摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第7-27页 |
1 虾青素 | 第8-17页 |
·类胡萝卜素的生理功能 | 第8-9页 |
·虾青素的生理功能 | 第9-12页 |
·天然虾青素的生物安全性 | 第12页 |
·虾青素的应用 | 第12-14页 |
·虾青素的来源 | 第14-17页 |
2 雨生红球藻中虾青素的积累机制 | 第17-27页 |
·雨生红球藻的一般特征 | 第17页 |
·雨生红球藻积累虾青素的条件 | 第17-20页 |
·虾青素的积累机制 | 第20-27页 |
第二章 雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶及羟化酶基因组序列的克隆与分析 | 第27-59页 |
1 材料与方法 | 第27-35页 |
·雨生红球藻 | 第27页 |
·菌株、克隆载体、工具酶 | 第27页 |
·红球藻总DNA提取 | 第27-28页 |
·总RNA提取 | 第28-29页 |
·引物设计及合成 | 第29-30页 |
·PCR扩增获得crtW和crtZ的染色体DNA片段 | 第30-32页 |
·RT-PCR扩增获得crtW完整编码框架的cDNA片段 | 第32-33页 |
·T-A克隆及测定 | 第33-35页 |
·序列分析 | 第35页 |
2 结果与分析 | 第35-56页 |
·红球藻DNA与RNA的提取 | 第35-37页 |
·crtW cDNA及crtW和crtZ基因组DNA片段的扩增 | 第37-39页 |
·PCR产物的克隆与测定 | 第39-42页 |
·crtZ起始密码子上游基因序列的PCR扩增 | 第42-43页 |
·序列分析 | 第43-56页 |
3 讨论 | 第56-59页 |
第三章 β-胡萝卜素酮化酶及羟化酶基因5'上游侧翼序列的克隆及序列分析 | 第59-94页 |
1 材料与方法 | 第59-68页 |
·材料培养 | 第59页 |
·主要试剂 | 第59页 |
·Genome Walker工作原理 | 第59-61页 |
·DNA提取 | 第61页 |
·引物设计及合成 | 第61-62页 |
·Genome Walker ‘Libraries’的构建 | 第62-64页 |
·PCR扩增 | 第64-68页 |
2 结果与分析 | 第68-90页 |
·Genome Walker ‘Libraries’的构建 | 第68-69页 |
·crtW 5'上游侧翼序列的PCR扩增与测序 | 第69-79页 |
·crtZ 5'上游侧翼序列的PCR扩增及序列分析 | 第79-82页 |
·crtW和crtZ的5'上游侧翼序列的结构分析 | 第82-90页 |
3 讨论 | 第90-94页 |
·侧翼序列的分离技术 | 第90-91页 |
·雨生红球藻中crtW存在多拷贝的推测 | 第91页 |
·crtW与cbr调控序列的相似性 | 第91页 |
·crtW和crtZ上游侧翼序列的差异 | 第91-92页 |
·crtW上游序列中APE元件的存在 | 第92页 |
·crtZ上游序列中ABRE3-CE1元件的存在 | 第92-93页 |
·介导环境胁迫的顺式调控元件 | 第93-94页 |
第四章 雨生红球藻遗传转化体系的建立及crtW和crtZ 5'上游侧翼序列的功能验证 | 第94-111页 |
1 遗传转化选择试剂的筛选 | 第94-99页 |
·材料与方法 | 第94-95页 |
·结果与分析 | 第95-97页 |
·讨论 | 第97-99页 |
2 外源基因瞬间表达体系的建立 | 第99-104页 |
·材料与方法 | 第99-103页 |
·结果与分析 | 第103页 |
·讨论 | 第103-104页 |
3 crtW和crtZ 5'上游侧翼序列的功能验证 | 第104-111页 |
·材料与方法 | 第104-107页 |
·结果与分析 | 第107-109页 |
·讨论 | 第109-111页 |
结论 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-126页 |
致谢 | 第126-127页 |
发表及已完成文章目录 | 第127页 |