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柞蚕丝素基因转移载体的构建及转基因柞蚕的研究

第一章 前言第1-17页
 1 研究背景第11-12页
 2 选题的依据及目的意义第12-14页
 3 实验技术路线第14-15页
 参考文献第15-17页
第二章 文献综述第17-48页
 一 转基因昆虫技术的研究第17-31页
  1 转基因动物的研究概况第17-18页
  2 昆虫的转基因研究第18-20页
  3 昆虫的转基因技术第20-31页
 二 昆虫表达系统的应用研究第31-33页
  1 表达系统的分类及特点第31-32页
  2 昆虫载体表达系统第32-33页
 三 柞蚕丝素基因的研究概况第33-38页
  1 柞蚕简介第33-34页
  2 柞蚕丝素蛋白的合成、分泌及结构特点第34-38页
 四 转基因昆虫的研究前景及展望第38-39页
 参考文献第39-48页
第三章 柞蚕丝素基因启动子区域的克隆与分析第48-68页
 一 实验材料第48-49页
  1 柞蚕品种第48页
  2 酶和试剂第48-49页
  3 载体、菌株和细胞第49页
  4 主要实验器材第49页
 二 实验方法第49-54页
  1 柞蚕丝素基因启动子区域的分离第49-51页
  2 柞蚕丝素基因转录起始位点的确定与分析第51-52页
  3 启动子区域的结构分析第52-54页
 三 结果与分析第54-63页
  1 柞蚕丝素基因5’端同源序列的克隆第54-58页
  2 柞蚕丝素基因转录起始位点的确定及分析第58-60页
  3 启动子功能区的分析第60-63页
 四 讨论第63-66页
 五 小结第66页
 参考文献第66-68页
第四章 柞蚕丝素基因3’端片段的克隆与分析第68-78页
 一 实验材料第69页
  1 柞蚕品种第69页
  2 酶和试剂第69页
  3 载体和菌株第69页
 二 实验方法第69-71页
  1 柞蚕基因组DNA的提取第69页
  2 PCR引物的设计第69-70页
  3 柞蚕丝素基因3’端部分片段的克隆第70-71页
 三 结果与分析第71-74页
  1 PCR扩增及片段的克隆第71-72页
  2 克隆片段的碱基序列分析第72-74页
  3 克隆片段的氨基酸序列的分析第74页
 四 讨论第74-76页
 五 小结第76页
 参考文献第76-78页
第五章 柞蚕丝素基因转移载体的构建及在不同昆虫细胞中的表达研究第78-100页
 一 实验材料第79-80页
  1 酶和试剂第79-80页
  2 昆虫细胞系:第80页
  3 主要实验器材:第80页
  4 载体和菌株第80页
 二 实验方法第80-87页
  1 DNA操作方法第80-82页
  2 引物设计第82-83页
  3 载体的构建策略第83-85页
  4 细胞转染实验第85-86页
  5 细胞总RNA的提取第86页
  6 Northern blot分析第86-87页
 三 实验结果与分析第87-96页
  1 柞蚕丝素基因转移表达载体的构建第87-94页
  2 柞蚕丝素基因转移载体在不同细胞系内的表达第94-96页
 四 讨论第96-98页
 五 小结第98页
 参考文献第98-100页
第六章 利用同源重组将GFP导入柞蚕的研究第100-128页
 一 材料与方法第101-105页
  1 实验材料第101页
  2 实验方法第101-105页
 二 实验结果与分析第105-116页
  1 转基因蚕的调查第105-108页
  2 PCR检测第108-111页
  3 同源重组检测第111-113页
  4 Northern blot分析第113-114页
  5 Sourthern blot分析第114-115页
  6 荧光蛋白的检测及Western blot分析第115-116页
 三 讨论第116-123页
  1 外源基因的导入及后代分析第117-120页
  2 外源基因的同源重组及定向整合第120-121页
  3 载体构建及外源基因的表达第121-123页
 四 小结第123-124页
 参考文献第124-128页
第七章 结论与展望第128-132页
 一 主要结论第128-129页
 二 本论文的创新之处第129页
 三 有待于进一步开展的工作第129-130页
 四 展望第130-132页
附录第132-134页
博士期间已发表或即将发表的论文及专利申请情况第134-135页
致谢第135-136页
个人简历第136-137页

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