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香根草忍耐铅污染的生理生化机理及香根草转AtCBF3基因体系的构建

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
符号说明第12-14页
第一章 文献综述第14-28页
   ·引言第14-15页
   ·重金属污染与治理第15-19页
     ·植物修复技术在重金属污染土壤治理上的应用第16-18页
       ·螯合诱导修复技术第17页
       ·遗传改良技术第17-18页
     ·铅的毒性第18页
     ·植物对铅的吸收和运输第18-19页
   ·植物耐/抗寒性生理生化机理第19-25页
     ·植物受低温胁迫的伤害机理第19-20页
     ·植物耐/抗寒性研究第20页
     ·植物遗传转化的主要方法第20-22页
       ·基因枪技术第20-21页
       ·农杆菌介导法第21-22页
     ·草类植物转基因研究进展第22页
     ·抗寒基因工程第22-25页
   ·植物组织培养的研究第25-27页
   ·本实验研究的目的及意义第27-28页
第二章 香根草对铅污染土壤的修复潜能研究第28-42页
   ·前言第28页
   ·实验材料与处理第28-29页
   ·测定项目与方法第29-32页
     ·植株外观伤害症状第29页
     ·植株根冠比测定第29页
     ·叶片生长速率测定第29页
     ·叶绿素含量的测定第29-30页
     ·丙二醛含量的测定第30页
     ·酶活性测定第30-31页
       ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定(氮蓝四唑光化还原法)第30-31页
       ·过氧化物酶(POD)活性的测定(愈创木酚法)第31页
       ·过氧化氢酶(CAT)活性的测定第31页
     ·原子吸收光谱分析香根草不同部位铅的含量与分布第31-32页
   ·结果与分析第32-40页
     ·不同 PB 浓度对植株外观伤害症状的影响第32-33页
     ·不同 PB 浓度处理对香根草植株根冠比的影响第33页
     ·不同 Pb 浓度处理对香根草叶片生长速率的影响第33-34页
     ·不同 PB 浓度处理对香根草叶片叶绿素含量的影响第34-36页
     ·不同 PB 浓度处理对香根草植株体丙二醛含量的影响第36-37页
     ·不同 PB 浓度处理对香根草植株体保护酶活性的影响第37-39页
     ·不同 PB 浓度处理下香根草根茎对 PB 的吸收第39-40页
   ·讨论第40-42页
第三章 香根草再生体系的建立第42-52页
   ·前言第42页
   ·材料与方法第42-43页
     ·材料与培养基第42-43页
     ·方法第43页
       ·超净工作台、接种室及培养室的消毒第43页
       ·培养环境第43页
       ·组织培养评价指标第43页
   ·实验内容第43-45页
     ·外植体消毒处理的优化第43-44页
     ·不同2,4-D 浓度对香根草愈伤诱导率的影响第44页
     ·不同 KT 浓度对香根草愈伤诱导率的影响第44-45页
     ·水解酪蛋白对香根草愈伤诱导率的影响第45页
     ·不同固化剂对香根草愈伤诱导率的影响第45页
     ·愈伤组织的分化与植株的生根培养第45页
     ·以无菌苗各组织为外植体诱导愈伤第45页
   ·结果与分析第45-51页
     ·不同2,4-D 浓度对香根草愈伤诱导率的影响第46-47页
     ·不同 KT 浓度对香根草愈伤诱导率的影响第47-48页
     ·水解酪蛋白对香根草愈伤诱导率的影响第48-49页
     ·不同固化剂对香根草愈伤诱导率的影响第49-50页
     ·愈伤组织的分化与植株的生根培养第50-51页
     ·以无菌苗各组织为外植体诱导愈伤第51页
   ·讨论第51-52页
第四章 农杆菌介导的遗传转化体系的建立第52-62页
   ·引言第52-53页
   ·实验材料第53-54页
     ·菌株和质粒本实验所用菌株和质粒第53页
     ·酶及相关试剂第53页
     ·植物材料和培养基第53页
     ·ATCBF3 序列及翻译的蛋白第53-54页
   ·实验方法第54-59页
     ·PMDTM-18T SIMPLE VECTOR-ATCBF3 质粒的构建第54-57页
       ·引物设计第54页
       ·拟南芥总DNA 的提取和目的基因的合成第54-55页
       ·回收目的片段第55页
       ·目的基因连接到PMDTM-18T SIMPLE VECTOR第55页
       ·大肠杆菌(E.COLI)DH5Α感受态细胞的制备第55-56页
       ·连接产物转化大肠杆菌DH5Α感受态细胞第56页
       ·PMDTM-18T SIMPLE VECTOR-ATCBF3 质粒的提取第56-57页
     ·植物表达载体PCAMBIA1301-ATCBF3 的构建第57页
     ·农杆菌介导的遗传转化第57-58页
       ·农杆菌EHA 105 感受态的制备第57-58页
       ·转化第58页
     ·根癌农杆菌介导的遗传转化和抗性愈伤的筛选及其再生第58-59页
   ·结果与分析第59-62页
     ·目的基因ATCBF3 的克隆及其鉴定第59页
     ·表达载体的构建与鉴定第59-60页
     ·农杆菌介导的遗传转化和植株再生第60-62页
参考文献第62-69页
附录第69-75页
 1. 香根草水培液配方(参照国际水稻所营养液配方)第69-70页
 2. 有关培养基配方第70-71页
 3. PMDTM-18T SIMPLE VECTOR-ATCBF3 测序比对结果第71-73页
 4. 植物总 DNA 的提取第73-74页
 5. 琼脂糖凝胶回收目的 DNA 片段第74-75页
致谢第75页

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