摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
文献综述 | 第12-23页 |
1 Toll 样受体家族的发现 | 第12-14页 |
2 TLR在宿主防御中的作用 | 第14-17页 |
3 牛的TLR | 第17-18页 |
4 TLR 介导的免疫调节 | 第18-20页 |
5 TLRs介导的信号传导通路 | 第20-21页 |
6 本论文研究的意义及主要内容 | 第21-23页 |
试验部分 | 第23-48页 |
第一章 牛外周血单核细胞和巨噬细胞分离培养和纯化方法 | 第23-30页 |
1 材料与方法 | 第23-26页 |
·试验动物 | 第23页 |
·外周血淋巴细胞的分离以及单核细胞和巨噬细胞的培养 | 第23-25页 |
·Flow cytometry解析 | 第25页 |
·May-Grunwald Giemsa染色 | 第25-26页 |
2 结果与分析 | 第26-28页 |
·单核细胞和巨噬细胞的形态特征 | 第26-27页 |
·CD14 表面抗体在单核细胞和巨噬细胞中的表达 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28-29页 |
4 小结 | 第29-30页 |
第二章 牛外周血单核细胞和巨噬细胞中Toll样受体m RNA水平的表达量 | 第30-40页 |
1 材料与方法 | 第30-34页 |
·试验动物 | 第30页 |
·外周血淋巴细胞的分离 | 第30页 |
·Magnetic cell sorting(MACS)法分离单核细胞(Mo) | 第30页 |
·单核细胞由来的巨噬细胞(Mod-Mφ)的分离和培养 | 第30-31页 |
·Lipopolysaccarid(LPS,脂多糖)刺激培养 | 第31页 |
·RNA 提取 | 第31-32页 |
·RT-PCR 法 | 第32-33页 |
·凝胶电泳 | 第33-34页 |
·统计分析 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-37页 |
·单核细胞中细胞因子mRNA 在LPS 刺激作用下的变化 | 第34页 |
·单核细胞中Toll样受体mRNA在LPS刺激作用下的变化 | 第34-35页 |
·单核细胞由来的巨噬细胞中细胞因子mRNA 在LPS 刺激作用下的变化 | 第35-36页 |
·单核细胞由来的巨噬细胞中Toll样受体mRNA在LPS刺激作用下的变化 | 第36-37页 |
3 讨论 | 第37-39页 |
4 小结 | 第39-40页 |
第三章 牛外周血单核细胞和巨噬细胞中 Toll 样受体蛋白质水平的表达量 | 第40-48页 |
1 材料与方法 | 第40-41页 |
·试验动物 | 第40页 |
·外周血淋巴细胞的分离以及单核细胞和巨噬细胞的培养 | 第40页 |
·荧光免疫染色 | 第40-41页 |
·Flow cytometry 解析 | 第41页 |
·Lipopolysaccarid(LPS,脂多糖)刺激培养 | 第41页 |
2 结果与分析 | 第41-45页 |
·单核细胞表面TLR2 和TLR4 的分布 | 第41页 |
·单核细胞由来的巨噬细胞表面TLR2 和TLR4 的分布 | 第41-43页 |
·单核细胞TLR2 和TLR4 蛋白质水平的表达 | 第43页 |
·LPS 刺激条件下单核细胞TLR2 和TLR4 蛋白质水平的表达 | 第43-44页 |
·单核细胞由来的巨噬细胞TLR2 和TLR4 蛋白质水平的表达 | 第44-45页 |
·LPS刺激条件下单核细胞TLR2和TLR4蛋白质水平的表达 | 第45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
4 结论 | 第47-48页 |
结论与研究展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第58页 |