摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1 神经酸的研究进展 | 第12-15页 |
·神经酸功能研究进展 | 第12-13页 |
·植物体内C24:1的生物合成途径 | 第13-15页 |
·质体内饱和脂肪酸从头合成途径 | 第13-14页 |
·质体外VLCFAs的延长途径 | 第14-15页 |
2 KCS基因的研究进展 | 第15-22页 |
·拟南芥KCS基因家族的研究进展 | 第15-20页 |
·拟南芥KCS基因家族的发现 | 第15-16页 |
·拟南芥KCS基因家族的分类 | 第16-17页 |
·拟南芥KCS基因家族成员的结构及酶活性 | 第17-18页 |
·拟南芥KCS基因的表达情况 | 第18-20页 |
·KCS基因转化植物的研究 | 第20页 |
·芸薹属植物中KCS酶研究 | 第20-22页 |
3 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 CarKCS和ThlKCS基因的克隆与表达载体的构建 | 第23-48页 |
1 材料与方法 | 第23-32页 |
·材料 | 第23-24页 |
·品种 | 第23页 |
·菌株 | 第23页 |
·质粒载体 | 第23页 |
·分子生物学试剂 | 第23页 |
·仪器设备 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-32页 |
·碎米荠和遏蓝菜DNA的提取 | 第24-25页 |
·设计特异性引物 | 第25页 |
·PCR扩增 | 第25-26页 |
·PCR产物回收 | 第26-27页 |
·目的片段连接到T载体及热激法转化大肠杆菌 | 第27页 |
·质粒的提取、PCR检测及酶切验证 | 第27-28页 |
·菌种保存及送测序 | 第28页 |
·目的片段序列的生物信息学分析 | 第28-29页 |
·表达载体的构建 | 第29-30页 |
·工程菌的转化 | 第30-32页 |
·PCR检测引物的设计 | 第32页 |
2 结果与分析 | 第32-48页 |
·CarKCS基因的PCR扩增 | 第32-33页 |
·CarKCS基因的菌落PCR及质粒酶切验证结果 | 第33页 |
·ThlKCS基因片段克隆与菌落PCR结果 | 第33-34页 |
·CarKCS基因测序结果的同源性比对分析 | 第34-37页 |
·ThlKCS基因测序结果的同源性比对分析 | 第37-40页 |
·CarKCS和ThlKCS蛋白结构分析 | 第40-44页 |
·CarKCS的生物信息学及氨基酸序列分析 | 第40-41页 |
·ThlKCS的生物信息学及氨基酸序列分析 | 第41页 |
·CarKCS和ThlKCS蛋白酶活性位点的分析 | 第41-42页 |
·CarKCS和ThlKCS蛋白质理化性质及高级结构分析 | 第42-44页 |
·系统进化树分析 | 第44-45页 |
·CarKCS基因表达载体的构建及酶切验证 | 第45页 |
·ThlKCS基因表达载体的构建及菌落PCR检测 | 第45-46页 |
·表达载体转化根癌农杆菌的质粒PCR检测结果 | 第46-48页 |
第三章 高芥酸油菜GX-29的遗传转化及转化子的筛选 | 第48-56页 |
1 材料与方法 | 第48-53页 |
·材料 | 第48-51页 |
·供试品种 | 第48页 |
·菌株与载体 | 第48页 |
·仪器设备 | 第48页 |
·培养基 | 第48-51页 |
·方法 | 第51-53页 |
·PPT使用浓度的确定 | 第51页 |
·甘蓝型油菜的遗传转化 | 第51-52页 |
·转化子筛选 | 第52-53页 |
2 结果与分析 | 第53-56页 |
·抗性苗的PCR检测 | 第53-54页 |
·转化pNapin-CarKCS的油菜抗性苗的PCR检测 | 第53-54页 |
·转化pNapin-ThlKCS的油菜抗性苗的PCR检测 | 第54页 |
·根癌农杆菌LBA4404介异转化高芥酸油菜GX-29的转化效率 | 第54-55页 |
·油菜遗传转化的各个阶段 | 第55-56页 |
第四章 拟南芥的遗传转化及转化子筛选 | 第56-61页 |
1 材料与方法 | 第56-59页 |
·材料 | 第56-57页 |
·供试品种、菌株与载体 | 第56页 |
·药品与试剂 | 第56页 |
·仪器设备 | 第56-57页 |
·方法 | 第57-59页 |
·拟南芥的种植 | 第57页 |
·拟南芥的浸花转化 | 第57-58页 |
·转化子的筛选 | 第58-59页 |
2 结果与分析 | 第59-61页 |
·转化子的PPT筛选 | 第59页 |
·抗性苗的PCR检测 | 第59-60页 |
·转化pNapin-CarKCS的拟南芥抗性苗的PCR检测 | 第59-60页 |
·转化pNapin-ThlKCS的拟南芥抗性苗的PCR检测 | 第60页 |
·拟南芥转化效率的统计 | 第60-61页 |
第五章 讨论 | 第61-64页 |
1 关于启动子的选择 | 第61页 |
2 关于根癌农杆菌介导的油菜的遗传转化 | 第61-62页 |
3 关于FAE1 KCS基因与油菜及拟南芥转化受体的选择 | 第62-63页 |
4 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
缩写表 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-75页 |
作者简介 | 第75页 |