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碎米荠和遏蓝菜β-酮脂酰-CoA合酶(KCS)基因全长CDS序列的克隆、载体构建及遗传转化

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 文献综述第12-23页
 1 神经酸的研究进展第12-15页
   ·神经酸功能研究进展第12-13页
   ·植物体内C24:1的生物合成途径第13-15页
     ·质体内饱和脂肪酸从头合成途径第13-14页
     ·质体外VLCFAs的延长途径第14-15页
 2 KCS基因的研究进展第15-22页
   ·拟南芥KCS基因家族的研究进展第15-20页
     ·拟南芥KCS基因家族的发现第15-16页
     ·拟南芥KCS基因家族的分类第16-17页
     ·拟南芥KCS基因家族成员的结构及酶活性第17-18页
     ·拟南芥KCS基因的表达情况第18-20页
   ·KCS基因转化植物的研究第20页
   ·芸薹属植物中KCS酶研究第20-22页
 3 本研究的目的和意义第22-23页
第二章 CarKCS和ThlKCS基因的克隆与表达载体的构建第23-48页
 1 材料与方法第23-32页
   ·材料第23-24页
     ·品种第23页
     ·菌株第23页
     ·质粒载体第23页
     ·分子生物学试剂第23页
     ·仪器设备第23-24页
   ·方法第24-32页
     ·碎米荠和遏蓝菜DNA的提取第24-25页
     ·设计特异性引物第25页
     ·PCR扩增第25-26页
     ·PCR产物回收第26-27页
     ·目的片段连接到T载体及热激法转化大肠杆菌第27页
     ·质粒的提取、PCR检测及酶切验证第27-28页
     ·菌种保存及送测序第28页
     ·目的片段序列的生物信息学分析第28-29页
     ·表达载体的构建第29-30页
     ·工程菌的转化第30-32页
     ·PCR检测引物的设计第32页
 2 结果与分析第32-48页
   ·CarKCS基因的PCR扩增第32-33页
   ·CarKCS基因的菌落PCR及质粒酶切验证结果第33页
   ·ThlKCS基因片段克隆与菌落PCR结果第33-34页
   ·CarKCS基因测序结果的同源性比对分析第34-37页
   ·ThlKCS基因测序结果的同源性比对分析第37-40页
   ·CarKCS和ThlKCS蛋白结构分析第40-44页
     ·CarKCS的生物信息学及氨基酸序列分析第40-41页
     ·ThlKCS的生物信息学及氨基酸序列分析第41页
     ·CarKCS和ThlKCS蛋白酶活性位点的分析第41-42页
     ·CarKCS和ThlKCS蛋白质理化性质及高级结构分析第42-44页
   ·系统进化树分析第44-45页
   ·CarKCS基因表达载体的构建及酶切验证第45页
   ·ThlKCS基因表达载体的构建及菌落PCR检测第45-46页
   ·表达载体转化根癌农杆菌的质粒PCR检测结果第46-48页
第三章 高芥酸油菜GX-29的遗传转化及转化子的筛选第48-56页
 1 材料与方法第48-53页
   ·材料第48-51页
     ·供试品种第48页
     ·菌株与载体第48页
     ·仪器设备第48页
     ·培养基第48-51页
   ·方法第51-53页
     ·PPT使用浓度的确定第51页
     ·甘蓝型油菜的遗传转化第51-52页
     ·转化子筛选第52-53页
 2 结果与分析第53-56页
   ·抗性苗的PCR检测第53-54页
     ·转化pNapin-CarKCS的油菜抗性苗的PCR检测第53-54页
     ·转化pNapin-ThlKCS的油菜抗性苗的PCR检测第54页
   ·根癌农杆菌LBA4404介异转化高芥酸油菜GX-29的转化效率第54-55页
   ·油菜遗传转化的各个阶段第55-56页
第四章 拟南芥的遗传转化及转化子筛选第56-61页
 1 材料与方法第56-59页
   ·材料第56-57页
     ·供试品种、菌株与载体第56页
     ·药品与试剂第56页
     ·仪器设备第56-57页
   ·方法第57-59页
     ·拟南芥的种植第57页
     ·拟南芥的浸花转化第57-58页
     ·转化子的筛选第58-59页
 2 结果与分析第59-61页
   ·转化子的PPT筛选第59页
   ·抗性苗的PCR检测第59-60页
     ·转化pNapin-CarKCS的拟南芥抗性苗的PCR检测第59-60页
     ·转化pNapin-ThlKCS的拟南芥抗性苗的PCR检测第60页
   ·拟南芥转化效率的统计第60-61页
第五章 讨论第61-64页
 1 关于启动子的选择第61页
 2 关于根癌农杆菌介导的油菜的遗传转化第61-62页
 3 关于FAE1 KCS基因与油菜及拟南芥转化受体的选择第62-63页
 4 结论第63-64页
参考文献第64-71页
缩写表第71-73页
致谢第73-75页
作者简介第75页

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