摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
1 引言 | 第14-47页 |
·皮肤和毛囊的基本结构 | 第14页 |
·哺乳动物毛囊的胚胎发生与分子调控 | 第14-18页 |
·哺乳动物毛囊的胚胎发生 | 第14-16页 |
·哺乳动物毛囊形态发生相关的信号分子 | 第16-18页 |
·毛囊的周期性变化与分子调控 | 第18-21页 |
·毛囊的周期性 | 第18-20页 |
·毛囊周期性变化的分子调控 | 第20-21页 |
·绒山羊绒毛生长发育研究现状 | 第21-25页 |
·绒山羊毛被特点 | 第22页 |
·内蒙古绒山羊皮肤和毛囊的结构特征 | 第22页 |
·内蒙古绒山羊皮肤和毛囊的形态发生 | 第22-23页 |
·内蒙古绒山羊毛囊的周期性变化 | 第23页 |
·绒山羊绒毛生长调控研究 | 第23-25页 |
·皮肤干细胞研究进展 | 第25-38页 |
·皮肤干细胞的定义及其生物学特性 | 第25-26页 |
·皮肤干细胞的表面标志分子 | 第26-28页 |
·皮肤干细胞的分布位置 | 第28-29页 |
·皮肤干细胞的分离 | 第29-30页 |
·微环境对皮肤干细胞增殖分化的调控 | 第30-37页 |
·皮肤干细胞的可塑性 | 第37-38页 |
·皮肤干细胞的应用 | 第38页 |
·筛选差异表达基因的研究进展 | 第38-42页 |
·基因水平筛选差异基因 | 第39-41页 |
·蛋白质水平筛选差异基因 | 第41-42页 |
·生物信息学的分析方法 | 第42-46页 |
·生物信息学常用数据库 | 第42-43页 |
·生物信息学的基本研究内容 | 第43-44页 |
·生物信息学研究热点 | 第44-45页 |
·生物信息学的发展趋势 | 第45页 |
·生物信息学的应用 | 第45-46页 |
·本研究的目的与意义 | 第46-47页 |
2 研究一 绒山羊皮肤干细胞定位、迁移的初步研究 | 第47-65页 |
·实验材料 | 第47-49页 |
·实验试剂与药品 | 第47页 |
·实验仪器与设备 | 第47页 |
·主要液体的配制 | 第47-48页 |
·实验动物 | 第48-49页 |
·实验方法 | 第49-52页 |
·BRDU 活体标记 | 第49页 |
·绒山羊皮肤组织石蜡切片的制作 | 第49页 |
·SAPIC法染色 | 第49页 |
·HE 染色 | 第49页 |
·免疫组织化学S-P 法检测BRDU | 第49-51页 |
·BRDU 标记滞留细胞的体外分离培养及初步鉴定 | 第51-52页 |
·结果 | 第52-59页 |
·皮肤切片的SAPIC法染色和HE 染色 | 第52-53页 |
·BRDU 标记细胞的分布 | 第53-56页 |
·BRDU 标记滞留细胞的体外分离培养及初步鉴定 | 第56-59页 |
·绒山羊皮肤干细胞的定位 | 第59页 |
·讨论 | 第59-64页 |
·BRDU 标记绒山羊皮肤组织的体会 | 第59-62页 |
·绒山羊初级、次级毛囊体外分离的体会 | 第62-63页 |
·BRDU 标记绒山羊皮肤干细胞的可行性 | 第63-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
3 研究二 绒山羊次级毛囊重建前后差异表达基因CDNA 文库的构建及评价 | 第65-84页 |
·实验材料 | 第65-66页 |
·实验试剂与药品 | 第65-66页 |
·实验仪器与设备 | 第66页 |
·实验动物 | 第66页 |
·实验方法 | 第66-73页 |
·绒山羊生长期和休止期次级毛囊的分离 | 第66页 |
·生长期和休止期次级毛囊总RNA 的提取 | 第66-67页 |
·次级毛囊总RNA 的检测 | 第67页 |
·RNA 溶液的保存 | 第67页 |
·CDNA 的合成 | 第67-69页 |
·RSA I 酶切及其效率验证 | 第69页 |
·接头连接 | 第69-70页 |
·第一次消减杂交 | 第70页 |
·第二次消减杂交 | 第70-71页 |
·第一次PCR 扩增 | 第71页 |
·第二次PCR 扩增 | 第71-72页 |
·PCR 产物纯化 | 第72页 |
·PCR 产物与质粒载体连接与转化 | 第72页 |
·单克隆检测 | 第72-73页 |
·结果 | 第73-77页 |
·绒山羊次级毛囊消减文库构建策略 | 第73页 |
·次级毛囊总RNA 的产量和纯度鉴定 | 第73-75页 |
·SMART CDNA 的合成 | 第75-76页 |
·RSAI 酶切效果验证 | 第76页 |
·消减杂交前后的第二次PCR 产物的检测 | 第76页 |
·差异表达基因CDNA 片段的T/A 克隆 | 第76-77页 |
·差异表达基因 CDNA 片段的克隆和鉴定 | 第77页 |
·讨论 | 第77-83页 |
·总 RNA 分离的体会 | 第77-78页 |
·SMART 技术合成CDNA 的优势 | 第78-80页 |
·抑制性消减杂交技术(SSH)及构建 SSH 消减文库的体会 | 第80-82页 |
·T/A 克隆 | 第82-83页 |
·小结 | 第83-84页 |
4 研究三 绒山羊次级毛囊重建前后 CDNA 消减文库测序及分析 | 第84-104页 |
·实验材料 | 第84页 |
·实验方法 | 第84-85页 |
·CDNA 消减文库测序 | 第84页 |
·CDNA 消减文库的生物信息学分析 | 第84-85页 |
·结果 | 第85-102页 |
·消减文库序列的生物信息学分析 | 第85-101页 |
·新序列的核酸提交信息 | 第101-102页 |
·讨论 | 第102-103页 |
·小结 | 第103-104页 |
5 研究四 CDNA 表达谱芯片筛选绒山羊绒毛生长相关的基因 | 第104-112页 |
·实验试剂与药品 | 第104页 |
·实验方法 | 第104-108页 |
·RNA 的提取及鉴定 | 第104页 |
·对样品 RNA 进行荧光标记 | 第104-106页 |
·杂交与清洗 | 第106-107页 |
·芯片扫描 | 第107页 |
·芯片图像的采集与数据分析 | 第107-108页 |
·结果 | 第108-110页 |
·TOTAL RNA 质检结果 | 第108页 |
·纯化后 PCR 产物 | 第108-109页 |
·芯片杂交结果 | 第109-110页 |
·讨论 | 第110-112页 |
·应用 CDNA 芯片与SSH 结合筛选绒山羊绒毛生长相关的差异表达基因 | 第110-111页 |
·休止期次级毛囊差异表达基因 | 第111-112页 |
·小结 | 第112页 |
6 论文总体结论 | 第112-113页 |
7 本研究的创新之处 | 第113-114页 |
致谢 | 第114-115页 |
参考文献 | 第115-130页 |
作者简介 | 第130页 |