·主要试剂及工具酶 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-50页 |
| ·总RNA的提取 | 第40-41页 |
| ·RNA甲醛变性凝胶电泳 | 第41页 |
| ·RT-PCR | 第41-42页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第41-42页 |
| ·PCR扩增 | 第42页 |
| ·PCR产物的电泳检测 | 第42-43页 |
| ·PCR产物纯化 | 第43页 |
| ·PCR纯化产物的酶切及回收 | 第43-44页 |
| ·纯化产物的NdeⅠ酶切及回收 | 第43-44页 |
| ·NdeⅠ酶切产物的EcoRⅠ酶切及回收 | 第44页 |
| ·pET-30a(+)质粒DNA的提取 | 第44-45页 |
| ·pET-30a(+)质粒的酶切及回收 | 第45-46页 |
| ·pET-30a(+)质粒的NdeⅠ酶切及回收 | 第45-46页 |
| ·NdeⅠ酶切产物的EcoRⅠ酶切及回收 | 第46页 |
| ·外源片段和载体的连接 | 第46页 |
| ·重组质粒的转化 | 第46-47页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
| ·转化 | 第47页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第47-48页 |
| ·重组质粒DNA的提取 | 第47页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组质粒序列的测定 | 第48页 |
| ·重组质粒的表达与检测 | 第48-50页 |
| ·重组质粒在E. coli BL21中的诱导表达 | 第48页 |
| ·表达产物的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 | 第48-50页 |
| 4 结果与分析 | 第50-56页 |
| ·PCR产物的检测 | 第50页 |
| ·pDH重组质粒的构建 | 第50-52页 |
| ·重组克隆的酶切筛选 | 第52页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第52-54页 |
| ·pDH重组质粒在E. coli BL21中的表达 | 第54-56页 |
| 5 结论与讨论 | 第56-59页 |
| ·结论 | 第56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 英文摘要 | 第69-70页 |