盐穗木miR417编码序列的克隆及遗传转化研究
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 英文缩略语 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-30页 |
| 第一章 植物miRNA 抗胁迫机理研究进展 | 第12-20页 |
| 1 植物miRNA 的特点 | 第12-14页 |
| ·植物miRNA 与动物miRNA 的比较 | 第12-13页 |
| ·miRNA 与siRNA 的关系 | 第13-14页 |
| 2 植物miRNA 抗胁迫研究 | 第14-17页 |
| ·miRNA 与生物胁迫 | 第14-15页 |
| ·miRNA 与环境胁迫 | 第15-17页 |
| ·在胁迫条件下控制植物生长和发育的miRNA | 第17页 |
| 3 植物miRNA 研究方法 | 第17-19页 |
| ·直接克隆法或遗传学方法 | 第17-18页 |
| ·生物信息学预测法 | 第18-19页 |
| ·微阵列法 | 第19页 |
| ·高通量测序 | 第19页 |
| 4 展望 | 第19-20页 |
| 第二章 植物耐盐机理研究进展 | 第20-25页 |
| 1 盐胁迫对植物的危害 | 第20-22页 |
| ·影响植物种子萌发 | 第20-21页 |
| ·影响植物生长发育 | 第21页 |
| ·影响植物新成代谢 | 第21-22页 |
| 2 盐胁迫对植物的伤害机理 | 第22-23页 |
| ·活性氧伤害 | 第22页 |
| ·离子伤害 | 第22页 |
| ·渗透伤害 | 第22-23页 |
| ·有毒物质积累的伤害 | 第23页 |
| 3 植物对盐分胁迫的适应及抗盐机理 | 第23-24页 |
| ·植物对盐分胁迫的表观适应 | 第23页 |
| ·植物对盐分胁迫的生理抗性 | 第23-24页 |
| 4 植物耐盐的生理生化指标 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-30页 |
| 第二部分 试验部分 | 第30-61页 |
| 第一章 盐穗木miR417 编码序列的克隆 | 第30-42页 |
| 1 材料与试剂 | 第30-31页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌株和质粒 | 第30-31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| 2 方法 | 第31-35页 |
| ·miR417 编码序列引物设计 | 第31页 |
| ·提取盐穗木基因组 | 第31-33页 |
| ·梯度PCR 扩增 | 第33页 |
| ·目的片段回收 | 第33页 |
| ·连接pBS-T 载体 | 第33页 |
| ·重组质粒的转化和筛选 | 第33-34页 |
| ·菌落PCR 和酶切鉴定 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-39页 |
| ·盐穂木基因组提取 | 第35-36页 |
| ·梯度PCR 结果 | 第36-37页 |
| ·菌落PCR 结果 | 第37页 |
| ·质粒酶切鉴定结果 | 第37页 |
| ·测序结果及分析 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 第二章 盐穗木miR417 表达载体构建 | 第42-52页 |
| 1 材料 | 第42-43页 |
| ·菌株与质粒 | 第42页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第42-43页 |
| ·其他实验材料 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43-48页 |
| ·片段合成与退火 | 第44页 |
| ·pCAMBIA1301 质粒酶切鉴定与回收 | 第44-45页 |
| ·连接 | 第45页 |
| ·转化大肠杆菌DH5α | 第45-46页 |
| ·小提质粒酶切鉴定 | 第46页 |
| ·转化农杆菌感受态细胞 | 第46-47页 |
| ·菌落PCR | 第47页 |
| ·质粒小量提取并转化DH5α | 第47页 |
| ·小提质粒酶切鉴定 | 第47-48页 |
| 3 结果 | 第48-50页 |
| ·片段退火 | 第48页 |
| ·pCAMBIA1301 质粒酶切鉴定 | 第48-49页 |
| ·pCAMBIA1301 酶切产物回收 | 第49页 |
| ·菌落PCR | 第49-50页 |
| ·小提质粒酶切鉴定并测序 | 第50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 第三章 盐穂木miR417 编码序列遗传转化研究 | 第52-58页 |
| 1 材料 | 第52-53页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52-53页 |
| ·栽培基质 | 第53页 |
| ·营养液 | 第53页 |
| 2 方法 | 第53-55页 |
| ·拟南芥的播种及移栽 | 第53-54页 |
| ·拟南芥的基因转化 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-56页 |
| ·拟南芥的播种与移栽 | 第55页 |
| ·阳性植株的筛选 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 结论与展望 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 个人简历 | 第63页 |
