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与表皮毛发育相关的MYB家族基因对转基因烟草花色的影响

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
缩略语表第12-13页
1 前言第13-40页
   ·转录因子概述第13-16页
     ·转录因子的结构特征第13-15页
     ·转录因子的分类及功能第15-16页
   ·研究植物基因功能的主要策略第16-24页
     ·基因功能缺失突变第17-21页
       ·反义抑制和共抑制第17页
       ·插入突变第17-18页
       ·RNA干扰第18-21页
     ·基因功能获得性突变第21-24页
       ·基因超量表达第21-22页
       ·基因诱导表达第22页
       ·基因异位表达第22-24页
   ·研究基因功能的其他方法第24-27页
     ·酵母双杂交系统第24-25页
     ·分子荧光互补技术第25-26页
     ·免疫共沉淀第26-27页
   ·与植物表皮毛发育相关的转录因子的研究进展第27-38页
     ·MYB类转录因子第27-32页
     ·含WD40重复序列的转录因子第32-33页
     ·bHLH类转录因子第33-34页
     ·含HD-ZIP的转录因子第34-35页
     ·WRKY类转录因子第35-38页
   ·本研究的目的和意义第38-40页
2 材料与方法第40-53页
   ·植物材料第40页
   ·菌株、质粒、载体和感受态细胞第40-41页
   ·基因序列分析第41页
   ·载体的构建第41-46页
     ·超量表达载体的构建第41-42页
     ·RNAi抑制表达载体的构建第42-45页
     ·酵母双杂交载体的构建第45-46页
     ·双分子荧光互补载体的构建第46页
   ·烟草遗传转化及转基因烟草的获得第46-47页
   ·DNA的抽提与PCR阳性检测第47-48页
     ·烟草叶片DNA小量法抽提第47-48页
     ·转基因烟草PCR阳性检测第48页
   ·RNA的抽提和反转录第48页
   ·RT-PCR和实时定量RT-PCR的检测第48-49页
   ·石蜡切片第49-50页
   ·电镜扫描第50页
   ·类黄酮类物质的提取与测定第50-51页
     ·花青素的提取和测定第50-51页
     ·黄酮醇的提取和测定第51页
   ·转基因烟草叶片表皮毛及根毛数量的观察与测定第51-52页
   ·酵母双杂交第52页
   ·双分子荧光互补实验(BiFC)第52-53页
3 结果与分析第53-75页
   ·候选基因片段的获得第53页
   ·遗传转化材料的获得第53-56页
     ·超量表达转化载体的构建第53-54页
     ·抑制表达转化载体的构建第54-55页
     ·农杆菌介导的转化第55页
     ·T_0代转基因植株的阳性检测第55-56页
   ·AtCPC基因在烟草中的功能研究第56-75页
     ·AtCPC超量表达转基因烟草花朵颜色部分或全部缺失第56-58页
     ·AtCPC RNAi二次转化转基因烟草花朵颜色全部或部分回复第58页
     ·AtCPC超量表达转基因烟草叶片表皮毛及根毛的分布密度发生变化第58-61页
     ·AtCPC超量表达转基因烟草花瓣表皮细胞部分发育异常第61-64页
     ·AtCPC超量表达转基因烟草花瓣中花青素的含量降低第64-66页
     ·AtCPC转基因烟草花色的表型与AtCPC基因的表达水平密切相关第66-68页
     ·AtCPC超量表达转基因烟草中类黄酮合成路径中下游的基因表达量降低第68-72页
     ·AtCPC蛋白与已知的花青素合成调控因子有相互作用第72-75页
4 讨论第75-85页
   ·AtCPC在烟草花青素合成中的功能第75-78页
   ·AtCPC对烟草表皮毛发育的影响第78-80页
   ·关于AtCPC等MYB基因在观赏植物分子育种应用上的思考第80-83页
   ·关于后续工作的设想第83-85页
参考文献第85-104页
附录A 部分实验的操作流程第104-115页
附录B第115-116页
致谢第116-118页

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