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大豆疫霉根腐病菌检测鉴定方法及病害传播途径研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-8页
1. 前言第8-23页
 1.1 大豆疫霉根腐病症状第8-9页
 1.2 病原菌及其生理分化第9-13页
  1.2.1 病原菌分类和命名第9-10页
  1.2.2 病原菌生物学特性第10-11页
  1.2.3 病原菌生理分化及致病性变异第11-13页
 1.3 品种抗病性及抗病机制第13-14页
 1.4 病害循环及病害流行第14-15页
 1.5 防治策略第15-17页
  1.5.1 利用抗、耐病品种第15页
  1.5.2 化学防治第15-16页
  1.5.3 耕作栽培措施第16页
  1.5.4 综防治措施第16-17页
 1.6 病原菌检测鉴定方法第17-21页
  1.6.1 传统检测鉴定方法第17页
  1.6.2 生物技术及其在大豆疫霉根腐病检测鉴定中的应用第17-21页
 1.7 立论依据第21-23页
  1.7.1 病原菌形态、生理及致病性测定第21页
  1.7.2 大豆疫霉菌快速检测和准确鉴定方法研究第21-22页
  1.7.3 病害传播途径研究第22页
  1.7.4 大豆疫霉菌生理小种鉴定第22-23页
2. 大豆疫霉根腐病病原菌检测及鉴定方法研究第23-44页
 2.1 大豆疫霉根腐病病原菌形态、生理及致病性鉴定第23-26页
  2.1.1 材料与方法第23-24页
   2.1.1.1 培养基第23页
   2.1.1.2 病原菌分离第23页
   2.1.1.3 诱导产生孢子囊及卵孢子第23页
   2.1.1.4 温度、淀粉、孔雀石绿对病菌生长的影响第23-24页
   2.1.1.5 致病性及寄主范围测定第24页
  2.1.2 结果与分析第24-26页
   2.1.2.1 病害症状第24页
   2.1.2.2 病原菌形态特征第24-25页
   2.1.2.3 病原菌生理特性第25页
   2.1.2.4 致病性测定第25-26页
  2.1.3 小结第26页
 2.2 大豆疫霉根腐病菌血清学研究第26-30页
  2.2.1 材料与方法第26-28页
   2.2.1.1 供试菌第26-27页
   2.2.1.2 培养基第27页
   2.2.1.3 菌丝可溶性蛋白提取第27页
   2.2.1.4 紫外吸收法测蛋白含量第27页
   2.2.1.5 制备抗血清第27页
   2.2.1.6 琼脂双扩散法第27页
   2.2.1.7 ELISA方法第27-28页
   2.2.1.8 用ELISA法检测植株体内病原菌第28页
  2.2.2 结果与分析第28-30页
   2.2.2.1 抗血清效价测定第28页
   2.2.2.2 ELISA法检测纯培养真菌第28-29页
   2.2.2.3 ELISA法检测接种发病植株体内目标病原菌第29-30页
  2.2.3 小结第30页
 2.3 大豆疫霉根腐病菌同工酶标记第30-34页
  2.3.1 材料与方法第30-33页
   2.3.1.1 菌株第30页
   2.3.1.2 酶液的提取第30-31页
   2.3.1.3 电泳分离第31页
   2.3.1.4 制胶第31页
   2.3.1.5 加样第31页
   2.3.1.6 电泳第31-32页
   2.3.1.7 剥胶第32页
   2.3.1.8 染色第32页
   2.3.1.9 计算迁移率第32-33页
  2.3.2 结果与分析第33-34页
   2.3.2.1 酯酶同工酶酶谱分析第33页
   2.3.2.2 超氧化物歧化酶同工酶酶谱分析第33页
   2.3.2.3 淀粉酶同工酶酶谱分析第33页
   2.3.2.4 过氧化氢酶同工酶酶谱分析第33-34页
  2.3.3 小结第34页
 2.4 大豆疫霉根腐病菌RAPD标记第34-44页
  2.4.1 材料与方法第34-36页
   2.4.1.1 供试材料第34页
   2.4.1.2 DNA提取第34-36页
   2.4.1.3 RAPD引物及扩增反应条件第36页
   2.4.1.4 扩增产物的电泳检测第36页
   2.4.1.5 数据处理及分析第36页
  2.4.2 结果与分析第36-41页
   2.4.2.1 RAPD引物筛选第36页
   2.4.2.2 RAPD扩增结果及聚类第36页
   2.4.2.3 P.sojae种内多态性分析第36-37页
   2.4.2.4 疫霉属种间多态性分析第37-41页
  2.4.3 小结第41-44页
3. 大豆疫霉病菌致病性分化研究第44-47页
 3.1 材料与方法第44-45页
  3.1.1 供试菌种第44页
  3.1.2 鉴别寄主第44页
  3.1.3 鉴别方法第44-45页
 3.2 结果与分析第45-46页
  3.2.1 15株P.sojae生理小种鉴定结果第45页
  3.2.2 P.sojae致病性变异第45-46页
 3.3 小结第46-47页
4. 大豆疫霉根腐病传播途径研究第47-52页
 4.1 材料与方法第47-48页
  4.1.1 土壤传病试验第47页
   4.1.1.1 自然发病田带菌土壤传病试验第47页
   4.1.1.2 土壤人工接种诱发病害第47页
  4.1.2 病残体传病试验第47页
  4.1.3 种子传病试验第47-48页
   4.1.3.1 自然发病田种子传病试验第48页
   4.1.3.2 人工接种诱发种子带菌的条件及其所获得种子传病试验第48页
 4.2 结果与分析第48-51页
  4.2.1 带菌土壤传病试验第48-49页
  4.2.2 病残体传病试验第49页
  4.2.3 人工接种诱发种子带菌的条件第49-51页
   4.2.3.1 喷雾接种第49-50页
   4.2.3.2 菌丝块接种第50页
   4.2.3.3 接种发病植株病残体收集及观察第50页
   4.2.3.4 “带菌种子”传病试验第50-51页
 4.3 小结第51-52页
5. 结论第52-54页
6. 讨论第54-59页
 6.1 关于中国大豆疫霉根腐病的来源第54-55页
 6.2 关于大豆疫霉根腐病传播途径及发病规律第55页
 6.3 关于Ps生理小种鉴别方法第55-56页
 6.4 关于中国的Ps生理小种鉴别第56页
 6.5 关于血清学技术、同工酶技术和核酸技术在Ps检测鉴定中的应用第56-57页
 6.6 关于Ps致病性变异第57-59页
附图第59-67页
参考文献第67-74页
致谢第74页

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