| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-13页 |
| 附图清单 | 第13-16页 |
| 附表清单 | 第16-17页 |
| 主要缩略词和符号表 | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-28页 |
| ·真菌杀虫剂的特点和发展前景 | 第18页 |
| ·昆虫病原真菌基因工程研究进展 | 第18-19页 |
| ·真菌海藻糖相关研究进展 | 第19-21页 |
| ·海藻糖的理化性质 | 第19-20页 |
| ·胁迫环境条件下生物体细胞内海藻糖含量的变化 | 第20页 |
| ·海藻糖对生物分子的保护作用及其可能的作用机制 | 第20-21页 |
| ·真菌中海藻糖的主要合成途径 | 第21页 |
| ·热休克蛋白相关研究进展 | 第21-24页 |
| ·热休克蛋白的研究历史 | 第21-22页 |
| ·热休克蛋白的分类 | 第22页 |
| ·热休克蛋白的生物学功能 | 第22-24页 |
| ·昆虫病原真菌遗传转化方法研究进展 | 第24-26页 |
| ·昆虫病原真菌的遗传转化方法 | 第24-26页 |
| ·选择标记 | 第26页 |
| ·重组菌株的安全性问题 | 第26页 |
| ·总结与展望 | 第26-28页 |
| 第二章 引言 | 第28-29页 |
| ·研究目的意义 | 第28页 |
| ·主要研究内容 | 第28-29页 |
| 第三章 球孢白僵菌海藻糖6-磷酸合成酶基因tps/的cDNA及启动子克隆与分析 | 第29-55页 |
| ·材料和方法 | 第29-47页 |
| ·实验材料 | 第29-32页 |
| ·实验方法 | 第32-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-54页 |
| ·Bbtpsl基因cDNA的特异片段扩增 | 第47-49页 |
| ·Bbtpsl基因cDNA的3'/5'RACE扩增 | 第49页 |
| ·Bbtpsl基因cDNA克隆与序列分析 | 第49-50页 |
| ·Bbtpsl基因编码氨基酸的特征分析和高级结构预测 | 第50-53页 |
| ·Bbtpsl基因启动子的克隆与分析 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 球孢白僵菌海藻糖6-磷酸合成酶基因tpsl在胁迫条件下的转录表达差异分析 | 第55-77页 |
| ·材料和方法 | 第58-63页 |
| ·实验材料 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-76页 |
| ·球孢白僵菌孢子粉固态发酵培养 | 第63-68页 |
| ·球孢白僵菌孢子RNA的提取 | 第68页 |
| ·Realtime-PCR标准曲线的获得 | 第68-70页 |
| ·高温胁迫下球孢白僵菌菌丝中tpsl的相对表达 | 第70-71页 |
| ·低温胁迫下球孢白僵菌菌丝中tpsl的相对表达 | 第71-72页 |
| ·紫外胁迫下球孢白僵菌菌丝中tpsl的相对表达 | 第72-73页 |
| ·高温胁迫下球孢白僵菌孢子中tpsl的相对表达 | 第73-74页 |
| ·低温胁迫下球孢白僵菌孢子中tpsl的相对表达 | 第74-75页 |
| ·紫外胁迫下球孢白僵菌孢子中tpsl的相对表达 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-77页 |
| 第五章 球孢白僵菌海藻糖6-磷酸合成酶基因tpsl真核表达及功能分析 | 第77-97页 |
| ·材料和方法 | 第78-88页 |
| ·实验材料 | 第78-81页 |
| ·实验方法 | 第81-86页 |
| ·毕赤酵母高拷贝重组工程菌的筛选 | 第86-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-96页 |
| ·Bbtpsl基因的真核表达载体pPIC9K/tpsl的构建 | 第88-89页 |
| ·重组质粒转化毕赤酵母菌及转化子的初步筛选 | 第89-96页 |
| ·讨论 | 第96-97页 |
| 第六章 球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸合成酶基因tpsl重组工程菌株构建及评价 | 第97-108页 |
| ·材料和方法 | 第97-103页 |
| ·实验材料 | 第97-98页 |
| ·实验方法 | 第98-103页 |
| ·结果与分析 | 第103-106页 |
| ·pBARGPEl/tpsl载体的构建 | 第103页 |
| ·球孢白僵菌基因重组转化子的初筛和PCR检测 | 第103-105页 |
| ·重组球孢白僵菌工程菌株抗逆性评价 | 第105-106页 |
| ·讨论 | 第106-108页 |
| 第七章 球孢白僵菌热休克蛋白基因hsp70的cDNA及启动子克隆与分析 | 第108-117页 |
| ·材料和方法 | 第108-109页 |
| ·实验材料 | 第108页 |
| ·实验方法 | 第108-109页 |
| ·结果与分析 | 第109-115页 |
| ·Bbhsp70基因5'-末端与3'-末端克隆 | 第109-110页 |
| ·Bbhsp70基因cDNA克隆与序列分析 | 第110-111页 |
| ·Bbhsp70基因编码氨基酸的特征分析和高级结构预测 | 第111-114页 |
| ·Bbhsp70基因启动子的克隆与分析 | 第114-115页 |
| ·讨论 | 第115-117页 |
| 第八章 球孢白僵菌热休克蛋白基因hsp70在胁迫条件下的转录表达差异分析 | 第117-126页 |
| ·材料和方法 | 第117-119页 |
| ·菌株来源 | 第117页 |
| ·试剂 | 第117页 |
| ·总RNA的提取及cDNA的合成 | 第117-118页 |
| ·引物、Taqman探针的设计与合成 | 第118页 |
| ·标准曲线的制备 | 第118页 |
| ·胁迫条件下球孢白僵菌hsp70表达的相对定量检测 | 第118-119页 |
| ·数据分析 | 第119页 |
| ·结果与分析 | 第119-124页 |
| ·标准曲线的获得 | 第119-121页 |
| ·高温胁迫下球孢白僵菌hsp70的相对表达 | 第121-122页 |
| ·低温胁迫下球孢白僵菌hsp70的相对表达 | 第122-123页 |
| ·紫外胁迫下球孢白僵菌hsp70的相对表达 | 第123-124页 |
| ·讨论 | 第124-126页 |
| 第九章 球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶基因tps2的cDNA及启动子克隆与分析 | 第126-136页 |
| ·材料和方法 | 第126-127页 |
| ·实验材料 | 第126页 |
| ·实验方法 | 第126-127页 |
| ·结果与分析 | 第127-134页 |
| ·Bbtps2基因cDNA的特异片段扩增 | 第127-128页 |
| ·Bbtps2基因5'-末端与3'-末端克隆 | 第128-129页 |
| ·Bbtps2基因cDNA克隆与序列分析 | 第129-130页 |
| ·Bbtps2基因编码氨基酸的特征分析和高级结构预测 | 第130-133页 |
| ·Bbtps2基因启动子的克隆与分析 | 第133-134页 |
| ·讨论 | 第134-136页 |
| 第十章 总结 | 第136-139页 |
| 第十一章 创新点 | 第139-140页 |
| 参考文献 | 第140-153页 |
| 致谢 | 第153-154页 |
| 作者简介 | 第154页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第154页 |
| 参与的科研项目 | 第154页 |
