| 第一篇 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第二篇 | 第6-12页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一篇 基于生物信息学的48 个基因家族的系统发生分析揭示盲鳗、七鳃鳗和有颌类进化联系 | 第12-30页 |
| 第一章 基因与基因组进化研究中的生物信息学 | 第12-16页 |
| ·生物信息学概述 | 第12-13页 |
| ·基因家族进化研究中的若干概念简述 | 第13-16页 |
| ·基因家族与蛋白质家族 | 第13-14页 |
| ·基因家族 | 第13页 |
| ·蛋白质家族 | 第13-14页 |
| ·系统发生分析与系统发生树 | 第14-15页 |
| ·基因或蛋白家族分析方法和步骤 | 第15页 |
| ·基因家族进化研究中存在的问题 | 第15-16页 |
| 第二章 盲鳗，七鳃鳗，有颌类进化关系的研究进展 | 第16-20页 |
| ·传统的圆口纲分类及我国的主要种类 | 第16页 |
| ·最古老脊椎动物的活化石 | 第16-17页 |
| ·进化关系的研究进展 | 第17-20页 |
| 第三章 48 个基因家族的系统发生分析及其探讨盲鳗、七鳃鳗和有颌类的进化联系 | 第20-28页 |
| ·数据的获得 | 第20页 |
| ·下载数据 | 第20页 |
| ·可用序列的检测 | 第20页 |
| ·分析方法 | 第20-21页 |
| ·序列串联 | 第20-21页 |
| ·构建系统发生树 | 第21页 |
| ·选用不同的外群建树 | 第21页 |
| ·结果 | 第21-25页 |
| ·系统发生树阐明进化关系 | 第21-22页 |
| ·串联序列构建的系统树 | 第22-25页 |
| ·讨论 | 第25-28页 |
| ·圆口纲理论的争议 | 第25-26页 |
| ·外群选择对系统进化树的影响 | 第26-27页 |
| ·软件算法对系统进化树的影响 | 第27-28页 |
| 第四章 全文总结 | 第28-30页 |
| 第二篇 重组日本七鳃鳗口腔腺分泌L251 蛋白表达纯化及活性鉴定 | 第30-57页 |
| 第一章 文献综述 | 第30-34页 |
| ·CRD 蛋白及其CRISP 家族 | 第30-31页 |
| ·CRISP 家族概述 | 第30页 |
| ·CRD 蛋白及其生化特性 | 第30-31页 |
| ·T 淋巴细胞与自身免疫性疾病 | 第31-34页 |
| ·T 淋巴细胞 | 第31-32页 |
| ·自身免疫性疾病 | 第32-34页 |
| 第二章 L251 蛋白的表达及纯化 | 第34-42页 |
| ·材料和方法 | 第34-39页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·功能基因的EST 搜索 | 第35页 |
| ·总RNA 的提取 | 第35页 |
| ·调取目的基因并构建至质粒表达载体 | 第35-36页 |
| ·将获取目的cDNA 的pET23b 载体转化入表达菌Rosetta 后进行阳性转化子的筛选鉴定； | 第36-37页 |
| ·对阳性重组子进行终浓度为1mmol/L 的IPTG 诱导表达 | 第37页 |
| ·采用 SDS-PAGE 法对可溶性蛋白进行分析 | 第37-38页 |
| ·对表达的重组蛋白进行变性条件下的组氨酸亲和层析纯化 | 第38-39页 |
| ·L251 蛋白的复性 | 第39页 |
| ·蛋白含量测定 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-41页 |
| ·L251 的重组表达及纯化 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 T 淋巴细胞的分选 | 第42-45页 |
| ·材料和方法 | 第42-44页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·MNC 准备 | 第43页 |
| ·预洗磁珠 | 第43页 |
| ·从MNC 中分选T 细胞 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 第四章 MTT 法检测T 淋巴细胞增殖抑制 | 第45-47页 |
| ·材料和方法 | 第45-46页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47页 |
| 第五章 细胞周期法检测T 淋巴细胞增殖抑制 | 第47-52页 |
| ·材料和方法 | 第47-48页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-48页 |
| ·结果 | 第48-52页 |
| ·讨论 | 第52页 |
| 第六章 CFSE 法检测T 淋巴细胞增殖抑制 | 第52-56页 |
| ·材料和方法 | 第52-53页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 第七章 全文总结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 | 第65-79页 |
| 附录Ⅰ. 48 个蛋白及选择物种 | 第65-74页 |
| 附录Ⅱ | 第74-76页 |
| 附录Ⅲ. pET23b 质粒图谱 | 第76-77页 |
| 附录Ⅳ：SDS-PAGE 所需试剂 | 第77页 |
| 附录Ⅴ：亲和层析纯化所需试剂 | 第77-79页 |
| 发表论文 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
