欧美山杨杂种转抗虫基因的研究
1 前言 | 第1-29页 |
·研究的目的和意义 | 第8-9页 |
·植物遗传转化方法 | 第9-16页 |
·载体介导法 | 第9-12页 |
·直接转化法 | 第12-15页 |
·种质系统法 | 第15-16页 |
·植物基因工程研究进展及存在的问题 | 第16-18页 |
·植物基因工程进展 | 第16-17页 |
·植物基因工程存在的问题 | 第17-18页 |
·农杆菌介导的林木遗传转化概况 | 第18-22页 |
·林木遗传转化受体系统及方法 | 第19-21页 |
·林木遗传转化存在的问题及展望 | 第21-22页 |
·林木抗虫基因工程研究进展 | 第22-27页 |
·微生物来源的抗虫基因 | 第22-24页 |
·植物来源的抗虫基因 | 第24-26页 |
·动物来源的抗虫基因 | 第26页 |
·林木抗虫基因工程存在的问题及展望 | 第26-27页 |
·山杨遗传转化研究进展 | 第27-29页 |
2 材料与方法 | 第29-42页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·外植体来源 | 第29页 |
·菌种和质粒 | 第29页 |
·主要生化试剂 | 第29页 |
·主要仪器设备 | 第29页 |
·基本培养基 | 第29-30页 |
·常用溶液配制 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-42页 |
·菌种的活化、保存 | 第31页 |
·感受态细胞的制备及质粒DNA转化大肠杆菌 | 第31-32页 |
·大肠杆菌质粒大量提取(碱法) | 第32-33页 |
·抗生素浓度的确定 | 第33-34页 |
·工程菌悬浮液的制备及转化程序 | 第34页 |
·根癌农杆菌介导的欧美山杨杂种遗传转化 | 第34-35页 |
·转化植株GUS活性检测 | 第35-36页 |
·转化植株生根 | 第36页 |
·转化植株PCR-Southern印迹杂交 | 第36-40页 |
·转化植株Southern印迹杂交 | 第40-42页 |
3 结果与分析 | 第42-52页 |
·根癌农杆菌介导的欧美山杨杂种遗传转化 | 第42-48页 |
·卡那霉素浓度的确定 | 第42-43页 |
·头孢唑林钠浓度的确定 | 第43-45页 |
·几种脱菌方法比较 | 第45-46页 |
·共培养时间对转化率的影响 | 第46-47页 |
·不同处理对转化率的影响 | 第47-48页 |
·转化植株的检测 | 第48-52页 |
·转化植株的GUS活性检测 | 第48页 |
·转化植株生根 | 第48-49页 |
·转化植株的PCR-Southern印迹杂交 | 第49-50页 |
·转化植株Southern印迹杂交 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-60页 |
·组织培养中玻璃化苗现象及防止 | 第52-53页 |
·转化体选择的时期和方法 | 第53页 |
·农杆菌介导的遗传转化 | 第53-57页 |
·预培养与转化率的关系 | 第53-54页 |
·外植体接种与共培养 | 第54-55页 |
·脱菌抗生素的使用 | 第55页 |
·植物转化体的筛选系统 | 第55-56页 |
·其他因素对转化率的影响 | 第56-57页 |
·假转化体产生的原因 | 第57-58页 |
·问题与建议 | 第58-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
图版 | 第66-69页 |
致谢 | 第69页 |