英文缩写符号及中英文对照表 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
1 引言 | 第14-26页 |
·DGK 的信号转导作用 | 第14-22页 |
·DGK 家族 | 第15-18页 |
·PLD 家族 | 第18-19页 |
·PLD 和DGK 产生不同的PA | 第19-21页 |
·DGK 活性 | 第21页 |
·PLC-DGK 与PLD 途径的交互作用及特异性 | 第21-22页 |
·植物中DGK 的分子和生理学效应 | 第22-24页 |
·伤胁迫后的AtDGK2 | 第22页 |
·冷害和冻害条件下的DGK | 第22-23页 |
·外界激发子激活PLC-DGK 途径 | 第23页 |
·cf-4/Avr4 病毒引起的分子效应 | 第23页 |
·结瘤因子引起的分子效应 | 第23-24页 |
·本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
2 材料与方法 | 第26-45页 |
·试验材料与处理 | 第26-27页 |
·植物材料 | 第26页 |
·酶和试剂 | 第26页 |
·菌株与质粒 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-45页 |
·提取RNA 的材料收集 | 第27页 |
·提取拟南芥总RNA | 第27页 |
·提取总RNA 后,去除基因组DNA | 第27-28页 |
·电泳检测RNA 是否降解步骤 | 第28页 |
·RNA 反转录 | 第28-29页 |
·拟南芥AtDGK7 基因的克隆及测序 | 第29-34页 |
·PCR 扩增 | 第29-31页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
·连接 | 第31-32页 |
·转化及克隆筛选 | 第32页 |
·碱法小量提取质粒DNA | 第32-33页 |
·酶切鉴定 | 第33-34页 |
·表达载体的构建 | 第34-37页 |
·碱法大量提取质粒DNA | 第34-36页 |
·载体构建 | 第36-37页 |
·根癌农杆菌LBA4404 和GV3101 感受态细胞的制备及转化 | 第37-40页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第37页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第37-38页 |
·利用农杆菌介导转化拟南芥 | 第38-40页 |
·转基因拟南芥植株的PCR 检测 | 第40-42页 |
·SDS 小量法提取基因组 | 第40-41页 |
·转基因拟南芥的种植培养 | 第41页 |
·转基因植株的PCR 筛选 | 第41-42页 |
·转基因拟南芥半定量RT-PCR 检测 | 第42页 |
·半定量 RT-PCR 检测拟南芥中 P5CS1、P5CS2 和 RD29A 的表达 | 第42-43页 |
·萌发试验 | 第43页 |
·转基因拟南芥与野生型拟南芥在不同培养基上的根的伸长 | 第43页 |
·生理指标的测定 | 第43-45页 |
·脯氨酸含量的测定 | 第43-44页 |
·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第44页 |
·SOD 活性的测定 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-62页 |
·表达载体 pBI121 的构建 | 第45-48页 |
·扩增AtDGK7 基因 | 第45页 |
·克隆到pMD18-T 载体及酶切鉴定 | 第45-46页 |
·构建植物表达载体 pBI121 及酶切鉴定 | 第46-48页 |
·转基因植株的筛选及鉴定 | 第48-51页 |
·硫酸卡那霉素抗性初筛 | 第48-49页 |
·转基因拟南芥基因组水平鉴定 | 第49-50页 |
·转基因拟南芥转录水平鉴定 | 第50-51页 |
·转基因拟南芥与野生型拟南芥在不同处理下萌发率与生长情况统计 | 第51-54页 |
·转基因拟南芥与野生型拟南芥根系生长情况的比较 | 第51-52页 |
·转基因拟南芥与野生型拟南芥在ABA 培养基上的萌发率 | 第52-54页 |
·盐胁迫处理条件下转基因拟南芥与野生型拟南芥生长情况比较 | 第54页 |
·逆境胁迫相关基因表达模式的比较 | 第54-57页 |
·胁迫相关基因的表达分析 | 第54-56页 |
·水分胁迫相关基因的表达分析 | 第56页 |
·ABA 相关基因的表达分析 | 第56-57页 |
·转基因植株与野生型植株对低温胁迫的响应 | 第57-60页 |
·低温条件下拟南芥生长情况比较 | 第57-58页 |
·脯氨酸含量的变化 | 第58-59页 |
·丙二醛含量和SOD 活性的变化 | 第59-60页 |
·过表达 AtDGK7 转基因拟南芥的早花现象 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读硕士学位期间完成的论文 | 第75页 |