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欧美山杨杂种转抗虫基因的研究

1 前言第1-29页
   ·研究的目的和意义第8-9页
   ·植物遗传转化方法第9-16页
     ·载体介导法第9-12页
     ·直接转化法第12-15页
     ·种质系统法第15-16页
   ·植物基因工程研究进展及存在的问题第16-18页
     ·植物基因工程进展第16-17页
     ·植物基因工程存在的问题第17-18页
   ·农杆菌介导的林木遗传转化概况第18-22页
     ·林木遗传转化受体系统及方法第19-21页
     ·林木遗传转化存在的问题及展望第21-22页
   ·林木抗虫基因工程研究进展第22-27页
     ·微生物来源的抗虫基因第22-24页
     ·植物来源的抗虫基因第24-26页
     ·动物来源的抗虫基因第26页
     ·林木抗虫基因工程存在的问题及展望第26-27页
   ·山杨遗传转化研究进展第27-29页
2 材料与方法第29-42页
   ·实验材料第29-31页
     ·外植体来源第29页
     ·菌种和质粒第29页
     ·主要生化试剂第29页
     ·主要仪器设备第29页
     ·基本培养基第29-30页
     ·常用溶液配制第30-31页
   ·实验方法第31-42页
     ·菌种的活化、保存第31页
     ·感受态细胞的制备及质粒DNA转化大肠杆菌第31-32页
     ·大肠杆菌质粒大量提取(碱法)第32-33页
     ·抗生素浓度的确定第33-34页
     ·工程菌悬浮液的制备及转化程序第34页
     ·根癌农杆菌介导的欧美山杨杂种遗传转化第34-35页
     ·转化植株GUS活性检测第35-36页
     ·转化植株生根第36页
     ·转化植株PCR-Southern印迹杂交第36-40页
     ·转化植株Southern印迹杂交第40-42页
3 结果与分析第42-52页
   ·根癌农杆菌介导的欧美山杨杂种遗传转化第42-48页
     ·卡那霉素浓度的确定第42-43页
     ·头孢唑林钠浓度的确定第43-45页
     ·几种脱菌方法比较第45-46页
     ·共培养时间对转化率的影响第46-47页
     ·不同处理对转化率的影响第47-48页
   ·转化植株的检测第48-52页
     ·转化植株的GUS活性检测第48页
     ·转化植株生根第48-49页
     ·转化植株的PCR-Southern印迹杂交第49-50页
     ·转化植株Southern印迹杂交第50-52页
4 讨论第52-60页
   ·组织培养中玻璃化苗现象及防止第52-53页
   ·转化体选择的时期和方法第53页
   ·农杆菌介导的遗传转化第53-57页
     ·预培养与转化率的关系第53-54页
     ·外植体接种与共培养第54-55页
     ·脱菌抗生素的使用第55页
     ·植物转化体的筛选系统第55-56页
     ·其他因素对转化率的影响第56-57页
   ·假转化体产生的原因第57-58页
   ·问题与建议第58-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-66页
图版第66-69页
致谢第69页

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