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荣昌猪白细胞介素-2受体α基因克隆、原核表达及生物活性初探

中文摘要第1-6页
Abstract第6-9页
目录第9-13页
第一章 文献综述第13-22页
   ·IL-2第13-14页
   ·IL-2R第14-17页
     ·IL-2R的分子特性第14页
     ·IL-2R的信号传导途径第14-16页
     ·IL-2R的生物活性调节的受体第16-17页
   ·IL-2R α第17-18页
     ·IL-2R α的分子结构第17页
     ·IL-2R α形成的受体形式第17-18页
     ·IL-2R α的表位第18页
   ·IL-2R α对IL-2的研究第18页
   ·IL-2R α的生理功能第18-19页
   ·IL-2R α有关疾病的研究及应用前景第19-21页
     ·IL-2R α在抗排斥方面的研究及应用第19-20页
     ·IL-2R α在肿瘤方面的研究及应用第20页
     ·IL-2R α其他研究及应用第20-21页
   ·结语第21-22页
第二章 荣昌猪IL-2Rα基因的克隆第22-35页
   ·材料第22-25页
     ·试验动物第22页
     ·菌株和质粒第22页
     ·试剂第22页
     ·溶液配制第22-24页
     ·主要仪器设备第24-25页
   ·方法第25-30页
     ·荣昌猪外周血淋巴细胞的分离与培养第25页
     ·荣昌猪淋巴细胞总RNA的抽提第25-26页
     ·RT-PCR扩增荣昌猪IL-2R α基因第26页
     ·荣昌猪IL-2R α基因克隆与测序第26-28页
     ·重组质粒的鉴定第28-29页
     ·荣昌猪IL-2R α基因生物信息学分析第29-30页
   ·结果第30-34页
     ·荣昌猪IL-2R α基因的RT—PCR扩增第30页
     ·荣昌猪IL-2R α基因的重组质粒的酶切鉴定第30-31页
     ·荣昌猪IL-2R α基因重组质粒的序列测定第31-32页
     ·荣昌猪IL-2R α基因的进化树分析第32-33页
     ·荣昌猪IL-2R α的氨基酸序列第33-34页
   ·讨论第34-35页
第三章 荣昌猪IL-2R α成熟蛋白的原核表达第35-48页
   ·材料第35-38页
     ·菌株、载体和实验动物第35页
     ·主要试剂第35页
     ·溶液的配制第35-38页
   ·方法第38-42页
     ·荣昌猪IL-2R α的成熟蛋白基因的扩增第38页
     ·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白基因重组表达质粒的构建第38-39页
     ·pET-mpIL-2R α转化表达菌BL21第39页
     ·pET-mpIL-2R α的表达第39-40页
     ·重组菌的转录检测第40页
     ·诱导时间的优化第40页
     ·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白的可溶性检测第40页
     ·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白的Western-blot鉴定第40-41页
     ·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白活性检测第41-42页
   ·结果第42-45页
     ·pET-mpIL-2R α阳性质粒的鉴定第42-43页
     ·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白的原核表达第43页
     ·重组菌的转录检测第43-44页
     ·目的蛋白表达量的分析第44页
     ·表达条件的优化第44页
     ·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白Western-blot分析第44-45页
   ·讨论第45-48页
     ·信号肽第45-46页
     ·原核表达载体的选择第46页
     ·表达条件的优化第46-48页
第四章 荣昌猪IL-2Rα生物活性初探第48-55页
   ·材料第48-49页
     ·实验动物第48页
     ·菌株和质粒第48页
     ·试剂第48页
     ·溶液配制第48-49页
   ·方法第49-52页
     ·pcDNA-mpIL-2Rα的构建第49-50页
     ·pcDNA-mpIL-2Rα的鉴定第50页
     ·重组阳性质粒的大量抽提第50-51页
     ·质粒的纯化第51-52页
     ·小白鼠实验第52页
     ·淋巴细胞的预处理及T细胞亚群的测定第52页
   ·结果第52-53页
     ·荣昌猪pcDNA-mpIL-2Rα的基因重组质粒分析第52-53页
     ·动物实验测定的CD~(3+)、CD~(8+)、CD~(4+)结果分析第53页
   ·讨论第53-55页
     ·核酸疫苗第53-54页
     ·T淋巴细胞亚类第54-55页
结论第55-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-62页
附录第62-65页
攻读学位期间发表的论文第65页

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