| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-8页 |
| 材料与方法 | 第8-30页 |
| 1. 实验材料 | 第8-14页 |
| ·菌株和细胞株 | 第8页 |
| ·质粒载体 | 第8页 |
| ·引物序列 | 第8-11页 |
| ·工具酶及分子标准 | 第11页 |
| ·试剂盒及试剂 | 第11页 |
| ·培养基 | 第11页 |
| ·抗体 | 第11-12页 |
| ·Western Blotting相关产品 | 第12页 |
| ·数据库网站和分析软件 | 第12页 |
| ·主要仪器及设备 | 第12-14页 |
| 2. 实验方法 | 第14-30页 |
| ·载体pGEX-4T-1-p58的构建 | 第14-18页 |
| ·蛋白诱导表达、菌液处理及考马斯亮蓝染色 | 第18-19页 |
| ·Western blot验证蛋白表达 | 第19-21页 |
| ·Western Blot相关试剂的配置 | 第21-24页 |
| ·真核细胞培养 | 第24-25页 |
| ·脂质体介导的真核细胞转染 | 第25页 |
| ·稳定转染单克隆细胞的筛选 | 第25页 |
| ·蛋白表达检测 | 第25-26页 |
| ·PI染色及流式细胞分析 | 第26页 |
| ·MTT检测 | 第26-27页 |
| ·细胞核DAPI染色 | 第27页 |
| ·细胞RNA提取,反转录与Real-time PCR | 第27-29页 |
| ·统计分析 | 第29-30页 |
| 实验结果 | 第30-38页 |
| 1. 载体pGEX-4T-1-p58的构建 | 第30-32页 |
| ·基因克隆 | 第30页 |
| ·构建pGEX-4T-1-p58表达载体 | 第30页 |
| ·载体pGEX-4T-1-p58的测序鉴定 | 第30-32页 |
| 2. pGEX-4T-1-p58原核表达载体在大肠埃希菌中的诱导表达 | 第32页 |
| 3. Western blot鉴定融合蛋白 | 第32-33页 |
| 4. p58-MIAPaCa-2稳定转染细胞的鉴定 | 第33页 |
| 5. 过表达CDK11~(p58)对MIAPaCa-2细胞形态的影响 | 第33-34页 |
| 6. 过表达CDK11~(p58)对MIAPaCa-2细胞核形态的影响 | 第34-35页 |
| 7. 细胞周期检测 | 第35页 |
| 8. 细胞增殖检测 | 第35-36页 |
| 9. 细胞周期相关基因 mRNA表达水平检测 | 第36-38页 |
| 讨论 | 第38-42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 缩略词表 | 第47-49页 |
| 综述 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
