| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| ·IFNβ-HSA 融合蛋白简介 | 第9-12页 |
| ·IFNβ | 第9-11页 |
| ·IFNβ-HSA 融合蛋白 | 第11-12页 |
| ·蛋白多肽药物的检测分析方法 | 第12-14页 |
| ·蛋白质和多肽类药物研究现状及特点 | 第12-13页 |
| ·蛋白质多肽药物检测分析方法 | 第13页 |
| ·药物浓度检测分析方法评价标准 | 第13-14页 |
| ·酶联免疫分析方法 | 第14-17页 |
| ·基本原理 | 第14-15页 |
| ·基本类型 | 第15-17页 |
| ·课题思路 | 第17页 |
| ·立题背景及研究内容 | 第17-19页 |
| ·立题背景和目的 | 第17-18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 IFNβ-HSA融合蛋白的制备 | 第19-24页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·仪器 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-21页 |
| ·工程菌株的发酵培养与诱导表达 | 第20页 |
| ·IFNβ-HSA 融合蛋白的分离纯化 | 第20页 |
| ·纯化后样品的鉴定和电泳分析 | 第20-21页 |
| ·纯化后样品中蛋白质定量分析 | 第21页 |
| ·结果 | 第21-23页 |
| ·镍柱纯化分离图谱 | 第21页 |
| ·纯化后蛋白样品鉴定与纯度分析 | 第21-22页 |
| ·标准参考品中IFNβ-HSA 融合蛋白定量分析 | 第22-23页 |
| ·讨论 | 第23页 |
| ·本章小结 | 第23-24页 |
| 第三章 IFNβ-HSA融合蛋白双抗体夹心ELISA 检测方法的建立 | 第24-38页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·主要材料与试剂 | 第25页 |
| ·缓冲液 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-29页 |
| ·双抗夹心法ELISA 基本操作步骤 | 第25-26页 |
| ·显色底物的选择和优化 | 第26页 |
| ·固相载体的选择 | 第26-27页 |
| ·酶标板条的处理 | 第27页 |
| ·包被抗体和酶标抗体的配对实验 | 第27页 |
| ·包被条件的优化 | 第27-28页 |
| ·封闭条件的优化 | 第28页 |
| ·洗板条件对测定的影响 | 第28页 |
| ·样品稀释缓冲液的选择 | 第28页 |
| ·包被抗体和酶标抗体工作浓度的选择 | 第28-29页 |
| ·双抗夹心ELISA 标准曲线的制作 | 第29页 |
| ·实验结果 | 第29-35页 |
| ·显色底物的选择和优化 | 第29页 |
| ·固相载体的选择 | 第29页 |
| ·酶标板的处理 | 第29-30页 |
| ·包被抗体和酶标抗体的配对实验 | 第30页 |
| ·包被条件的优化 | 第30-32页 |
| ·封闭条件的优化 | 第32页 |
| ·洗板条件对测定的影响 | 第32页 |
| ·样品稀释缓冲液的选择 | 第32页 |
| ·包被抗体和酶标抗体工作浓度的选择 | 第32-33页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| ·双抗体夹心ELISA 反应模式的选择 | 第35-36页 |
| ·最适工作浓度的选择 | 第36页 |
| ·反应条件的优化 | 第36页 |
| ·标准曲线的数学模型和拟合方式[45] | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第四章 IFNβ-HSA融合蛋白双抗体夹心ELISA 分析方法的考核 | 第38-45页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·主要材料与试剂 | 第38页 |
| ·缓冲液 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-40页 |
| ·灵敏度 | 第39页 |
| ·精密度 | 第39页 |
| ·稳定性 | 第39-40页 |
| ·特异性 | 第40页 |
| ·回收率 | 第40页 |
| ·健全性分析 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-43页 |
| ·灵敏度 | 第40页 |
| ·精密度 | 第40-41页 |
| ·稳定性 | 第41-43页 |
| ·特异性 | 第43页 |
| ·回收率 | 第43页 |
| ·健全性分析 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第五章 结论与展望 | 第45-47页 |
| ·结论 | 第45页 |
| ·展望 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录:英文缩略词 | 第52-53页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |