| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 一、前言 | 第13-24页 |
| 1. 大黄鱼简介 | 第13页 |
| 2. 半胱氨酸蛋白酶 | 第13-14页 |
| 3. Cystatins | 第14-21页 |
| 4. 鱼类免疫器官 | 第21-22页 |
| 5. 免疫电镜胶体金标记 | 第22-24页 |
| 二、材料与方法 | 第24-42页 |
| ·材料 | 第24-31页 |
| ·实验方法 | 第31-42页 |
| 三、结果与分析 | 第42-71页 |
| ·大黄鱼cystatin(Lyccys)克隆、表达与功能分析 | 第42-56页 |
| ·Lyccys全长基因分析 | 第42-46页 |
| ·大黄鱼cystatin基因组结构分析 | 第46页 |
| ·Lyccys在大黄鱼各个组织中的转录水平分析 | 第46-47页 |
| ·在免疫刺激下肾、脾和血中Lyccys基因的转录水平分析 | 第47-49页 |
| ·大黄鱼免疫相关基因TNF-α和IL-10的克隆 | 第49-51页 |
| ·pGEX-4T-2-Lyccys原核表达载体的构建 | 第51页 |
| ·Lyccys-GST融合蛋白(rLyccys(GST))的表达与纯化及对木瓜蛋白酶抑制活力测定 | 第51-53页 |
| ·rLyccys(GST)对大黄鱼TNF-α2和IL-10基因表达水平的调节 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-56页 |
| ·Lycstefin克隆、表达与功能分析 | 第56-64页 |
| ·大黄鱼stefin(Lycstefin)全长基因分析 | 第56-58页 |
| ·大黄鱼stefin基因的基因组序列分析 | 第58页 |
| ·Lycstefin在大黄鱼各个组织中的转录水平分析 | 第58-59页 |
| ·在免疫刺激下肾、脾和血中Lycstefin基因的转录水平分析 | 第59-60页 |
| ·pGEX-4T-2-Lycstefin原核表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·rLycstefin(GST)融合蛋白的表达、纯化和对木瓜蛋白酶抑制活性测定 | 第61-62页 |
| ·rLycstefin(GST)对大黄鱼TNF-α2和IL-10的转录水平调节 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| ·Lycstefin和Lyccys的亚细胞定位 | 第64-71页 |
| ·抗体制备 | 第64页 |
| ·胶体金免疫标记 | 第64-69页 |
| ·小结 | 第69-71页 |
| 四、讨论、问题与展望 | 第71-75页 |
| 参考文献 | 第75-86页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第86页 |
| 参与的科研项目 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
