摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-40页 |
·转录因子概述 | 第13-16页 |
·转录因子的结构特征 | 第13-15页 |
·转录因子的分类及功能 | 第15-16页 |
·研究植物基因功能的主要策略 | 第16-24页 |
·基因功能缺失突变 | 第17-21页 |
·反义抑制和共抑制 | 第17页 |
·插入突变 | 第17-18页 |
·RNA干扰 | 第18-21页 |
·基因功能获得性突变 | 第21-24页 |
·基因超量表达 | 第21-22页 |
·基因诱导表达 | 第22页 |
·基因异位表达 | 第22-24页 |
·研究基因功能的其他方法 | 第24-27页 |
·酵母双杂交系统 | 第24-25页 |
·分子荧光互补技术 | 第25-26页 |
·免疫共沉淀 | 第26-27页 |
·与植物表皮毛发育相关的转录因子的研究进展 | 第27-38页 |
·MYB类转录因子 | 第27-32页 |
·含WD40重复序列的转录因子 | 第32-33页 |
·bHLH类转录因子 | 第33-34页 |
·含HD-ZIP的转录因子 | 第34-35页 |
·WRKY类转录因子 | 第35-38页 |
·本研究的目的和意义 | 第38-40页 |
2 材料与方法 | 第40-53页 |
·植物材料 | 第40页 |
·菌株、质粒、载体和感受态细胞 | 第40-41页 |
·基因序列分析 | 第41页 |
·载体的构建 | 第41-46页 |
·超量表达载体的构建 | 第41-42页 |
·RNAi抑制表达载体的构建 | 第42-45页 |
·酵母双杂交载体的构建 | 第45-46页 |
·双分子荧光互补载体的构建 | 第46页 |
·烟草遗传转化及转基因烟草的获得 | 第46-47页 |
·DNA的抽提与PCR阳性检测 | 第47-48页 |
·烟草叶片DNA小量法抽提 | 第47-48页 |
·转基因烟草PCR阳性检测 | 第48页 |
·RNA的抽提和反转录 | 第48页 |
·RT-PCR和实时定量RT-PCR的检测 | 第48-49页 |
·石蜡切片 | 第49-50页 |
·电镜扫描 | 第50页 |
·类黄酮类物质的提取与测定 | 第50-51页 |
·花青素的提取和测定 | 第50-51页 |
·黄酮醇的提取和测定 | 第51页 |
·转基因烟草叶片表皮毛及根毛数量的观察与测定 | 第51-52页 |
·酵母双杂交 | 第52页 |
·双分子荧光互补实验(BiFC) | 第52-53页 |
3 结果与分析 | 第53-75页 |
·候选基因片段的获得 | 第53页 |
·遗传转化材料的获得 | 第53-56页 |
·超量表达转化载体的构建 | 第53-54页 |
·抑制表达转化载体的构建 | 第54-55页 |
·农杆菌介导的转化 | 第55页 |
·T_0代转基因植株的阳性检测 | 第55-56页 |
·AtCPC基因在烟草中的功能研究 | 第56-75页 |
·AtCPC超量表达转基因烟草花朵颜色部分或全部缺失 | 第56-58页 |
·AtCPC RNAi二次转化转基因烟草花朵颜色全部或部分回复 | 第58页 |
·AtCPC超量表达转基因烟草叶片表皮毛及根毛的分布密度发生变化 | 第58-61页 |
·AtCPC超量表达转基因烟草花瓣表皮细胞部分发育异常 | 第61-64页 |
·AtCPC超量表达转基因烟草花瓣中花青素的含量降低 | 第64-66页 |
·AtCPC转基因烟草花色的表型与AtCPC基因的表达水平密切相关 | 第66-68页 |
·AtCPC超量表达转基因烟草中类黄酮合成路径中下游的基因表达量降低 | 第68-72页 |
·AtCPC蛋白与已知的花青素合成调控因子有相互作用 | 第72-75页 |
4 讨论 | 第75-85页 |
·AtCPC在烟草花青素合成中的功能 | 第75-78页 |
·AtCPC对烟草表皮毛发育的影响 | 第78-80页 |
·关于AtCPC等MYB基因在观赏植物分子育种应用上的思考 | 第80-83页 |
·关于后续工作的设想 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-104页 |
附录A 部分实验的操作流程 | 第104-115页 |
附录B | 第115-116页 |
致谢 | 第116-118页 |