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Pseudomonas putida S1海藻糖合成酶基因在大肠杆菌中的表达及其条件研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-16页
   ·海藻糖的理化性质第8-9页
   ·海藻糖的生物学功能第9-10页
     ·“水替代”假说第9页
     ·“玻璃态”假说第9-10页
     ·“优先排阻”假说第10页
   ·海藻糖的代谢途径以及有关酶的性质第10-11页
     ·OstA-OstB 途径第10页
     ·TreY-TreZ 途径第10-11页
     ·TreS 途径第11页
     ·其它途径第11页
   ·海藻糖的应用第11-13页
     ·在食品和保健品方面第12页
     ·医药方面第12页
     ·化妆品方面第12-13页
     ·农业领域的应用第13页
   ·国内外海藻糖生产研究进展第13-14页
   ·立题背景和意义第14-15页
   ·课题研究内容第15-16页
第二章 海藻糖合成酶编码基因TRES 的克隆与表达第16-23页
   ·材料与方法第16-19页
     ·菌株、质粒及培养基第16页
     ·酶、化学试剂及缓冲液第16-17页
     ·主要仪器和材料第17页
     ·方法第17-19页
   ·结果与讨论第19-22页
     ·重组质粒pQE-TS2 的构建,筛选和鉴定第19-21页
     ·重组菌(M15/ pQE-TS2)的构建和表达产物的SDS-PAGE 分析第21-22页
     ·质粒pQE-TS2 的稳定性第22页
   ·本章小结第22-23页
第三章 重组E.COLI M15(PQE-TS2)的培养与表达第23-35页
   ·材料与方法第23-25页
     ·菌种第23页
     ·培养基第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·方法第24-25页
   ·结果与讨论第25-34页
     ·重组菌的摇瓶生长曲线第25页
     ·诱导条件对重组海藻糖合成酶表达水平的影响第25-28页
     ·培养基组分对重组菌生长的影响第28-32页
     ·5L 台式发酵罐中重组菌培养的初步研究第32-34页
   ·本章小结第34-35页
第四章 重组海藻糖合成酶转化条件的研究第35-43页
   ·材料与方法第35-36页
     ·菌种第35页
     ·培养基第35页
     ·试剂第35页
     ·主要仪器第35页
     ·方法第35-36页
   ·结果和讨论第36-42页
     ·酶的保存稳定性第36-37页
     ·酶反应最适温度及热稳定性第37页
     ·酶反应最适pH 及pH 稳定性第37-38页
     ·温度对酶反应转化率的影响第38-39页
     ·底物浓度对酶反应转化率的影响第39-40页
     ·加酶量对酶反应转化率的影响第40页
     ·正交实验优化第40-41页
     ·酶反应产物的TLC 检测第41-42页
   ·本章小结第42-43页
第五章 结论与展望第43-45页
   ·主要结论第43页
   ·课题展望第43-45页
致谢第45-46页
参考文献第46-50页
作者在攻读硕士学位期间发表的论文第50页

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