| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 前言 | 第11-26页 |
| 一、经典Wnt信号通路与β-catenin蛋白 | 第11-15页 |
| 二、PYGO蛋白 | 第15-20页 |
| 1.PYGO与肿瘤 | 第17页 |
| 2.PYGO作为转录激活协同因子 | 第17-20页 |
| ·NHD结构域 | 第18-19页 |
| ·PHD结构域 | 第19-20页 |
| 三、串联亲和纯化 | 第20-25页 |
| 1.标签的选择 | 第21-22页 |
| 2.主要步骤 | 第22-23页 |
| 3.改进策略 | 第23-25页 |
| 4.优点和不足 | 第25页 |
| 四、研究目的 | 第25-26页 |
| 材料与方法 | 第26-42页 |
| 一、材料 | 第26-28页 |
| 1.主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.主要试剂来源 | 第26-27页 |
| 3.主要生物材料 | 第27-28页 |
| 二、方法 | 第28-42页 |
| 1.主要试剂配制 | 第28-33页 |
| 2.实验方法 | 第33-42页 |
| ·细胞培养 | 第33页 |
| ·RNA提取 | 第33页 |
| ·反转录 | 第33-34页 |
| ·构建载体 | 第34-37页 |
| ·磷酸钙转染 | 第37-38页 |
| ·Western杂交 | 第38-39页 |
| ·串联亲和纯化 | 第39-40页 |
| ·蛋白胶染色 | 第40-41页 |
| ·免疫共沉淀 | 第41页 |
| ·荧光素酶报告基因活性测定 | 第41-42页 |
| 结果与分析 | 第42-52页 |
| 一、hPYGO2真核表达载体的构建 | 第42-44页 |
| 二、hPYGO2稳定转染克隆的筛选及鉴定 | 第44-46页 |
| 三、串联亲和纯化法筛选hPYGO2相互作用蛋白 | 第46-48页 |
| 四、hPYGO2~(NHD)与MED12蛋白相互作用的验证 | 第48-49页 |
| 五、MED12对hPYGO2转录激活活性的影响 | 第49-52页 |
| 讨论 | 第52-55页 |
| 一、PYGO蛋白的功能 | 第52页 |
| 二、PYGO的NHD和PHD结构域与转录调控 | 第52-55页 |
| 结论与展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 附录 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67页 |