| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩写表 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-25页 |
| ·IBDV 的形态及理化特性 | 第10-11页 |
| ·IBDV 的体外培养与增殖 | 第11页 |
| ·IBDV 基因组结构 | 第11-12页 |
| ·IBDV 的蛋白 | 第12-15页 |
| ·VP1 蛋白 | 第12-13页 |
| ·VP2 蛋白 | 第13-14页 |
| ·VP3 蛋白 | 第14页 |
| ·VP4 蛋白 | 第14页 |
| ·VP5 蛋白 | 第14-15页 |
| ·IBDV 抗原变异和毒力差异的分子基础 | 第15-16页 |
| ·IBDV 抗原变异分子基础 | 第15页 |
| ·IBDV 毒力变异分子基础 | 第15-16页 |
| ·IBD 流行病学、临床症状、剖检变化和致病机理 | 第16-17页 |
| ·IBD 流行病学 | 第16页 |
| ·IBD 临床症状 | 第16页 |
| ·IBD 剖检变化 | 第16-17页 |
| ·IBD 致病机理 | 第17页 |
| ·IBDV 疫苗研制、免疫途径及免疫失败的原因 | 第17-24页 |
| ·经典疫苗 | 第17-18页 |
| ·基因工程疫苗 | 第18-22页 |
| ·免疫程序 | 第22-23页 |
| ·免疫途径 | 第23页 |
| ·免疫失败的原因 | 第23-24页 |
| ·存在问题及防制前景 | 第24页 |
| ·研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-34页 |
| ·试验材料 | 第25-27页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·试验所用药物 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·毒种 | 第26页 |
| ·部分试剂的配制 | 第26-27页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·引物 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-34页 |
| ·IBDV 的分离鉴定 | 第27-28页 |
| ·IBDV VP2 基因的克隆和序列测定 | 第28-30页 |
| ·融合表达质粒pET28a-VP2 构建 | 第30页 |
| ·IBDV VP2 蛋白的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·Western blotting 检测表达蛋白质 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌BL21/pET28a-VP2 诱导表达条件的优化 | 第32页 |
| ·攻毒保护试验 | 第32-34页 |
| 3 结果 | 第34-42页 |
| ·鸡胚接种试验 | 第34页 |
| ·动物回归试验 | 第34页 |
| ·琼脂免疫扩散试验 | 第34-35页 |
| ·VP2 基因的RT-PCR 扩增 | 第35页 |
| ·质粒pMD-VP2 的EcoR I/HindⅢ酶切鉴定 | 第35页 |
| ·pMD-VP2 序列测定结果 | 第35-37页 |
| ·核苷酸同源性比较结果 | 第36-37页 |
| ·IBDV VP2 氨基酸序列进化树分析 | 第37页 |
| ·BL21/pET28a-VP2 转化菌PCR 鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·pET28a-VP2 酶切鉴定结果 | 第38页 |
| ·IBDV VP2 蛋白表达产物的SDS-PAGE 电泳检测结果 | 第38-39页 |
| ·Western blotting 检测表达蛋白质 | 第39页 |
| ·大肠杆菌BL21/pET28a-VP2 诱导表达条件的优化 | 第39-40页 |
| ·诱导温度优化结果 | 第39页 |
| ·诱导时间优化结果 | 第39-40页 |
| ·诱导剂IPTG 浓度的优化结果 | 第40页 |
| ·攻毒保护试验结果 | 第40-42页 |
| ·抗体检测结果 | 第40-41页 |
| ·攻毒保护试验结果 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| ·IBDV 的增殖与RNA 的提取 | 第42页 |
| ·RT-PCR 的扩增 | 第42页 |
| ·VP2 蛋白的特性 | 第42-43页 |
| ·表达系统的选择 | 第43页 |
| ·影响目的蛋白表达及其活性的因素 | 第43-44页 |
| ·IBDV VP2 基因亚单位疫苗 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第50-51页 |
| 作者简历 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
