中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
目录 | 第9-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
·IL-2 | 第13-14页 |
·IL-2R | 第14-17页 |
·IL-2R的分子特性 | 第14页 |
·IL-2R的信号传导途径 | 第14-16页 |
·IL-2R的生物活性调节的受体 | 第16-17页 |
·IL-2R α | 第17-18页 |
·IL-2R α的分子结构 | 第17页 |
·IL-2R α形成的受体形式 | 第17-18页 |
·IL-2R α的表位 | 第18页 |
·IL-2R α对IL-2的研究 | 第18页 |
·IL-2R α的生理功能 | 第18-19页 |
·IL-2R α有关疾病的研究及应用前景 | 第19-21页 |
·IL-2R α在抗排斥方面的研究及应用 | 第19-20页 |
·IL-2R α在肿瘤方面的研究及应用 | 第20页 |
·IL-2R α其他研究及应用 | 第20-21页 |
·结语 | 第21-22页 |
第二章 荣昌猪IL-2Rα基因的克隆 | 第22-35页 |
·材料 | 第22-25页 |
·试验动物 | 第22页 |
·菌株和质粒 | 第22页 |
·试剂 | 第22页 |
·溶液配制 | 第22-24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-30页 |
·荣昌猪外周血淋巴细胞的分离与培养 | 第25页 |
·荣昌猪淋巴细胞总RNA的抽提 | 第25-26页 |
·RT-PCR扩增荣昌猪IL-2R α基因 | 第26页 |
·荣昌猪IL-2R α基因克隆与测序 | 第26-28页 |
·重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
·荣昌猪IL-2R α基因生物信息学分析 | 第29-30页 |
·结果 | 第30-34页 |
·荣昌猪IL-2R α基因的RT—PCR扩增 | 第30页 |
·荣昌猪IL-2R α基因的重组质粒的酶切鉴定 | 第30-31页 |
·荣昌猪IL-2R α基因重组质粒的序列测定 | 第31-32页 |
·荣昌猪IL-2R α基因的进化树分析 | 第32-33页 |
·荣昌猪IL-2R α的氨基酸序列 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
第三章 荣昌猪IL-2R α成熟蛋白的原核表达 | 第35-48页 |
·材料 | 第35-38页 |
·菌株、载体和实验动物 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·溶液的配制 | 第35-38页 |
·方法 | 第38-42页 |
·荣昌猪IL-2R α的成熟蛋白基因的扩增 | 第38页 |
·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白基因重组表达质粒的构建 | 第38-39页 |
·pET-mpIL-2R α转化表达菌BL21 | 第39页 |
·pET-mpIL-2R α的表达 | 第39-40页 |
·重组菌的转录检测 | 第40页 |
·诱导时间的优化 | 第40页 |
·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白的可溶性检测 | 第40页 |
·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白的Western-blot鉴定 | 第40-41页 |
·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白活性检测 | 第41-42页 |
·结果 | 第42-45页 |
·pET-mpIL-2R α阳性质粒的鉴定 | 第42-43页 |
·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白的原核表达 | 第43页 |
·重组菌的转录检测 | 第43-44页 |
·目的蛋白表达量的分析 | 第44页 |
·表达条件的优化 | 第44页 |
·荣昌猪IL-2R α成熟蛋白Western-blot分析 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-48页 |
·信号肽 | 第45-46页 |
·原核表达载体的选择 | 第46页 |
·表达条件的优化 | 第46-48页 |
第四章 荣昌猪IL-2Rα生物活性初探 | 第48-55页 |
·材料 | 第48-49页 |
·实验动物 | 第48页 |
·菌株和质粒 | 第48页 |
·试剂 | 第48页 |
·溶液配制 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-52页 |
·pcDNA-mpIL-2Rα的构建 | 第49-50页 |
·pcDNA-mpIL-2Rα的鉴定 | 第50页 |
·重组阳性质粒的大量抽提 | 第50-51页 |
·质粒的纯化 | 第51-52页 |
·小白鼠实验 | 第52页 |
·淋巴细胞的预处理及T细胞亚群的测定 | 第52页 |
·结果 | 第52-53页 |
·荣昌猪pcDNA-mpIL-2Rα的基因重组质粒分析 | 第52-53页 |
·动物实验测定的CD~(3+)、CD~(8+)、CD~(4+)结果分析 | 第53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
·核酸疫苗 | 第53-54页 |
·T淋巴细胞亚类 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录 | 第62-65页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第65页 |